耐熱芽孢的測定

錄入時(shí)間:2009-8-13 14:01:33 來(lái)源：食品伙伴網(wǎng)

1、儀器和試劑

（1）生化培養箱：36±1℃

（2）高壓蒸汽滅菌鍋

（3）恒溫水浴鍋：46±1℃

（4）天平

（5）電爐

（6）吸管：1ml和10ml，標有0.1ml單位的刻度

（7）三角燒瓶：容量為250ml、500ml

（8）平皿：皿底直徑為9cm

（9）試管：15×150mm

（10）酒精燈

（11）試管架、試管框

（12）滅菌刀或剪刀、滅菌鑷子

（13）酒精棉球

（14）記號筆

（15）白瓷缸（用于煮開(kāi)水）

（16）溫度計：0-100℃

（17）營(yíng)養瓊脂培養基：購買(mǎi)制好的營(yíng)養瓊脂，按說(shuō)明分裝于300ml三角瓶中，高壓滅菌121℃、15分鐘。

（18）生理鹽水：8.5gNaCl溶于1000ml蒸餾水中，高壓滅菌121℃、15分鐘。

2、方法

（1）用10ml滅菌吸管吸取5ml奶樣加入滅菌試管中。

（2）在另一支試管加入與奶樣等量的水。

（3）在裝水的試管中插一支溫度計。

（4）將裝有奶樣和水的試管同時(shí)放入沸水浴中（在電爐上用白瓷缸把水煮沸，并保持沸騰）。

（5）直至“裝水試管”的溫度達到100℃，計時(shí)10分鐘(如果水不到100℃就沸騰，則等候時(shí)間延長(cháng)；或在水中加入鹽以提供高沸點(diǎn)溫度，但要避免奶樣沸騰)。

（6）10分鐘后，取出試管，用冷水沖，使含奶樣的試管冷卻。

（7）用1ml滅菌吸管分別吸1ml冷卻后的奶樣于兩個(gè)滅菌平皿中。

（8）及時(shí)將冷卻至46℃的營(yíng)養瓊脂注入平皿約15ml，并轉動(dòng)平皿使之混勻；同時(shí)將營(yíng)養瓊脂分別注入加有1ml滅菌生理鹽水的平皿和另一個(gè)滅菌的空白平皿內，做空白對照。

（9）待營(yíng)養瓊脂凝固后，翻轉平板。置于55±1℃的培養箱內培養48-72h，取出計數。

3、計數

同菌落總數測定的計數方法。