革蘭陰性桿菌分離培養基——其它革蘭陰性桿菌用培養基

緩沖活性炭酵母瓊脂培養基（BCYE )

[用途]

用于嗜肺軍團菌的分離培養

[配法]

酵母浸液10g ，活性（NoritSG ) 2g , L-半胱氨酸鹽酸鹽0.4g ，可溶性焦磷酸鐵鹽0.25g，瓊脂17g , N-2- 乙酰氨基-乙氨基乙醇磺酸（ACES ) 10g，蒸餾水80ml。

上述成分除半膚氨酸及焦磷酸鐵外，其余成分混合加熱溶解，經(jīng)121 ℃ 15min滅菌，放水浴中冷卻到50 ℃ 。另外分別配新鮮L- 半胱氨酸溶液（10ml蒸餾水中含0.4g）及焦磷酸鐵溶液（10ml含0.25g ) ，分別過(guò)濾除菌，再加入已滅菌瓊脂中，加入1mol／L 氫氧化鉀溶液4-5ml使培養基的最終pH 為6.9 -7.0 ，可用1mol／L 鹽酸溶液校正，傾注平板，冷卻后置4 ℃ 冰箱備用，亦可制成斜面，用于保存菌種。該培養基為黑色。

[用法]

液體標本可直接接種培養基，肺、肝、脾等固體標本須制成100g / L 懸液后再接種培養基，接種后的培養基置35 ℃ 需氧環(huán)境培養，培養箱需保持一定的濕度。每天用解剖鏡檢查平板培養物，用略大于10⁰ 角的斜射光源照明。在BCYE 平板上，培養4-5 天，菌落直徑約1-2mm，并出現亮藍和切削玻璃樣的構造；繼續培養后菌落增大呈黃綠色，較光滑。

[保存]

在室溫、暗室中可保存1 周

2 彎曲菌選擇性培養基

( l ) Skirrow 's 培養基

［用途］

用于空彎及幽門(mén)螺桿菌分離培養

[配法]

蛋白胨5g，胰蛋白胨5g，酵母膏5g，氯化鈉5g，瓊脂粉12g ，萬(wàn)古霉素10ml ，多粘菌素B 2500U , TMP5mg脫纖維羊血70ml ，蒸餾水930mL

除血和抗生素外，其余成分混合于水中，加熱溶解，調pH 至7.2 , 121 ℃ 滅菌15min 待冷至50℃ 時(shí)加入羊血7ml和多抗液0.5ml，搖勻，傾注無(wú)菌平板。

[用法]

將標本接種平板，置25 ℃ 或43 ℃ 微需氧環(huán)境中培養48h ，菌落直徑達1-2mm ，為不溶血的菌落

[質(zhì)量控制]

大腸埃希菌ATCC 25922和糞腸球菌ATCC 33186 不生長(cháng)；空腸彎曲菌胎兒亞種ATCC 29424 生長(cháng)良好。

注：

l ）多抗液的配制：① 乳酸62mg （約2 滴）加入100ml 滅菌水中，然后加入TMP100mg ，混合加熱100 ℃ 滅菌。② �、� 液5ml ，再加萬(wàn)古霉素100mg 和多粘菌素B 0.38mg ，搖勻后即可

2 ）彎曲菌屬系微需氧菌，培養時(shí)可提供5 ％氧氣及10 ％二氧化碳。高濃度氧不利于細菌生長(cháng)，尤其是幽門(mén)螺桿菌。因此標本采集后，應盡決接種培養，或置運送培養基中運送

3 ）彎曲菌運送可用布氏菌湯培養基

( 2 ) Campy -BAP 培養基

[用途]

用于分離培養彎曲菌。

[配法]

蛋白胨10g ，胰胨10g ，葡萄糖10g ，酵母浸膏3g ，氯化鈉5g，重亞硫酸鈉0.1g ，蒸餾水900ml ，脫纖維羊血100ml ，萬(wàn)古霉素10mg ，多粘菌素B 2500U, TMP 5mg ，兩性霉素B 2mg

將上述成分（除羊血和抗菌補充劑外），加入900ml 蒸餾水，加熱溶解，調pH 至7.2 后分裝，121 ℃ 滅菌15min ，加入羊血和抗菌藥物添加劑，充分混勻后傾注于無(wú)菌平皿內。

[用法]

取標本接種于平板，置25 ℃ 或43 ℃ 微需氧環(huán)境中培養48h ，菌落直徑達1-2 mm ，不溶血

[質(zhì)量控制]

大腸埃希菌ATCC 25922 不生長(cháng)；糞腸球菌ATCC 33186 不生長(cháng)；空腸彎曲菌胎兒亞種ATCC 29424 生長(cháng)良好

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