《水生微生物實(shí)驗法》——從沉積物中分離霉菌

在海洋中霉菌比放線(xiàn)菌多，但比細菌少．霉菌分布在近岸海水、海泥及海藻休上．多數是陸上常見(jiàn)的霉菌．也有引起魚(yú)類(lèi)疾病的水霉目血鰓霉、膚鰓霉和綿霉，是水中分解動(dòng)植物殘體的常見(jiàn)霉菌

1 ．培養基成分及其制備

（1）麥芽汁是釀造啤酒前未經(jīng)發(fā)酵，未加酒花的新鮮麥芽汁，可向啤酒廠(chǎng)購買(mǎi)，也可自制。取麥芽粉1公斤加水3 升，在60℃ 下保溫，使其糖化至無(wú)淀粉反應（檢查方法：取糖化液0.5毫升．加碘液2 滴，如無(wú)藍色出現即糖化完全）為止．過(guò)濾，加2-3 個(gè)雞蛋清（有助于麥芽汁澄清）、拌勻．煮沸，再過(guò)濾．則得麥芽汁。加自來(lái)水（或海水）稀釋至10-15 波美，調pH4.2 ，如制成固體培養基則加2%瓊脂，分裝燒瓶中．121℃ 蒸汽下滅菌15 分鐘。制成平板或斜面，可培養霉菌或酵母菌。

（2）麥芽汁培養基：

麥芽膏20克

瓊脂20 克

陳海水或自來(lái)水1000毫升

將各成分溶解于水中，用氫氧化鈉溶液調pH 至6.5 ，分裝，121 ℃ 蒸汽下滅菌20 分鐘。制成平板或斜面，待用。

（3）麥芽汁葡萄糖瓊脂：

麥芽膏20 克

葡萄糖20 克

蛋白胨l 克．

瓊脂20克

陳海水或蒸餾水1000毫升

將各成分溶解于水后，分裝，112℃ 蒸汽下滅菌15 分鐘．制成平板或斜面．

2 ．分離步驟

（1）按10倍稀釋法將樣品制成合適的稀釋液（10^-2、10^-3、10^-4）。

（2）各取0.1毫升稀釋液于加數滴80%乳酸的麥芽葡萄糖瓊脂平板培養基上，用無(wú)菌彎曲玻棒涂勻．每個(gè)稀釋度制2 個(gè)培養皿。

（3）倒置培養皿于25-30 ℃ 下培養3-4 天．

（4）觀(guān)察菌落特征，挑取所需菌落接種于斜面培養基上．

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