副流感病毒1型(Parainfluenzavirus,type1)
同義名:仙臺病毒(Sendaivirus);日本血凝病毒(HaemagglutinatingvirusofJapan);血細胞吸附病毒2型(Haemadsorptionvirus,type2)。
副流感病毒1型的原始分離毒株稱(chēng)為血紅細胞吸附病毒第2型,簡(jiǎn)稱(chēng)HA2病毒。它是1957年Chanock等從華盛頓1名患有急性喉氣管支氣管炎的嬰兒的咽拭子中,用恒河猴腎原代細胞培養分離出來(lái)的。我國于1962年在北京從急性下呼吸道感染患兒的咽拭子中分離出3株HA2病毒,從急性上呼吸道感染的患兒中分離出2株HA2病毒。HA2病毒也在世界其它地方分離出來(lái)過(guò),包括美國、澳大利亞、加拿大、前蘇聯(lián)、英國、丹麥、日本、法國和西印度群島。
(1)理化學(xué)特性副流感病毒1型經(jīng)電鏡測得的大小為100~180nm。毒粒內含單股RNA,核衣殼體螺旋對稱(chēng),有包膜,上有糖蛋白纖突。病毒粒子的感染力在50℃2小時(shí)或36℃80小時(shí)內全部喪失;在無(wú)血清的營(yíng)養液中25℃2小時(shí),其感染力損失99%。如將病毒保存在-60℃含蛋白質(zhì)的營(yíng)養液中,其感染力可保持數年。病毒在pH5.7~8.7時(shí),感染力穩定。用超聲波處理可以導致血凝素解離,而不增加其感染力。20%乙醚4℃過(guò)夜或氯仿4℃10分鐘可使其感染力完全喪失。乙醚或氯仿以及Tween80處理,可以導致表面抗原包括血凝素和神經(jīng)氨酸酶的釋放。0.5μg/ml的胰酶在37℃孵育1小時(shí)可使其感染力下降99.99%,但血凝素滴度不下降;孵育5小時(shí),則血凝素滴度下降。病毒經(jīng)乙醚處理后,用血凝或補體結合試驗可區分出兩種抗原成分:一種是可溶性抗原(S),它在20000r/min不沉淀,也不凝集血細胞,用經(jīng)鼻腔感染豚鼠制備的免疫血清可與之發(fā)生補體結合反應;第二種是特異性血凝抗原(V),它可與特異性豚鼠免疫血清發(fā)生血凝抑制反應。另有一種溶血素,在補體存在時(shí)可使雞紅細胞溶解。副流感病毒1型能凝集雞、豚鼠、人、綿羊、家兔和猴的紅細胞。雞紅細胞在4℃,豚鼠紅細胞在25℃,能獲得最高的血凝滴度。在偏酸或偏堿的pH中,血凝素比感染性病毒粒子更為穩定。該病毒用乙醚處理可以提高血凝滴度。在不同動(dòng)物血清中存在1型病毒血凝反應的非特異性抑制物,在家兔的正常和免疫血清的19S和4S部分含有1和3型病毒血凝反應的抑制物,而特異性抗體是在7S部分,可用凝膠過(guò)濾進(jìn)行純化。血清中存在的非特異性血凝抑制物質(zhì),可以用霍亂孤菌濾液的受體破壞酶(RDE)處理或白陶土處理法去除,如用過(guò)碘酸鉀處理,非特異性抑制固然可以去除,但特異性抗體也遭到部分破壞。將仙臺病毒與HA2病毒歸屬于副流感病毒1型的主要根據是,其可溶性抗原具有交叉反應。
(2)培養某些副流感病毒1型能在雞胚中生長(cháng),仙臺病毒株生長(cháng)更佳。羊膜腔接種最敏感,但傳代后可用尿囊腔和卵黃囊接種。培養適宜溫度為35.5℃,雞胚不死亡。HA2株能在人、猴、雞胚和豬的腎細胞培養物中生長(cháng),仙臺病毒株的適應范圍更廣。初次分離時(shí),細胞病變不明顯,用血細胞吸附試驗易于檢出病毒,也可將細胞培養物染色后檢查胞漿內的包涵體。仙臺病毒株可形成蝕斑。將接種物用胰酶處理,?稍黾游g斑數。仙臺病毒株能使培養細胞發(fā)生融合,即使滅活后也有這種作用,因此在哺乳動(dòng)物雜交細胞的研究中,廣泛應用仙臺病毒株作為細胞融合劑。
(3)病原性實(shí)驗感染時(shí),仙臺病毒株可使小鼠發(fā)生隱性感染,但在鼠群中幾經(jīng)傳遞后,毒力可增強而導致致死性肺炎。在過(guò)去無(wú)此病的鼠群中死亡率很高。偶而可以感染大鼠、豚鼠和豬。過(guò)去認為仙臺病毒株一般不感染人類(lèi),現在已有許多實(shí)驗證明它也是人類(lèi)呼吸道疾病的病原之一。血細胞吸附病毒2型只分離自人類(lèi),引起兒童急性喉氣管炎。近來(lái)應用細胞融合技術(shù),曾從多發(fā)性硬化癥病人的腦細胞中分離到本病毒。(4)血清學(xué)診斷:采用血凝抑制試驗和中和試驗進(jìn)行血清學(xué)診斷,其敏感性與病毒分離相似。進(jìn)行血凝抑制試驗時(shí),患病動(dòng)物血清要用RDE或白陶土處理,用人“O”型紅細胞?色@得滿(mǎn)意結果。補體結合試驗的敏感性稍差,由于豚鼠常有自然感染,所以補體應事先檢查有無(wú)抗體?焖僭\斷可用免疫熒光技術(shù)或免疫酶技術(shù)。
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