一般大腸桿菌擁有4288條基因,每條基因的長(cháng)度約為950bp,基因間的平均間隔為118bp(基因Ⅷ)。E.coli基因組中還包含有許多插入序列,如λ-噬菌體片段和一些其他特殊組份的片段,這些插入的片段都是由基因的水平轉移和基因重組而形成的,由此表明了基因組具有它的可塑造性。
利用大腸桿菌基因組的這種特性對其進(jìn)行改造,使其中的某些基因發(fā)生突變或缺失,從而給大腸桿菌帶來(lái)可以觀(guān)察到的變化,這種能觀(guān)察到的特征叫做大腸桿菌的表現型 (Phenotype),把引起這種變化的基因構成叫做大腸桿菌的基因型(Genotype)。具有不同基因型的菌株表現出不同的特性。
分子克隆中常用的大腸桿菌及其遺傳標記按Demerec等1966年提出的命名原則,采用的菌株所有的基因都假定處于野生型狀態(tài),除非在基因型上另外注明。
大腸桿菌基因型的表示方法(Demerec, et, al. 1966):
一、一般規則:
1、根據基因產(chǎn)物或其作用產(chǎn)物的英文名稱(chēng)的第一個(gè)字母縮寫(xiě)成 3個(gè)小寫(xiě)斜體字母來(lái)表示。例如:DNA Adenine Methylase→dam。
2、不同的基因座,其中任何一個(gè)突變所產(chǎn)生的表型變化可能相同,其表示方法是在 3個(gè)小寫(xiě)斜體字母后加上一個(gè)斜體大寫(xiě)字母來(lái)表示區別。例如:Recombination→recA、recB、recC。
3、突變位點(diǎn)應通過(guò)在突變基因符號后加不同數字表示。如 supE44(sup基因座E的44位突變)。如果不知道幾個(gè)等位基因中哪一 /幾個(gè)發(fā)生了功能性突變,則用連字符“ -”代替大寫(xiě)字母,如 trp-31。
4、細菌的基因型中應該包含關(guān)于其攜帶的質(zhì);蚋郊芋w的的信息。這些符號包括菌株攜帶的質(zhì);蚋郊芋w、質(zhì);蚋郊芋w上的突變基因座和突變位點(diǎn)。其基因符號應與基因座的表示符號明顯區別,符號的第一個(gè)字母大寫(xiě)、不斜體并位于括號內;質(zhì);蚋郊芋w上的突變基因座和突變位點(diǎn)的基因符號的表示方法與染色體上突變基因座、突變位點(diǎn)的符號相同。
5、對于攜帶附加體的菌株的完整基因型描述應包括附加體的狀態(tài)(游離或整合)。以 F因子為例,F-:F因子缺失; F+:自主性 F因子,不攜帶任何遺傳可識別染色體片段; F':攜帶有遺傳可識別細菌染色體片段的自主性 F因子;Hfr:整合到染色體上的 F因子( high frequency of recombination)。當這些質(zhì);蚴删w片段變異或缺失時(shí),用()“或 ”/“等以區別。例如:/F' [traD36、proAB、lac I q、lacZ. M15]
6、某個(gè)基因或某個(gè)領(lǐng)域缺失時(shí),在其基因型前面加上“ ”表示。例如: lac-proAB基因缺失時(shí)它的基因型表示為 (lac-proAB)。
7、由于某種基因的變異導致大腸桿菌可以明顯觀(guān)察到特征變化,有時(shí)也用其表現型代替基因型進(jìn)行表示。例如:某些抗藥性的獲得或喪失,用如下方式表示: Streptomycin抗性→Str +或 Str r,Ampicillin敏感性→ Amp-。(第一個(gè)字母要大寫(xiě) ,“+”或“r”表示有抗性 ,“-”表示無(wú)抗性或敏感)。
8、根據某些特異性蛋白的變異及其導致的結果變化進(jìn)行表示。例如:TH2菌株上有一種基因型表示如下:hsdS20 (rB-、mB-),其中 S20代表特異性識別蛋白發(fā)生變異,()中的 rB-、mB-表示由于 S20的變異而導致 B株來(lái)源的 hsdR和 hsdM的功能缺失。
9、蛋白質(zhì)的名稱(chēng)與對應的基因或等位基因相同,但不用斜體,且首字母大寫(xiě),如, UvrA、 UvrB。
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