馬爾堡病毒

(Marberg Virus)�ネ�義名：綠猴病病毒，綠猴因子��

1967年秋，在西德的馬爾堡和法蘭克福、南斯拉夫的貝爾格萊德，同時(shí)暴發(fā)了實(shí)驗室工作人員的一種嚴重出血熱，31名患者中死亡7人，這些患者大都接觸過(guò)一批從烏干達運來(lái)的非洲綠猴(��Cercopitheass aethiops��)或其組織培養細胞。將患者的血液和組織，接種豚鼠和細胞培養物，分離獲得的病毒與已知病毒在形態(tài)學(xué)和抗原性上均不相同。根據發(fā)病地點(diǎn)，將這種病毒命名為馬爾堡病毒。1975年南非的約翰內斯堡，1980年，肯尼亞的內羅華和1982年的津巴布韋也相繼發(fā)生本病。��

我國尚無(wú)本病發(fā)生和流行的病例或血清學(xué)證據，鑒于其對人類(lèi)和養猴業(yè)的危害性，應該引起高度重視。��

1.形態(tài)特征��

  在自然狀態(tài)下，馬爾堡病毒是多形態(tài)的，或呈長(cháng)絲狀并且有時(shí)有分枝，或呈“U”形或“6”形或環(huán)形。以磷鎢酸負染后電鏡觀(guān)察，可見(jiàn)直徑約為80～90nm，長(cháng)度130～2600nm不等的病毒粒子。外周有囊膜，表面有長(cháng)約10nm的突起。��

2.理化學(xué)特性��

  馬爾堡病毒含有一個(gè)單鏈負股RNA。對熱有中等程度的抵抗力，56℃不能完全將其滅活，60℃1小時(shí)感染性喪失。在室溫及4℃時(shí)存放35天其感染滴度基本不變，-70℃可以長(cháng)期保存。紫外線(xiàn)，γ射線(xiàn)、脂溶劑、乙醚、β�脖麅戎�、次氯酸和酚類(lèi)等均可破壞病毒的感染性。��

3.培養��

  馬爾堡病毒可在多種組織細胞內增殖，包括綠猴腎原代細胞、恒河猴腎細胞、人羊膜細胞、雞胚成纖維細胞、豚鼠成纖維細胞以及傳代細胞系Vero、BHK��21、HeLa、ELF等，其中以Vero�睧6和Vero��98最為敏感。感染細胞可出現細胞病變，如巨細胞的出現、嗜堿性細胞漿內包涵體的形成等。��

4.分子生物學(xué)特性��

馬爾堡病毒的基因組為負股單鏈線(xiàn)性RNA，長(cháng)19kb。Popp株與Musoke株在核苷酸序列上具有94%的同源性。二者在堿基上存在1165個(gè)替代、4個(gè)缺失和16個(gè)插入，某些變異導致了局部的移碼。就編碼的蛋白質(zhì)而言，G蛋白的差異最大，L蛋白的功能區相當保守。��

馬爾堡病毒的基因組共編碼7種蛋白質(zhì)，其順序是3′�睳�睼P35�睼P40�睪�睼P30�睼P24�睱��5′，這些蛋白質(zhì)由一個(gè)單順?lè )醋覴NA轉錄產(chǎn)生，這一單順?lè )醋覴NA與負股基因組RNA互補。在上述7種蛋白質(zhì)中，G蛋白是唯一的糖基化的蛋白質(zhì)，以同源聚體的形式存在于病毒粒子的表面，與病毒的特性和高度致病性有關(guān)；L蛋白是RNA依賴(lài)性RNA聚合酶的重要組成部分。��

5.病原性��

  在實(shí)驗室條件下，猴、小鼠、豚鼠和倉鼠均可感染或發(fā)病。��

豚鼠對馬爾堡病毒較為敏感。經(jīng)腹腔、靜脈、皮內、皮下或鼻內等途徑人工接種病毒或高熱期患者血液，均可引起嚴重的發(fā)熱反應。但在最初幾代傳代時(shí)，動(dòng)物無(wú)明顯的發(fā)病體征和死亡，感染豚鼠在14～21天內產(chǎn)生特異性抗體。隨著(zhù)在豚鼠體內傳代次數的增加，病毒對豚鼠的毒力增高，感染豚鼠大多死亡。病變可見(jiàn)肝、脾、肺和淋巴結內出現壞死性變化，并常見(jiàn)間質(zhì)性肺炎和彌漫性血管內凝血，肝細胞內有小型的嗜堿性包涵體。��

