3M環(huán)境李斯特菌測試片操作

1.     將未開(kāi)封的測試片貯藏在<= 8 ^oC (46 ^oF)的環(huán)境下，并在包裝上標示的有效期內使用。在高濕度的地方，最好在使用前將測試片回復到室溫。

2.       已開(kāi)封的測試片，將開(kāi)口反折，用膠帶封好。

3.       為防止暴露于潮濕的環(huán)境中，請不要冷藏已開(kāi)封的測試片。將膠帶封好的測試片貯藏在低溫干燥的地方，保持時(shí)間不超過(guò)1個(gè)月。請勿將測試片放在溫度> 25 ^oC (77 ^oF)和(或)相對濕度> 50%的環(huán)境中。

4.       用涂抹棒、海棉或其它采樣設備收集環(huán)境樣本。濕潤采樣設備的液體應<= 10 mL。濕潤劑可以是無(wú)菌水、緩沖蛋白胨水(Buffered Peptone Water, BPW)，或中和緩沖液，如Letheen肉湯或Dey/Engley (DE)中和肉湯。

5.       在無(wú)菌環(huán)境下在收集的樣品中添加5 mL，20-30^oC，滅過(guò)菌的緩沖蛋白胨水(BPW)溶液。 不要將Petrifilm EL測試片與Vermont 培養基(UVM)、Fraser肉湯、李斯特菌增菌培養基 (LEB)或緩沖李斯特菌增菌培養基(BLEB)共用。

6.       混合，蠕動(dòng)或旋轉樣品與BPW的混合液將近一分鐘。將樣品置于室溫(20-30 ^oC) 1h，最久不超過(guò)1.5 h，以修復損傷的李斯特菌。

7.       將測試片置于平坦表面處，揭開(kāi)上層膜。

8.       用3M^TM電子移液槍或其它移液器垂直滴加3 mL樣品到下層膜的中央。

9.       將上層膜緩慢蓋下，以免產(chǎn)生氣泡。

10.   輕輕地將塑料壓板放在位于接種區上層膜上。不要壓，扭轉或滑動(dòng)壓板。提起壓板。等至少10分鐘，以使膠體凝固。

11.   將測試片透明面朝上，可疊放至10片，在35^oC ± 1^oC或37^oC ± 1^oC下培養28h ± 2 h。

12.   Petrifilm EL測試片能夠用標準的菌落計數器或其它光學(xué)放大器計數或判讀。不要計數圓形輪廓上的菌落，因為它們不受選擇性培養基的作用。

13.   1對于定性檢測，根據紫紅色菌落的存在與否，將結果計為檢出和未檢出。
如果是/否的結果已經(jīng)能夠滿(mǎn)足報告要求，那么你可以選擇定性檢測。

14.   對于半定量檢測，根據出現紫紅色菌落的相對量來(lái)記錄結果。 如果你是根據菌落數的相對含量來(lái)采取相應的措施，并且沒(méi)必要記錄實(shí)際菌落數，那么你可以選擇半定量檢測。李斯特菌的含量應記錄為對采樣區域和企業(yè)標準有指導意義的形式(如低，中，高，或可接受和不可接受)

15.   對于定量檢測，計數所有紫紅色菌落。 如果你根據菌落數來(lái)采取相應的措施，你可以采用定量檢測。測試片上李斯特菌數：16
請參考判讀手冊的“定量采樣與判讀”部分來(lái)計算每個(gè)環(huán)境樣本中的李斯特菌數。

16.   可挑區菌落進(jìn)行進(jìn)一步鑒定。掀起上層膜，從膠上挑取菌落。