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    培養基的一般常用成分(2)



    錄入時(shí)間:2010-8-26 15:27:22 來(lái)源:青島海博《現代細菌學(xué)培養基和生化試驗手冊》

     

    (三)蛋白胨和蛋白質(zhì)水解物

    蛋白質(zhì)分子在水解過(guò)程中生成一系列的產(chǎn)物。這些產(chǎn)物按其復雜程度而分的次序是;月示,胨,多肽,最后產(chǎn)物是氨基酸。有些氨基酸在早期的水解過(guò)程中就可裂解出來(lái)。

    月示和胨并不是均性的化學(xué)實(shí)體,而是原始蛋白質(zhì)分子斷片的混合物。月示和胨在組成上及大小上各不相同,將其歸于一類(lèi)僅權是因為都表現有某些共同的特性之故。在各種斷片中,當溶液被硫酸銨半飽和時(shí)沉淀而出的稱(chēng)為初級月示,被硫酸銨全飽和時(shí)沉淀而出的稱(chēng)為次級月示。而胨則不發(fā)生沉淀。月示仍表現有膠體性質(zhì),但已有逐漸減少的趨勢。待蛋白質(zhì)分子分解至胨的階段時(shí),膠體性質(zhì)已完全消失。因此,胨除去硫酸銨飽和時(shí)不發(fā)生沉淀外,還可以擴散透過(guò)火棉膠薄膜,也不呈現蛋白質(zhì)某些特殊的沉淀反應。

    因為月示和胨都是原始蛋白質(zhì)分子斷片的非均相混合物,因此不同的制備方法將使月示和胨在組成上及性質(zhì)上有所差異。這些差異決定于用作原始材料的蛋白質(zhì)的本質(zhì),水解方法以及用于分離各種產(chǎn)物的方法。因此,市售的各種蛋白胨在組成上是互有差別的,所以在使用時(shí)應對各種蛋白胨和蛋白質(zhì)水解物的成分及其特點(diǎn)有所了解,依據使用的目的和要求加以選用。

    蛋白胨的主要用途是供給細菌需要的氮源。為制備各種培養基最常使用的成分之一。

    蛋白胨之的特點(diǎn)為:(1)易溶于水;(2)不因受高熱而凝固(加熱至130 也不凝固),且可被細菌直接利用以助生長(cháng);( 3 )系兩性電解質(zhì),故有緩沖作用。

    水解動(dòng)物蛋白質(zhì)的酶類(lèi)有動(dòng)物消化腺,如胃蛋白酶和胰蛋白酶等。植物蛋白質(zhì)最常用的為木瓜酶,此外還有分解酵母時(shí)用的自溶酶等。

    胃蛋白酶分解蛋白質(zhì)的結果,能得到含有蛋白分子較大碎片的產(chǎn)物(月示和胨),具有顯著(zhù)的雙縮脲反應,此外還有較少量的低級多肽類(lèi)和游離氨基酸。在這種蛋白胨中生長(cháng)素很少,故不宜單獨用作培養基,必須和肉浸液等混合使用。胰蛋白酶消化的蛋白制品的特點(diǎn)是其成分中有很多游離的氨基酸,特別是色氨酸,低級的多肽類(lèi),含蛋白胨和蛋白月示較少,所以其營(yíng)養價(jià)值比胃蛋白酶所消化蛋白質(zhì)的粗制品要高得多,比肉浸液加蛋白胨也要好得多,因大多數細菌在生長(cháng)時(shí)最易利用游離的氨基酸,其次才是蛋白胨。

    近年來(lái)國外商售蛋白胨品種增加很多,各種牌號也日新月異。
    1.
    胰化酪蛋白胨 Peptone from Casein,trypsin digested(E.Merek)

    本品為胰朊酶消化酪朊所得的蛋白胨。為淡黃色細純如砂的粉末。在105 干燥失重不超過(guò)5%,含磷1-1.5%可凝固性蛋白,也不含有可發(fā)酵性的碳水化合物。由于其色氨酸含量高,故多用于靛基質(zhì)試驗。

    2 .胰化肉蛋白胨 Peptone from meat,trypsin digested( E . Merck )

