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    細小病毒屬(Parvovirus)



    錄入時(shí)間:2009-8-18 10:22:10 來(lái)源:青島海博

      本屬病毒無(wú)需輔助病毒即能自行復制,但在DNA復制時(shí),需要正處于有絲分裂過(guò)程中的宿主細胞(包括體外培養細胞)某些機能的輔助。病毒粒子含有單股DNA和2~3種結構多肽。本屬病毒的血凝作用較強,絕大多數成員能凝集豚鼠紅細胞。水貂腸炎病毒雖是本屬病毒中發(fā)現最早的一種病毒,但揭示本屬病毒的共同特性,還是從1959年Kilham等對鼠類(lèi)細小病毒的系統研究開(kāi)始的。大鼠細小病毒(RV)是本屬病毒的代表種。自鼠類(lèi)細小病毒發(fā)現以后,六十至七十年代相繼從多種動(dòng)物(包括人類(lèi))和生物材料(如傳代細胞系和用于組織培養的材料)中發(fā)現了這類(lèi)病毒。
    細小病毒屬以小鼠細小病毒(MMV)為代表種(以前為KRV),其主要成員包括阿留申病毒(ADV)、牛細小病毒(BPV)、貓泛白細胞減少癥病毒(FPV)、貂腸炎病毒(MEV)、犬細小病毒(CPV)、鵝細小病毒(GPV)、H1病毒、兔細小病毒(LPV)、LuⅢ、大鼠Kilham病毒(KRV)、豬細小病毒(PPV)、RT和TVX病毒等。目前該屬共有18種病毒,類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節炎病毒(rheumatoidarthritisvirus)也可能是其成員。據預測其成員仍將不斷增多。但到目前為止,只發(fā)現其中少數病毒能致發(fā)明顯臨床癥狀的傳染病,而大多數呈潛伏或持續感染狀態(tài)。很多動(dòng)物和人的血清中含有很高水平的病毒抗體,但病毒的致病性不清。為此,調查研究這些病毒的致病性是醫學(xué)和獸醫病毒學(xué)者以及臨床醫生的一項重要任務(wù)。如豬細小病毒(PPV)開(kāi)始是從豬瘟病毒培養物中發(fā)現的,當時(shí)對其致病性一無(wú)所知,但通過(guò)后來(lái)多方面的實(shí)驗研究,已經(jīng)證實(shí)它是母豬不孕癥和引起懷孕母豬流產(chǎn)、死產(chǎn)的主要病原之一。
    1.形態(tài)特點(diǎn)和理化學(xué)性質(zhì)  病毒粒子為等軸對稱(chēng)的二十面體,無(wú)囊膜。分子量約55×106~6×106。據對部分病毒的分析,DNA約占整個(gè)病毒粒子重量的25%~34%,DNA分子量為14×106~17×106,沉淀系數為23~27S。在CsCl等密度梯度離心沉淀時(shí),病毒粒子可形成4個(gè)主要密度帶。大部分感染性病毒粒子存在于138~142g/cm3,少部分感染性粒子存在于145~147g/cm3(可能是不同構型或變異的病毒粒子)?找職ず秃胁煌暾鸇NA基因組的病毒粒子分別存在于130~132g/cm3和135~137g/cm3。  多數病毒粒子中含有3種多肽:VP1(70~90kDa)、VP2(62~76kDa)和VP3(39~69kDa)。VP2系構成衣殼蛋白的主要成份,是具有血凝活性的物質(zhì)。Peterson等報道在空衣殼中只含有2種蛋白質(zhì)——VP1和VP2。研究表明,VP3是VP2的裂解物,它只在衣殼裝配和病毒基因組包裝后才出現,其相對量隨著(zhù)感染進(jìn)程的發(fā)展而增加。阿留申病毒只有VP1和VP2兩種結構蛋白。
    2.血凝性  本屬病毒幾乎都有凝集紅細胞的特性,尤其對豚鼠和人的O型紅細胞。而且很多毒株能凝集諸如猴、倉鼠、鼠、貓、犬、豬、馬、鵝、鴨和雞等動(dòng)物的紅細胞,而且在不同的病毒株和不同種類(lèi)的紅細胞之間,此種凝集性有質(zhì)和量上的差別。因此,血凝和血凝抑制試驗是病毒鑒定和血清學(xué)分析的常用手段。血凝素是一種衣殼蛋白,其性質(zhì)甚為穩定,在pH2~11之間其性質(zhì)不改變。
