農藥殘留——環(huán)酰菌胺檢測方法

1．分析目標化合物
    環(huán)酰菌胺
2．儀器設備
    帶紫外分光光度檢測器的高效液相色譜儀和液相色譜--質(zhì)譜儀。
3．試劑

     10％磷酸溶液

     乙酸乙酯

      丙酮

     無(wú)水硫酸鈉

     正己烷

     乙腈

     10％氯化鈉溶液
4．標準品
    環(huán)酰菌胺：含環(huán)酰菌胺98％以上，熔點(diǎn)為153℃。
5．試驗溶液的制備
a 提取方法
① 種子
    將樣品粉碎，過(guò)420μm標準網(wǎng)篩后，稱(chēng)取其10.0g，加入20mL 10％磷酸溶液，放置2小時(shí)。
    加入100mL丙酮，攪拌3分鐘后，用涂布1cm厚硅藻土濾紙抽濾到磨口減壓濃縮器中。取出濾紙上的殘留物，加入50mL丙酮，攪拌3分鐘后，按上述同樣操作，合并濾液于減壓濃縮器中，40℃以下濃縮至約30mL。
    將其轉移到預先加有100mL 5％氯化鈉溶液的300mL分液漏斗中。用100mL乙酸乙酯洗滌上述減壓濃縮器的茄型瓶，合并洗液于上述分液漏斗中。用振蕩器激烈振蕩5分鐘后，靜置，乙酸乙酯層移入300mL三角瓶中。水層中加入50mL乙酸乙酯，按上述同樣操作，合并乙酸乙酯層于上述三角瓶中。加入適量無(wú)水硫酸鈉，不時(shí)振蕩、混合，放置15分鐘后，濾入磨口減壓濃縮瓶中。再用20mL乙酸乙酯洗滌三角瓶，以此洗液洗滌濾紙上的殘留物，重復操作兩次。合并兩洗液于減壓濃縮瓶中。40℃以下除去乙酸乙酯。
    殘留物中加入30mL正己烷，轉移到100mL分液漏斗中。加入30mL正己烷飽和乙腈，用振蕩器激烈振蕩5分鐘后，靜置，乙腈層移入磨口減壓濃縮器中。正己烷層中再加入30mL正己烷飽和乙腈，按上述同樣操作，重復操作2次，合并乙腈層于減壓濃縮器中。40℃以下除去乙腈。殘留物中加入乙酸乙酯：正己烷(3：17)混合溶液溶解，準確至1mL。
② 水果和蔬菜
    準確稱(chēng)取約1kg樣品，必要時(shí)定量加入適量水，攪碎混合均勻后，稱(chēng)取相當于20.0g樣品的量。
    加入30mL10％磷酸溶液和100mL丙酮，攪拌3分鐘后，用涂布1cm厚硅藻土濾紙抽濾到磨口減壓濃縮器中。取出濾紙上的殘留物，加入50mL丙酮，攪拌3分鐘后，按上述同樣操作，合并濾液于減壓濃縮器中，40℃以下濃縮至約30mL。
    將其轉移到預先加有100mL10％氯化鈉溶液的300mL分液漏斗中。用100mL乙酸乙酯洗滌上述減壓濃縮器的茄型瓶，合并洗液于上述分液漏斗中。用振蕩器激烈振蕩5分鐘后，靜置，乙酸乙酯層移入300mL三角瓶中。水層中加入50mL乙酸乙酯，按上述同樣操作，合并乙酸乙酯層與上述三角瓶中。加入適量無(wú)水硫酸鈉，不時(shí)振蕩、混合，放置15分鐘后，濾于磨口減壓濃縮瓶中。再用20mL乙酸乙酯洗滌三角瓶，以此洗液洗滌濾紙上的殘留物，重復操作兩次。合并兩洗液于減壓濃縮瓶中。40℃以下除去乙酸乙酯。殘留物中加入乙酸乙酯：正己烷(3：17)混合溶液溶解，準確至2mL。
b 凈化方法
   丙烯酰胺共聚物結合丙三基甲硅烷基化硅膠小柱(360mg)中注入10mL丙酮，棄去流出液。再注入10mL正己烷，棄去流出液。柱中注入0.5mL a 提取方法所得的溶液后，注入10mL乙酸乙酯：正己烷(3：17)混合溶液，棄去流出液。再注入10mL丙酮：正己烷(1：1)混合溶液，收集流出液于磨口減壓濃縮器中，40℃以下除去丙酮與正己烷。殘留物中加入乙腈溶解，準確至0.5mL，此為試驗溶液。
6．測定方法
a 定性試驗
    按下列操作條件進(jìn)行試驗。試驗結果應與標準品的一致。
    操作條件
    柱填充劑：十八烷基甲硅烷基化硅膠（粒徑5μm）。
    柱：內徑4.6mm，長(cháng)150～250mm的不銹鋼管。
    柱溫：50℃。
    檢測器：波長(cháng)289nm。
    流動(dòng)相：乙腈：0.4％磷酸二氫鈉溶液(1：1)的混合溶液。調整流速使環(huán)酰菌胺約12分鐘流出。
b 定量試驗
    根據與a 定性試驗相同操作條件所得的試驗結果，峰高法或峰面積法進(jìn)行定量。
c 確證試驗
    按照a 定性試驗相同的操作條件，用液相色譜--質(zhì)譜儀測定。試驗結果應與標準品的一致。另外，必要時(shí)用峰高法或峰面積法進(jìn)行定量。
7．定量限
    0.01mg/kg。
8．注意事項
    必須在小于pH3 的條件下進(jìn)行提取。另外，進(jìn)行確證試驗時(shí)，可以采用氣相色譜--質(zhì)譜法。