    本品為胰朊酶消化肉所得的蛋白胨。通常用量為1%。為淡黃-淡棕色粉末,具特殊臭味。105 干燥失重不超過(guò)5%。硫酸化灰分不超過(guò)7%。氯化鈉含量不超過(guò)l%。肌酸酐不少于0.8%,磷不少于0.5-1.0%,總氮量不少于13-15%。不能檢出可凝固蛋白。

    3 .胃化肉蛋白胨 Peptone from meat,Pespindigested( E · Merck )

    本品為胃朊酶消化肉所得的蛋白胨。為黃至淡棕色粉末。105 干燥失重和硫酸化灰分分別不超過(guò)5%8%。氯化鈉含量少于0.5%,磷不多于1%,總氮量不超過(guò)13.5-14.5%。檢查不出可凝固蛋白。

    4 ,胰化明膠蛋白胨Peptone from gelatin,pancreatically digested ( E. Merck )

    本品為胰液消化明膠所得的蛋白胨?捎糜诩毦囵B基和食品添加劑。因其胱氨酸和色氨酸含量低并且沒(méi)有可發(fā)酵的碳水化合物,故很適合制備不良營(yíng)養性培養基之用。為白至黃色粉末。105 干燥失重和硫酸化灰分均不超過(guò)75?偟坎簧儆14.5%。無(wú)可凝固蛋白。

    5 ,植物蛋白胨Peptone from Soybean Meal,Papain-digested ( E . Meack )

    本品為木瓜酶消化脫脂大豆粉所得蛋白胨。由于其營(yíng)養物質(zhì)豐富并含有高濃度碳水化合物和維生素,特別是硫胺素,此外,其巰基含量也高,故對某些營(yíng)養要求嚴格的細菌如奈氏菌群和梭狀芽孢桿菌屬可用為優(yōu)良的培養基礎。并很適于真菌和酵母的培養和在酒廠(chǎng)中乳酸桿菌常規檢驗。因其碳水化合物含量高,故不能用于細菌發(fā)酵試驗。本品為淡黃粉末。105 干燥失重不超過(guò)5%?偟9-10%。無(wú)可凝固性蛋白。

    6 .酪朊胰水解物,無(wú)磺胺對抗物Casein Hydrolysate,pancreatic,free from sulfonamide antagonists( E. Merck )

    本品系用能獲得高含量游離氨基酸的高度無(wú)破壞性酶分裂工藝從酪朊得到的水解物,因其無(wú)磺胺對抗物(PABA ) 故主要用于磺胺敏感試驗培養基。本品為淡黃色細粒粉。105干燥失重不超過(guò)7%。硫酸化灰分不超過(guò)10%。氮含最至少12%。無(wú)易發(fā)酵的碳水化合物,易溶于水。常用量0.3%。

    7 .酪朊酸水解物,無(wú)維生素Casein Hgdrolysat,acid-hydrolysed,Vitamin-Free ( E.Nerck )

    本品為鹽酸消化酪朊所得的水解物。在加工中維生素和其它生民促進(jìn)物均被大量破壞,因此,特用于微生物學(xué)維生素檢驗的培養基制備。通常用量約15g / L ,但用于Mueller-Hinton瓊脂則為17.5g 。本品為淡黃色粉狀、易溶于水。在105干燥失重要多5%,硫酸化灰分不超過(guò)5%,氯化鈉含量約25%,氮不低于7%。

    8 .酪朊酸水解物 Casein Hgdrolysate(E.Meck )

    本品也是鹽酸消化酪朊的水解物,但保留一定程度的維生素和促生長(cháng)物質(zhì),故可較廣泛應用。特別用于白喉桿菌,破傷風(fēng)桿菌和鏈球菌的毒素和鏈菌酶生產(chǎn)的培養。

    9.肝酶化水解物Liver Hgdrolgsate,enzymaticr ( E 、Merckk )

    本品為牛肝經(jīng)酶消化所得的水解物。主要用于毛滴蟲(chóng)屬、布魯氏菌屬、支原體屬,厭氧菌和真菌的培養。培養毛滴蟲(chóng)屬每升培養基加25g、厭氧菌則加5-10g。

     10.胨蛋白胨 Proteose Peptone ( E 、Merck )