    3.培養  本屬病毒雖能自行復制,無(wú)需輔助病毒的幫助,但能否增殖還取決于細胞的生理狀態(tài),它最適于在具有旺盛增殖能力并處在有絲分裂過(guò)程中的細胞內增殖。實(shí)驗研究證明,細小病毒的基因組是在感染細胞的染色體復制開(kāi)始以后才在細胞核內合成的,說(shuō)明本屬病毒的復制能力有缺陷。為此,當體外進(jìn)行病毒培養傳代時(shí),不能象一般常規那樣,等到細胞形成單層后才接種病毒,而必須在細胞培養的同時(shí)或最遲在24小時(shí)內接種病毒,這樣才能達到使病毒良好增殖的目的。鑒于本屬病毒具有潛伏存在于組織細胞中的特點(diǎn),當進(jìn)行病毒的初代分離培養時(shí),除可按常規方法用易感細胞進(jìn)行分離培養外,還?捎貌×辖M織進(jìn)行自體細胞培養。這種方法既能提高病毒的分離率,又能避免外來(lái)病毒的混入。本屬多數病毒的細胞感染范圍較窄,只能在自然易感宿主的細胞內增殖。病毒的復制過(guò)程主要在細胞核內進(jìn)行,并形成大型核內包涵體。細小病毒在細胞培養物內的隱蔽期很長(cháng),約10~16小時(shí),在隱蔽期的前期,胞漿內出現病毒抗原,這些過(guò)程與細胞代謝或細胞DNA的合成無(wú)關(guān)。在接種后10~24小時(shí),在病毒DNA合成的同時(shí),形成細胞核內抗原并出現病毒粒子。某些細小病毒在特定的細胞內培養時(shí),表現出缺損病毒性質(zhì),這種現象與細胞的生理活性沒(méi)有必然聯(lián)系,而主要與特定的細胞類(lèi)型有關(guān),例如HER病毒在L細胞和BHK細胞,H1病毒在HEL細胞和WL38細胞內培養時(shí),都呈現缺損病毒現象。在這種情況下,必須有輔助病毒同時(shí)存在,方能復制出具有感染性的子代病毒。另外,本屬病毒在細胞培養物內經(jīng)常出現沒(méi)有核心的空衣殼。
    4.抵抗力  對外界理化學(xué)因素的抵抗力非常強,是本屬病毒的一個(gè)特點(diǎn),這與病毒的化學(xué)組成和結構特點(diǎn)有密切關(guān)系。病毒無(wú)囊膜,不含脂質(zhì)和糖類(lèi),結構堅實(shí)緊密。絕大多數病毒能耐受65℃連續30分鐘加熱而不失其感染性。個(gè)別病毒能耐受更高的溫度,如Kilhan等(1959)發(fā)現,大鼠細小病毒的細胞培養物在80℃連續加熱2小時(shí),其感染性和血凝活性雖然下降很多,但并未完全喪失,且血凝效價(jià)下降程度與病毒懸液的pH值有密切關(guān)系。  在pH3~9,于56℃病毒保持感染性至少60分鐘,而在此范圍外,病毒感染性迅速降低。低溫長(cháng)期存放的本屬病毒其感染性不發(fā)生明顯變化。本屬病毒對乙醚、氯仿、醇類(lèi)和去氧膽酸鹽有抵抗性,無(wú)論其感染性和血凝活性都不受影響。大鼠細小病毒對紫外線(xiàn)照射敏感,很容易滅活。消毒劑可用于滅活細小病毒,最有效的有福爾馬林、β丙內酯、氨水和氧化劑等。
    5.致病性,本屬病毒多數呈長(cháng)期潛伏感染狀態(tài),不表現出可見(jiàn)的臨床癥狀,目前對很多這類(lèi)病毒的致病性尚不清楚,且對其中少數病毒的原發(fā)感染宿主還不明確,仍需進(jìn)行實(shí)驗和觀(guān)察。細小病毒的增殖只能在處于有絲分裂狀態(tài)的細胞中進(jìn)行,這決定了它們主要侵害動(dòng)物快速分化或分裂迅速的組織:如懷孕母畜的胎盤(pán)、胎兒、幼畜的腸上皮細胞以及骨髓等,從而引起胎兒流產(chǎn)、死產(chǎn),幼畜腸炎以及與骨髓病變有關(guān)的疾病(如白細胞減少)。這是細小病毒病原性的重要特征。
    6.細小病毒的腫瘤抑制作用  由于許多細小病毒首次是從腫瘤、腫瘤病毒保存物、腫瘤細胞系或用致癌物處理的實(shí)驗動(dòng)物中分離的,所以人們推測細小病毒的存在可能與腫瘤疾病有關(guān)。但進(jìn)一步的研究,發(fā)現情況并不是這樣。實(shí)際上,細小病毒常常具有抑制宿主腫瘤形成的能力。  如前所述,細小病毒常常引起持續感染,但研究表明,這種持續感染并不造成腫瘤的增加,恰恰相反,發(fā)生持續感染的動(dòng)物明顯地被保護而抵抗腫瘤的形成。出生時(shí)感染細小病毒H1或H3而無(wú)癥狀的大鼠,腫瘤發(fā)生率明顯比未感染的大鼠低。細小病毒不僅能抑制自發(fā)的腫瘤,還能有效地抑制實(shí)驗誘發(fā)的腫瘤。細小病毒對誘發(fā)腫瘤的抑制相當普遍,包括不同類(lèi)型的腫瘤以及不同誘變劑(RNA和DNA腫瘤病毒、化學(xué)致癌物)引起的腫瘤。但經(jīng)常從腫瘤組織或細胞中分離出細小病毒,說(shuō)明病毒并不能徹底抑制腫瘤的發(fā)展。?蓮哪[瘤中分離出細小病毒,最簡(jiǎn)單的解釋?zhuān)褪悄[瘤為這些病毒的增殖提供了適宜的環(huán)境條件。細小病毒對細胞的兩個(gè)主要要求與它們的腫瘤親和性有直接關(guān)系。第一,起始細小病毒DNA的復制,宿主細胞必須進(jìn)入S期。惡性轉化時(shí)的無(wú)節制的細胞增殖為細小病毒的復制提供了條件。第二,細小病毒感染時(shí),細胞必須處于適宜的分化表型。惡性轉化誘導了基因表達進(jìn)程的改變,導致細胞功能以及異常分化現象的出現,或許都有利于細小病毒對腫瘤的親和性。

     

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