狂犬病病毒理化學(xué)特性

  病毒粒子的沉降系數為600～625S，浮密度為1.16～1.2g/cm��3，分子量為4.75×10８。�タ袢�病病毒的核酸為不分節段的單股RNA，吖啶橙染色呈橘紅色，5�蹭迕撗跄蚝塑詹荒芤种平M織培養細胞中狂犬病病毒的增殖。病毒基因組長(cháng)11932個(gè)核苷酸，分子量約4.6×10��６。由基因組的3’端至5’端依次排列著(zhù)N、NS、M、G、L等病毒的全部5個(gè)結構基因，其長(cháng)度分別為1424、991、805、1675和6475個(gè)核苷酸�？袢�病病毒基因組是負鏈RNA，病毒RNA不能呈現mRNA的作用，需在病毒RNA聚合酶的作用下首先合成5個(gè)相應的mRNA，然后再翻譯成病毒的N、NS、M、G、L蛋白。在N基因前還有一個(gè)58個(gè)核苷酸的先導序列，在N�睳S、NS�睲、M�睪和G�睱基因間分別有2、5、5和423個(gè)核苷酸的間隙子序列，G�睱基因間的423核苷酸間隙子又叫偽基因，在魚(yú)的傳染性造血器官壞死病毒，該間隔區可以轉錄成病毒的第6個(gè)mRNA，其在病毒感染及復制過(guò)程中的具體功能尚待闡明。�タ袢�病病毒含有N、NS、M、G和L等5種蛋白質(zhì)。G蛋白即糖蛋白，其前體由524個(gè)氨基酸組成，前19個(gè)氨基酸為信號肽，信號肽被切除后，形成由505個(gè)氨基酸組成的成熟糖蛋白，成熟糖蛋白包括三個(gè)區域，即抗原區、轉膜區和胞漿區，分別由前438、439～461和462～505個(gè)氨基酸殘基組成。在抗原區內，有3個(gè)(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)主要抗原部位，分別位于第34～200(Ⅰ)、第34～42和198～200(Ⅱ)、第333～357(Ⅲ)氨基酸殘基之間。在第Ⅲ部位至少含有3個(gè)抗原決定簇，不同決定簇的氨基酸的初級結構排列緊密，并共用某些氨基酸。其中最關(guān)鍵和最易變化的氨基酸在第Ⅲ部位的第333、336、338和357位以及第Ⅱ部位的第198位氨基酸上。它們不僅是病毒的中和抗原決定簇，而且與病毒的感染和毒力直接相關(guān)。第333位的精氨酸被異亮氨酸、天冬酰胺或谷氨酸取代后,常常伴隨病毒毒力的明顯降低。在糖蛋白抗原區內，隨著(zhù)毒株的不同，每個(gè)糖蛋白分子有2～4個(gè)糖基化位點(diǎn)。��N蛋白即核蛋白由450個(gè)氨基酸殘基組成，每個(gè)病毒粒子含有1750個(gè)N蛋白分子，不同毒株間其序列高度保守，抗原性也高度一致。N蛋白有3個(gè)主要抗原位點(diǎn)，除了可以誘導機體產(chǎn)生非中和性抗體外，主要誘導機體產(chǎn)生細胞免疫。��NS蛋白即磷酸蛋白，由292個(gè)氨基酸殘基組成，每個(gè)病毒粒子含有1600個(gè)NS蛋白分子，在其分子中心及氨基末端有廣泛的疏水區，用該蛋白質(zhì)免疫動(dòng)物，不能誘導機體產(chǎn)生免疫保護反應，其功能在于與N蛋白和L蛋白一起負責病毒RNA的轉錄和復制。��M蛋白即基質(zhì)蛋白，由202個(gè)氨基酸殘基組成，每個(gè)病毒粒子約有1600個(gè)M蛋白分子，其功能尚不明確，可能與維持病毒結構和形態(tài)有關(guān)。��L蛋白即RNA聚合酶又叫大轉錄蛋白，由2127～2142個(gè)氨基酸殘基組成，每個(gè)病毒粒子含有30～60個(gè)L蛋白分子，其功能是負責病毒轉錄的全部活性。�タ袢�病病毒能抵抗自溶及腐爛，在自溶的腦組織中可以保持活力7～10天。凍干條件下長(cháng)期活存。在50%甘油中保存的感染腦組織中至少可以存活1個(gè)月，4℃數周，低溫中數月，甚至幾年。室溫中不穩定。反復凍融可使病毒滅活，紫外線(xiàn)照射、蛋白酶、酸、膽鹽、甲醛、乙醚、升汞和季胺類(lèi)化合物(如新潔爾滅)以及自然光、熱等都可迅速降低病毒活力。煮沸2分鐘殺死病毒。56℃于15～30分鐘內、1%甲醛溶液和3%來(lái)蘇兒于15分鐘內使病毒滅活。組織培養細胞中增殖的狂犬病病毒，用1/6000β�脖麅弱ヌ幚�2小時(shí)，即可滅活，故可用以制備疫苗。真空條件下凍干保存的病毒可于4℃活存達數年。實(shí)驗室研究中經(jīng)常應用加有2%滅活豚鼠血清或0.75%牛白蛋白V部分的pH7～9PBS作為狂犬病病毒的稀釋液。pH<3.0和pH>11.0，均可使狂犬病病毒滅活。60%以上酒精也能很快殺死病毒。