天然細胞培養基(二)

血清培養基主要問(wèn)題

1.血清的成份可能有幾百種之多，目前對其準確的成份、含量及其作用機制仍不清楚，尤其是對其中一些多肽類(lèi)生長(cháng)因子、激素和脂類(lèi)等尚未充分認識，這給研究工作帶來(lái)許多困難。

2.血清都是批量生產(chǎn)，各批量之間差異很大，而且血清保存期至多一年，因此，要保證每批血清的相似性極為困難，從而使實(shí)驗的標準化和連續性受到限制。

3.對大多數細胞，在體內狀態(tài)，血清不是它們接觸的生理學(xué)液體，只是在損傷愈合以及血液凝固過(guò)程中才接觸血清，因此使用血清有可能改變某種細胞在體內的正常狀態(tài)，血清可能促進(jìn)某些細胞的生長(cháng)（成纖維細胞）同時(shí)抑制另一類(lèi)細胞生長(cháng)（表皮細胞）。

4.血清含一些對細胞產(chǎn)生毒性的物質(zhì)，如多胺氧化酶，能與來(lái)自高度繁殖細胞的多胺反應（如精胺、亞精胺）形成有細胞毒性作用的聚精胺。補體、抗體、細菌毒素等都會(huì )影響細胞生長(cháng)，甚至造成細胞死亡。     5.動(dòng)物個(gè)體不同，血清產(chǎn)地、批號不同，每批質(zhì)量差異甚大，其成分不能保持一致。

6.取材中可能帶入支原體、病毒，對細胞產(chǎn)生潛在影響，可能導致實(shí)驗失敗或實(shí)驗結果不可靠性。

7.大規模生產(chǎn)中，血清來(lái)源越來(lái)越困難，價(jià)格昂貴，是構成動(dòng)物細胞培養對生產(chǎn)成本的主要部分之一。

 血清的質(zhì)量標準

血清質(zhì)量高低取決于兩方面因素：一是取材對象，二是取材過(guò)程。用于取材的動(dòng)物應健康無(wú)病并且在指定的出生天數之內，取材過(guò)程應嚴格按照操作規程執行，制備出的血清要經(jīng)過(guò)嚴格的質(zhì)量鑒定。WHO公布的《用動(dòng)物細胞體外培養生產(chǎn)生物制品規程》中的要求：

1.牛血清必須來(lái)自有文件證明無(wú)牛海綿狀腦病的牛群或國家。并應具備適當的監測系統。

2.有些國家還要求牛血清來(lái)自未用過(guò)反芻動(dòng)物蛋白飼料的牛群。

3.證明所用牛血清中不含對所生產(chǎn)疫苗病毒的抑制物。

4.血清要通過(guò)濾膜過(guò)濾除菌，保證無(wú)菌。

5.無(wú)細菌、霉菌、支原體和病毒的污染，有些國家要求無(wú)細菌噬菌體污染。

6.對細胞有良好的支持繁殖作用。

我國在對牛血清的質(zhì)量2000年版《中國生物制品主要原輔料質(zhì)控標準》中提出比較嚴格的標準要求。包括蛋白質(zhì)含量，細菌、真菌、支原體、牛病毒、大腸桿菌噬菌體、細菌內毒素，支持細胞增殖檢查。