    本品為含有大量低分子量肽、游離氨基酸和促生長(cháng)因子的混合蛋白胨。以?xún)?yōu)良營(yíng)養質(zhì)量為特征,適用于毒素生產(chǎn)的培養。因不含有對氨基苯甲酸,也適用于制備敏感試驗培養基。對萘氏菌屬、葡萄球菌、嗜血桿菌屬、沙門(mén)氏菌屬、巴斯德氏菌屬和棒狀桿菌屬均能供給優(yōu)良的營(yíng)養基礎。

    11.胰化多價(jià)蛋白胨 TryptoseE 、Merck )

    本品為含有大量胰化蛋白的混合蛋白胨,適于培養對營(yíng)養要求嚴格的細菌,如布魯氏菌屬、鏈球菌和血瓊脂的制備。

    12.酸化酪蛋白胨 Acidcase Peptone (BBL),Biocase

    本品為鹽酸消化酪朊的水解物。氮含量8%,但缺乏胱氨酸和色氨酸。氯化鈉含量37%,維生素被鹽酸水解大量破壞。適用于B12和其它維生素在藥品和食品中含量的檢測以及毒素生產(chǎn)。

    13.胰化明膠蛋白胨 Gelysate Peptone(BBL)Biogelytone

    本品為胰化明膠的水解物。胱氨酸和色氨酸含量低并缺乏碳水化合物。適用發(fā)酵試驗。

    14 .胰化乳蛋白胨 Lactolysate Peptone ( BBL ) Lactlysate

    本品為胰化乳白蛋白的水解物。適用于乳酸桿菌培養。因其色氨酸含量高,利于細菌色素的產(chǎn)生和靛基質(zhì)試驗。本品特別適用于組織培養。

    15 .胰化心肌蛋白胨Myosate  Peptone ( BBL ) , Biomyotone

    本品為胰化心肌的水解物,比肉浸液或肉蛋白胨可使細菌生長(cháng)較多較早。

    16 .多價(jià)蛋白胨 Polypeptone Peptone(BBL )

     本品為胰化酪蛋白胨和胃化組織蛋白胨(Trypticase and Thiotone)等量的混合蛋白胨。適用一般細菌培養、特別是腸桿菌科。

    17.植物蛋白胨 Phytone Peptone (BBL ) ,Biosoyase

    本品為木瓜酶消化大豆粉所得水解物,維生素含量高、特別是硫氨素,并含有大量植物組織的碳水化合物、為培養各種細菌的優(yōu)良蛋白胨、包括真菌和許多營(yíng)養要求嚴格的細菌,例如梭狀芽孢桿菌屬和奈氏菌屬某些菌種。含有本品的培養基一般可使細菌生長(cháng)較快較多,在血平板上溶血反應較典型。因碳水化合物含境豐富、故不適用于發(fā)酵試驗。

    18.胃化動(dòng)物組織蛋白胨Thiotone Peptone(BBL) , Biothione

    本品為胃朊酶消化動(dòng)物組織所得的蛋白胨。用于血瓊脂檢測溶血反應結果良好,因其含硫量高,故最適用于硫化氫試驗。

    19 .胰化酪蛋白胨 Trypticase Peptone(BBL)Trypcase

    本品為胰化酪朊所得的蛋白胨,質(zhì)量?jì)?yōu)良,最適用于靛基質(zhì)試驗和糖發(fā)酵試驗,因其色氨酸含量高而無(wú)可查出的碳水化合物?蓮V泛用于真菌和需氧及厭氧菌,包括肺炎球菌,乳酸桿菌、棒狀桿菌和梭狀芽孢桿菌以及水和牛奶等的細菌檢驗。還適用于硝酸鹽還原試驗。2%用量有促進(jìn)細菌光滑型生長(cháng)作用,可用于原生動(dòng)物的培養和抑菌或殺菌劑的檢測。還適用于滅菌試驗和抗生素或其它抗菌物質(zhì)的測定。

    20.多月示蛋白胨 Bacto-Protone(Difco)

    本品為各種月示、胨和氨基酸不同配合的蛋白胨。含月示豐富、適用于細菌生理代謝的研究、用于錫克氏試驗白喉毒素稀釋液具有顯著(zhù)穩定作用。

     

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