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    真菌培養基



    錄入時(shí)間:2010-8-18 10:55:31 來(lái)源:青島海博

    一、沙保羅瓊脂培養基

    [用途]

    供真菌及酵母樣真菌的分離培養用

    [配法]

    麥芽糖40g ,蛋白胨10g ,瓊脂20g ,蒸餾水1L。

    將上述成分溶于水,加熱溶解,調pH 6.0 0.2 ,分裝三角瓶或試管中,118 滅菌15min ,傾注平板或置斜面,無(wú)菌試驗后備用

    [用法]

    將標本接種培養基,如系血液標本,則采取1-2ml,與冷卻至45 左右沙保瓊脂混合,傾注接種平板。分別置35 25 恒溫箱內同時(shí)培養。35 培養48h , 25 需連續培養5 天,逐日觀(guān)察結果。發(fā)現真菌及酵母樣可疑菌落,轉種沙保菌斜面,獲得純培養后進(jìn)行鑒定。

    [質(zhì)量控制]

    白色念珠菌和新型隱球菌生長(cháng)良好。

    注:

    (1)    本培養基如不加入瓊脂,即為沙保羅液體培養基,供真菌及念珠菌的增菌培養用。

    (2)    增加氯霉素0.05-0.125mgml或放線(xiàn)菌酮0.5mgml,可抑制細菌和污染的霉菌及隱球菌生長(cháng)。此二種藥均耐熱,可直接加入培養基內高壓滅菌。

    (3)    添加酵母浸膏5mgml,可促進(jìn)皮膚癬菌生長(cháng)。增加維生素B 0.1mgml,可促進(jìn)紫色癬菌和斷發(fā)癬菌生長(cháng)

    (4)    將麥芽糖減少到20g / L ,為沙保羅20g / L 麥芽糖瓊脂培養基,可供誘導真菌產(chǎn)生孢子用

    (5)    該培養基呈酸性,應提高20%的瓊脂用量。

    二、玉米粉瓊脂培養基

    [用途]

    鑒定酵母樣真菌用。白色念珠菌在該培養基上25 24h 培養可長(cháng)出假菌絲,頂端有典型的厚壁孢子,可與其它念珠菌鑒別。

    [配法]

    玉米粉4g ,瓊脂粉8g ,蒸餾水1L( pH6.0 0.2 )。

    將細米粉加水浸泡數分鐘,扎緊瓶口,浸入60 水浴4h ,取出后用沙布過(guò)濾,除去粗渣,補足水分。無(wú)須調整pH 。加入瓊脂,煮沸溶解,有沉淀物再過(guò)濾1 次,分裝試管,121 滅菌15min 備用。

    用玻璃片法點(diǎn)種后,置平皿內,保持一定濕度,置23-26 下培養24-48h 。取出玻片培養物,用高倍鏡觀(guān)察真假菌絲和有無(wú)厚壁孢子。

    [質(zhì)量控制]

    白色念珠菌(ATCC 26790)厚膜孢子陽(yáng)性;新型隱球菌(ATCC 9763)厚膜孢子陰性

    注:

    (1)    玉米粉可用糯米粉或可溶性淀粉代替,效果相同。

    (2)    該培養基加入10 mlL Tween-80 ,制成玉米粉Tween-80 瓊脂,用途相同,效果更好

     

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