微生物檢驗——傾倒平板法

用傾倒平板法作為常規微生物檢驗并不很理想，因為1-2ml的樣品量未必能正確顯示真正的菌數。即只有當菌數較高（每毫升大于30）時(shí)，才能得到準確的結果。然后由于過(guò)濾困難，對于某些果汁或含果汁飲品還要采用以上方法進(jìn)行微生物檢驗作為一般準則，當樣品無(wú)法過(guò)濾時(shí)才使用傾倒平板法。

總菌數             橙血清瓊脂

酵母和霉菌數    橙血清瓊脂（適用于低PH果汁飲料）

大腸菌數          EHDV瓊脂

注：所有培養基必須根據制造商的使用說(shuō)明進(jìn)行配制和殺菌，由于培養基對熱敏感，故加熱時(shí)要避免過(guò)熱，另外配好的培養基要倒入100-120ml瓶或16-18ml試劑管并蓋好，而每個(gè)容器里留存15%空間。

1. 使用前需將裝有培養基的瓶子或試管弄松，然后放在滾水或蒸汽浴里進(jìn)行溶解，要小心避免培養基過(guò)熱變質(zhì)。

2. 溶解之后馬上將它們移到47±2℃恒溫水槽里，當培養基溫度未降到水槽水溫之前不能拿出來(lái)使用。

3. 已消毒培養皿的數量要比所測樣品的數量多一個(gè)做空白對照。

4. 掀起培養皿上蓋，并將樣品用無(wú)菌吸管或勺子移入培養皿中。

5. 采用火焰消毒無(wú)菌操作法打開(kāi)培養基瓶或試管的蓋子。并往每個(gè)培養皿倒入16-18ml培養基。

6. 蓋回上蓋，并沿著(zhù)8字行路線(xiàn)輕微移動(dòng)培養皿使樣品與培養皿完全混勻。注意勿將培養皿里的培養基賤到到培養皿壁或蓋上。

7. 待培養基凝固后，將培養皿倒置，并于適當溫度進(jìn)行培養。

總菌數    35℃   大腸菌數   35℃  酵母和霉菌數     28℃ 

注：①為防止在過(guò)濾膜表面形成冷凝水，所有培養皿必須倒置培養箱中。

②在培養箱中放置一燒杯水，以維持適當溫度。

8. 橙血清瓊脂上酵母和細菌是無(wú)法用肉眼分別的，故除非可借助顯微鏡。除霉菌之外都當酵母菌計，大腸菌群顏色紅色。

9. 菌落數的計算：

① 必須分別在培養24h和72h后計算菌群。點(diǎn)計所有菌落（不管類(lèi)型）并記錄最高數目。

② 酵母﹑霉菌：在培養48h后計點(diǎn)霉菌和酵母數，并在此后每隔24h再計點(diǎn)一次直到過(guò)第三天，記錄最高數目。

A酵母菌通常為圓形白色菌落，有時(shí)它們也帶顏色，在1～2天后一些酵母菌菌落中心因吸收培養劑中指示劑而成顏色。

B霉菌菌落會(huì )顯示不同顏色（包括白、黃、紅、藍、黑）但以其“絨毛狀”或“棉花狀”外觀(guān)很易辨認，通常比細菌或酵母菌菌落為大。

C細菌菌落通常比酵母菌還快吸收指示劑，而其顏色會(huì )變成藍綠或褐色。在這種培養劑中細菌菌落一般比酵母菌小。

D大腸桿菌菌落呈綠色或墨汁色，并有的顯金屬光澤。在培養24h，另計算有“金屬光澤”的菌落。