  倉鼠的敏感性較低，病毒常常需要先在豚鼠體內多次傳代后，才能適應于倉鼠體內增殖并傳代。��

小鼠雖可感染但不發(fā)病。��

  猴在實(shí)驗室條件下經(jīng)不同途徑和劑量接種均可感染發(fā)病，包括非洲綠猴、獼猴和松鼠猴等。潛伏期2～6天，小劑量皮下接種可推遲至10天。發(fā)病早期，病猴體溫升高達41��3℃，但精神尚好，臨死前48小時(shí)表現厭食，聚堆，對外界剌激反應遲鈍，體重減輕等。在皮膚，尤其是臀部和股部皮膚上可見(jiàn)瘀點(diǎn)狀丘疹。發(fā)病后期，病猴呼吸困難，觸診可見(jiàn)肝腫大，瀕死期發(fā)生腹瀉，直腸和陰道粘膜出血，多在發(fā)病后6～13天死亡。��

  人類(lèi)潛伏期為3～9天。發(fā)病急劇，初發(fā)癥狀為全身疲乏，頭痛，發(fā)熱，畏寒，大量出汗，全身肌肉痛等，類(lèi)似流感。隨后病人表現惡心，大量嘔吐，水樣腹瀉和彌漫性腹痛，約持續7天。發(fā)病1～2天內，嘔吐物和糞便中含有大量血液。體溫在3～4天時(shí)達高峰，可達40℃以上，14天后開(kāi)始下降，但經(jīng)12～14天可再次升高�；疾�5～7天時(shí)出現皮疹，并從面部向軀干及四肢擴展，起初為丘疹，24小時(shí)后發(fā)展為斑疹，并逐漸融合為暗紅色的斑疹，皮膚無(wú)癢感，一般持續3～4天后消退，隨后發(fā)生脫屑。上述皮膚損害為本病的特征性癥狀。皮疹出現的同時(shí)，病人呈現出血性?xún)A向，如鼻衄、齒齦出血、尿血和陰道出血等，嚴重者可因發(fā)生休克而死亡，并伴有彌漫性血管內凝血。��

6.生態(tài)學(xué)��

  在首次發(fā)生本病的西德和南斯拉夫，患者共25名，他們都是制造小兒麻痹癥弱毒疫苗的研究人員和工作人員，是在解剖非洲綠猴，直接接觸其內臟器官、血液以及處理使用過(guò)的器皿而被感染的。以后又發(fā)生6名患者，他們都是給予這些患者治療和護理的醫務(wù)人員，因接觸患者的血液或分泌物而發(fā)生感染。但經(jīng)常接觸猴的飼養員卻極少發(fā)生感染，說(shuō)明本病的傳播方式可能以直接接觸為主。��

  美國曾對非洲綠猴和黑猩猩的血清進(jìn)行檢查，發(fā)現約有50%的血清含有1∶8～1∶25的補體結合抗體。��

  馬爾堡病毒可在蚊體內增殖，因此推測它們可能是自然界中猴類(lèi)馬爾堡病的保有者和傳播媒介。��

7.診斷��

馬爾堡病毒屬于生物安全4級病原體，病毒分離培養和研究工作都必須在P4級實(shí)驗室內進(jìn)行。��

在急性病例，可取病人(猴)的急性期血液和尿，或死亡人(猴)的肝臟等病料，電鏡觀(guān)察病毒粒子，即可做出診斷。病毒的分離可取上述病料接種Vero細胞，3天后采用免疫熒光技術(shù)即可檢出細胞內的病毒抗原。也可將上述病料接種豚鼠、乳鼠或猴，動(dòng)物發(fā)病后，可采用電鏡或免疫熒光技術(shù)檢查血液或組織器官中的病毒抗原。��

血清診斷方法包括間接免疫熒光試驗、酶聯(lián)免疫吸附試驗和放射免疫測定技術(shù)等。間接免疫熒光試驗不僅檢出抗體時(shí)間早、水平高，而且可測定IgG和IgM兩類(lèi)抗體。IgM抗體在發(fā)病后7天即可出現，并很快達到高峰，可用于疾病的早期診斷；而IgG抗體在感染后30天達到高峰，并持續較長(cháng)時(shí)間。��

8.防制��

由于本病主要呈人�踩嘶蚝铼踩酥�間傳播，因此必須嚴格隔離患者，嚴密消毒，防止因接觸污染血液和分泌物或經(jīng)醫療器械而發(fā)生感染。飼養和解剖可疑猴時(shí)，也要同樣采取嚴密的預防措施。