抗菌藥物敏感試驗培養基

     WHO推薦改良Kirby-Bauer法抗菌藥物敏感試驗，其技術(shù)簡(jiǎn)單，可重復性好，且特別適合決速生長(cháng)的致病菌。但其不適用于肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌和奈瑟菌的抗菌藥物敏感試驗，這些的細菌須在常規的抗菌藥物敏感試驗培養基內補充特殊的營(yíng)養成分

一、M-H瓊脂培養基

[用途]

Kirby-Bauer法抗菌藥敏試驗指定使用本培養基。M-H瓊脂（Muller-Hinton 瓊脂，水解酪蛋白瓊脂）加5 % 羊血制成血瓊脂平板或制成巧克力瓊脂平板用于檢測肺炎鏈球菌和流感嗜血桿菌。

[配法]

牛肉浸出物1L ，水解酪蛋白17.5g，可溶性淀粉1.5g，瓊脂17g。

將上述各成分混合，靜置10min，待可溶物完全溶解后，121 ℃ 高壓15min 滅菌。冷至50 ℃ 左右，吸取25 ml培養基注入直徑90mm的平皿內，制成厚度為4mm 的瓊脂平板。

[質(zhì)量控制]

用質(zhì)控菌株測定藥物的抑菌環(huán)與NCCLS 的標準參比判斷培養基的質(zhì)量。

常用的標準菌株有：金黃色葡萄球菌ATCC 25923 ；大腸埃希菌ATCC 25922 ；銅綠假單胞菌ATCC 27853；糞腸球菌ATCC 29212 或33186 ；肺炎鏈球菌ATCC 6305 ；流感嗜血桿菌ATCC 10211

[保存]

瓊脂平板應新鮮使用，4 ℃ 冰箱保存，1 周內用完

注：

(1)質(zhì)量控制標準參見(jiàn)NCCLS 紙片法藥敏試驗操作標準

(2)   在M-H瓊脂培養基添加5 ％脫纖維羊血，即可用于肺炎鏈球菌的抗菌藥物敏感試驗

(3)   在M-H瓊脂培養基上，補充輔酶I 15mg／ml，牛血紅蛋白15mg／ml，酵母浸膏5mg／ml，胸腺嘧啶脫氧核苷磷酸化酶0.2U ／ml，可用于流感嗜血桿菌的抗菌藥物敏感試驗

(4)    NCCLS 推薦淋病奈瑟菌用GC 瓊脂平板，添加生長(cháng)補充劑。生長(cháng)補充劑由下列試劑組成：每100ml水中含有1.1mg胱氨酸，0.03g 鳥(niǎo)嘌呤，3mg 硫胺，13mg對-氨基苯甲酸，0.01g維生素B12 ，0.1g羧化輔酶，0.25g輔酶I，1mg 嘌呤腺，10mgL-谷氨酞胺，100g 葡萄糖，0.02硝酸鐵。

二、M-H肉湯培養基

[用途]

用于稀釋法細菌藥物敏感試驗（MIC 和MBC 測定）

[配法]

牛肉浸湯600ml，水解酪蛋白17.5g，可溶性淀粉1.5g，蒸餾水400 ml。

將上述成分混合加熱溶解，校正pH 至7.3 士0.1 , 121 ℃ 滅菌15min 備用。如試驗菌對營(yíng)養要求較高，臨用前按0.5 ％比例加入羊血。

[質(zhì)量控制]

質(zhì)控菌株同M-H瓊脂培養基，凡自配或購置商品培養基均需用質(zhì)控菌株和藥物標準品進(jìn)行測試，結果符合方可使用。

[保存]

置4 ℃ 冰箱2 周內用完

注：

NCCLS 推薦使用含陽(yáng)離子M-H培養基，即在M-H 液體培養基中含有鈣離子10-25mg / L 鎂離子10-25mg/L。

配法如下：氯化鈣3.68g 溶于100ml蒸餾水中，即為含鈣離子l0mg ／ml貯存液。氯化鎂8.369 ，溶于100ml蒸餾水中，即為含鎂離子10mg/L貯存液。

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