細菌培養技術(shù)（二）

一、常用培養基的制備
  （一）普通肉湯培養基
    【材料】
 1. 新鮮牛肉或牛肉膏，蛋白胨，氯化鈉，瓊脂，蒸餾水。
 2. 酚紅指標劑，比色架及標準比色管或精密pH試紙。
 3. 漏斗，量筒，三角燒瓶，試管等。
  【方法】
 1. 稱(chēng)取去脂去腱絞碎的鮮牛肉500克，浸于1000毫升蒸餾水中，冰箱過(guò)夜，次日煮沸30分鐘，紗布過(guò)濾，蒸餾水補足其量，（也可用牛肉膏3克加蒸餾水1000毫升加熱溶化），即為肉浸液。
 2. 取肉浸液1000毫，氯化鈉5克，蛋白胨10克混合加熱溶化。
 3. 調整PH為7.6，用濾紙過(guò)濾分裝于中試管或三角燒瓶?jì)�，塞緊棉塞。
  【用途】
 供基礎培養基用，營(yíng)養比肉膏湯好，一般營(yíng)養要求不高的菌均可生長(cháng)。
  （二）普通瓊脂培養基
  瓊脂是石花菜等海藻類(lèi)提取的膠體物質(zhì)，其化學(xué)成份主要是多糖。當溫度達到98℃以上可溶解于水，45℃以下則凝固。瓊脂對細菌一般無(wú)營(yíng)養作用（除自然界中極少數菌可利用瓊脂之外），純屬賦形劑。便于人們制做斜面、平板、高層等不同類(lèi)型的固體培養基。
  【材料與方法】
  普通肉湯培養基100毫升，加入瓊脂2~3克，加熱溶化，用蒸餾水補足失去水分，調整PH為7.6后分裝中試管、平皿等器皿，高壓蒸氣15磅滅菌20分鐘，可制成普通瓊脂斜面和普通瓊脂平板。
  【用途】
  供一般細菌培養用，并可作無(wú)糖基培養基。
（三）半固體培養基
  【材料與方法】
取普通肉湯培養基100毫升，加入瓊脂0.5~0.7克，加熱溶化。調整PH為7.6，分裝于小試管內，每管1~5毫升，高壓蒸氣磅滅菌20分鐘，待冷后放入4℃冰箱備用。
  【用途】
保存一般菌種用，并可觀(guān)察細菌的動(dòng)力及生化反應。
（四）血液瓊脂培養基
  【材料與方法】
將高壓滅菌后普通瓊脂培養基。冷至45℃~50℃時(shí)以無(wú)菌手續操作加入5%~10%血液（人或動(dòng)物脫纖維無(wú)菌血液）�？芍瞥裳�平板和血斜面。 
  【用途】
供營(yíng)養要求較高的細菌分離培養用，亦可觀(guān)察細菌的溶血特征。