細菌藥敏試驗方法

目前常用的藥敏試驗方法如下：

1、定性測定的紙片擴散法(disk diffusion test)，K-B法： WHO推薦的全球統一的標準方法。

原理：含有定量抗菌貨物的紙睡帖在已接種測試菌的瓊脂平板上，紙片中所含的藥物吸取瓊脂中的水分溶解后便不斷地向紙片周?chē)鷧^域擴散，形成遞減的梯度濃度。在紙片周?chē)�抑菌濃度范圍內的細菌的生長(cháng)被抑制，形成透明的抑菌圈。抑菌圈的大小反映測試菌對測定藥物的敏感程度，并與該藥對測試菌的MIC呈負相關(guān)。

質(zhì)控：標準菌株的抑菌圈直徑應落在預期范圍內，如果超出該范圍，應視為失控而予以糾正。

影響因素：培養基的質(zhì)量、藥敏紙片的質(zhì)量、接種菌量、試驗操作質(zhì)量、孵育條件、抑菌圈測量工具的精度和質(zhì)控菌株本身的藥敏特性等均能影響試驗結果的準確性。

2、定量測定的稀釋法(dilution test)，主要測定細菌對某藥的最低抑菌濃度，包括肉湯稀釋法和瓊脂稀釋法。

瓊脂稀釋法：原理：將不同劑量的抗菌藥物加入融化并冷至50℃左右的定量MH瓊脂中，制成含有不同遞減濃度藥物的平板。接種待沒(méi)測菌（可在一個(gè)平板上做多株測定），35℃孵育16－24h，無(wú)細菌生長(cháng)的最低藥物濃度為測試菌的MIC。

本試驗特點(diǎn)是可同時(shí)做多株菌株的MIC測定，結果的重復性?xún)?yōu)于肉湯稀釋法，且易于發(fā)現污染或耐藥突變菌，是新藥證時(shí)常用的外藥敏試驗經(jīng)典參照標準。

3、E法(E test)，結合了擴散法和稀釋法各自的優(yōu)點(diǎn)。

是結合了擴散法和稀釋法各自的優(yōu)點(diǎn)，操作簡(jiǎn)便同擴散法，又可以象稀釋法一樣直接定量測出抗菌藥物對測試菌的最低MIC，結果準確，重復性好，但是價(jià)格昂貴。