微生物污染的排除

細胞受各種霉菌、細菌和支原體污染后，一般都較難排除或殺滅，其中以支原體更難排除，因此從預防著(zhù)眼為上。

 

1．抗生素制備：均可用PBS配成250×濃縮液－20℃備用。

2．處理：取受支原體污染的細胞，吸除培養液，加入含BM-1的1640培養液培養3天后，吸除培養液，再加入含BM-2的1640培養液培養4天，如此連續三個(gè)輪回。

3．檢測：用33258熒光染色鏡檢（每個(gè)輪回末應檢測一次）。

4．培養：清除支原體后的細胞，在不加上述抗生素的培養液中，再傳代培養3～4次。

5．鏡檢：如清除不徹底可再進(jìn)行處理至純凈為止（一般3個(gè)輪回即能被完全消除）。BM-1和BM-2與CIP（4-氟，2-羥基喹啉）聯(lián)合應用亦可，即先用含BIP培養液培養12天后，再按上述方法處理。

 

把受污染的細胞置41℃中作用5～10小時(shí)。

 

把受支原體污染的腫瘤細胞接種在同種動(dòng)物皮下或腹腔中，借動(dòng)物免疫系統消滅支原體，而腫瘤細胞卻能在體內繼續生長(cháng)，待一定時(shí)間后，從體內取出細胞再進(jìn)行培養繁殖。

 

從動(dòng)物腹腔采取巨噬細胞，為排除其它細胞成分，可先進(jìn)行純化，然后再加入被支原體污染的細胞培養液中混合培養。在培養過(guò)程中，為檢查支原體是否已被消除干凈，可利用支持物培養法驗證，取出支持物逐日染色、鏡檢觀(guān)察，至支原體已被消除干凈為止。