天然細胞培養基(一)

天然培養基是指來(lái)自動(dòng)物體液或利用組織分離提取的一類(lèi)培養基，如血漿、血清、淋巴液、雞胚浸出液等。組織培養技術(shù)建立早期，體外培養細胞都是利用天然培養基。但是由于天然培養基制作過(guò)程復雜、批間差異大，因此逐漸為合成培養基所替代。目前廣泛使用的天然培養基是血清，另外各種組織提取液、促進(jìn)細胞貼壁的膠原類(lèi)物質(zhì)在培養某些特殊細胞也是必不可少。

目前用于組織培養的血清主要是牛血清，培養某些特殊細胞也用人血清、馬血清等。選擇用牛血清培養細胞的原因：來(lái)源充足、制備技術(shù)成熟、經(jīng)過(guò)長(cháng)時(shí)間的應用考驗人們對其有比較深入的理解。牛血清對絕大多數哺乳動(dòng)物細胞都是適合的，但并不排除在培養某種細胞時(shí)使用其他動(dòng)物血清更合適。

牛血清是細胞培養中用量最大的天然培養基，含有豐富的細胞生長(cháng)必須的營(yíng)養成份，具有極為重要的功能。牛血清分為小牛血清、新牛血清、胎牛血清。胎牛血清應取自剖腹產(chǎn)的胎牛；新牛血清取自出生24小時(shí)之內的新生牛；小牛血清取自出生10－30天的小牛。顯然，胎牛血清是品質(zhì)最高的，因為胎牛還未接觸外界，血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分最少。

血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物，其組成成份雖大部分已知，但還有一部分尚不清楚，且血清組成及含量常隨供血動(dòng)物的性別、年齡、生理條件和營(yíng)養條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(cháng)因子、激素、無(wú)機物等，這些物質(zhì)對促進(jìn)細胞生長(cháng)或抑制生長(cháng)活性是達到生理平衡的。

1.提供基本營(yíng)養物質(zhì)：氨基酸、維生素、無(wú)機物、脂類(lèi)物質(zhì)、核酸衍生物等，是細胞生長(cháng)必須的物質(zhì)。

2.提供激素和各種生長(cháng)因子：胰島素、腎上腺皮質(zhì)激素（氫化可的松、地塞米松）、類(lèi)固醇激素（雌二醇、睪酮、孕酮）等。生長(cháng)因子如成纖維細胞生長(cháng)因子、表皮生長(cháng)因子、血小板生長(cháng)因子等。

3.提供結合蛋白：結合蛋白作用是攜帶重要地低分子量物質(zhì)，如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及激素等，轉鐵蛋白攜帶鐵。結合蛋白在細胞代謝過(guò)程中起重要作用。

4.提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷。

5.對培養中的細胞起到某些保護作用：有一些細胞，如內皮細胞、骨髓樣細胞可以釋放蛋白酶，血清中含有抗蛋白酶成分，起到中和作用。這種作用是偶然發(fā)現的，現在則有目的的使用血清來(lái)終止胰蛋白酶的消化作用。因為胰蛋白酶已經(jīng)被廣泛用于貼壁細胞的消化傳代。血清蛋白形成了血清的粘度，可以保護細胞免受機械損傷，特別是在懸浮培養攪拌時(shí)，粘度起到重要作用。血清還含有一些微量元素和離子，他們在代謝解毒中起重要作用，如SeO3,硒等。