干粉培養基的質(zhì)量控制
商品干粉培養基配制后，必須經(jīng)過(guò)嚴格的理化及細菌學(xué)檢定。檢定合格后方可出售。干粉培養基的質(zhì)量控制應包括①培養基的顏色、性狀（包括高壓前后）；②pH值；⑧液體澄明度。固體凝膠強度；4干燥失重；⑤微生物檢定；⑥有效期。對于培養基微生物檢定，要用美國標準菌株( ATCC)或中國醫學(xué)微生物菌種保藏中心(CMCC)的標準菌株，要符合培養基分離、選擇鑒別的陽(yáng)性、陰性特征。無(wú)菌試驗培養基、增菌、基礎營(yíng)養培養基等要做靈敏度試驗。
靈敏度試驗：方法見(jiàn)《中華人民共和國藥典》 2005版三部無(wú)菌檢查法中培養基靈敏度檢查。
質(zhì)控標準菌株：質(zhì)控標準菌株應按醫用細菌菌種復蘇方法啟開(kāi)，接種在相應的培養基中。例如腸桿菌通常使用營(yíng)養瓊脂培養基，鏈球菌培養在巧克力瓊脂或血瓊脂培養基上，厭養菌需培養在皰肉培養基中或在厭氧環(huán)境中培養，真菌需在真菌培養基中。啟開(kāi)后的菌株應具有菌株的典型特征：色素的產(chǎn)生、溶血、菌落形態(tài)、菌苔的黏稠性。如肺炎克雷伯菌、短芽胞桿菌，菌苔黏稠，用接種環(huán)可拉出絲。如果菌株失去原有的特性，則視為菌株變異。啟開(kāi)菌株應使用牛肉浸液制備的新鮮培養基，可保持菌株原有的特性。
從保藏中心得到的菌株為零代，菌株啟開(kāi)后應分二份，一份供保存菌種用，一份供傳代用為工作種子批。工作種子批使用不超過(guò)5代。保存的菌種通常接種于半固體培養基，生長(cháng)后用石蠟密封，4℃保存。
工作種子批接種適宜的培養基，35℃培養24-48小時(shí)，用接種環(huán)刮入無(wú)菌生理鹽水中，制成菌懸液，將菌液稀釋?zhuān)c標準比濁管相同濃度，再用生理鹽水做10倍系列稀釋。
關(guān)于醫用細菌菌種復蘇方法的說(shuō)明：
1．復蘇菌種前應準備適于該菌種生長(cháng)的固體、液體培養基和培養環(huán)境，所有操作均應在符合生物安全保護及無(wú)菌條件下進(jìn)行。
2．啟開(kāi)菌種宜采用鋸開(kāi)法（鋸開(kāi)前用70%酒精棉消毒菌種管外壁）。用吸管將液體培養基0.3 ml注入被啟開(kāi)的菌種安瓶中并吹打，使安瓶中的凍干菌種溶解成菌懸液。
3．將上述菌懸液全部吸出，分別接種到固體斜面和液體培養管中，一般放置在37℃培養箱培養18-24小時(shí)。對需要特殊培養條件的細菌，如需5%-10% CO2或厭氧條件等，應分別于C02培養箱或厭氧培養箱中培養。
4．次日觀(guān)察菌種的生長(cháng)情況，如菌種未生長(cháng)，應繼續培養至72小時(shí)。
5．復蘇后的菌種在傳1～2代后使用。
通常干粉培養基的檢定接種液體培養基最適宜菌量為10-100個(gè)菌/ml，固體為100-1000個(gè)菌／ml，在平皿上應有100-1000個(gè)菌落生長(cháng)，即菌落形成單位-CFU(Colour Form Unit)。
平皿試驗：
取質(zhì)控菌株24小時(shí)營(yíng)養瓊脂斜面新鮮培養物分別制成菌懸液，將菌液稀釋與標準比濁管相同濃度，以生理鹽水逐管10倍系列稀釋至規定濃度，每株菌接種2-3塊平皿，每平皿接種0.1ml，用接種環(huán)或L-玻璃棒劃線(xiàn)，置37℃培養24小時(shí)觀(guān)察結果。
細菌生化試驗：
將質(zhì)控菌株24小時(shí)營(yíng)養瓊脂新鮮培養物直接接種生化培養基內，置37℃培養24小時(shí)，觀(guān)察結果。
以下是培養基常用檢定菌的細菌比濁標準
空腸彎曲菌 25×108/ml
破傷風(fēng)梭菌 l×l08／ml
厭氧棒桿菌 4×l08／ml
肺炎雙球菌 3×l08／ml
大腸埃希菌 8×l08／ml
流感嗜血桿菌 23×l08/ml
腦膜炎雙球桿菌 8×l08／ml
銅綠假單胞菌 10×l08／ml
甲型副傷寒沙門(mén)菌 10×108/ml
乙型副傷寒沙門(mén)菌 10 ×108/ml
傷寒沙門(mén)菌 10×108／ml
痢疾志賀菌 8×108／ml
福氏志賀菌 8×l08／ml
宋內志賀菌 8×108/ml
甲型溶血性鏈球菌 2×108/ml
霍亂弧菌 18×108/ml
OI群霍亂弧菌El - Tor生物學(xué)變種18×l08／ml
小腸結腸炎耶爾森菌 11×108／ml
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