紫葉稠李組織培養研究

關(guān)鍵詞：紫葉稠李；組織培養；培養基；激素

紫葉稠李是優(yōu)良的園林綠化樹(shù)種。遼寧林業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院林盛教學(xué)基地于2003年4月從北京植物園引人紫葉稠李，經(jīng)過(guò)引種觀(guān)察，樹(shù)體健壯，生長(cháng)速度較快，3 a生樹(shù)高達2.5 m，地徑2.8 cm；抗寒性強，2003年1月和2005年1月園地氣溫達到-27.1℃和-29.0℃，無(wú)凍害發(fā)生；枝條密度是大，葉片卵狀長(cháng)橢圓形，長(cháng)度達12 cm，尤其突出的是葉片在生長(cháng)季表現為深紫色，用做行道樹(shù)、庭蔭樹(shù)和園景點(diǎn)綴，具有較高的觀(guān)賞價(jià)值。張寶剛等對紫葉稠李進(jìn)行了芽接、枝接、扦插等方面的研究，取得了一定的成果…為了在短期內獲得大量的紫葉稠李苗木。滿(mǎn)足綠化需求，筆者進(jìn)行了紫葉稠李的組織培養研究，為進(jìn)行工廠(chǎng)化育苗提供基本技術(shù)數據。

l材料與方法
1.1材料來(lái)源

試驗材料為遼寧林業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院林盛教學(xué)基地從北京植物園引入的生長(cháng)良好、無(wú)病蟲(chóng)害的紫葉稠李。

1.2外植體選用

取生長(cháng)健壯、無(wú)病蟲(chóng)害的紫葉稠李冬眠枝或剛剛萌動(dòng)的枝條，切成帶有一個(gè)頂芽或側芽的莖段。

1.3外植體的滅菌處理

滅菌流程：小莖段一流水沖洗(30 Min)→洗滌荊溶液浸泡(10 Min) →流水沖洗(30 min)→(以下工作在超凈工作臺完成)75％酒精浸泡30s→無(wú)菌水沖洗2次(1 min 1次) →0.1％HgCl2浸泡(8 min) →無(wú)菌水沖洗6次(2 min 1次)。

1.4試驗方法
1.4.1不同激素配比對紫葉稠李初代培養的影響�；�本培養基為MS+蔗糖30 g/L+瓊脂6g/L(pH5.8)，其中加入不同質(zhì)量濃度的6-BA(設O.20、O.40、0.60、O.80、1.00mg/L質(zhì)量濃度梯度)和NAA(設0.00、0.05、O.10 mg/L一3個(gè)質(zhì)量濃度梯度)作為初代培養的脫分化培養基，然后將消毒處理后的莖段接種在其中進(jìn)行培養觀(guān)察。
1.4.2不同激素配比對紫葉稠李再生嫩莖增殖的影響。
將初代培養獲得的小植株除去葉片后再切成小莖段，接種到附加不同質(zhì)量濃度的6一BA(0.50、1.00、2.00mg/L)、NAA(0.05、O.10、0.20 Mg/L)和GA3(0.00、0.50、1.00 mg/L)的繼代分化培養基上(基本培養基同初代培養基)，4周后觀(guān)察增殖狀況，并統計結果。

1.4.3不同生長(cháng)素組合對紫葉稠李生根的影響。
以l/2MS+蔗糖20 g/L+瓊脂7 g/L(pH5.8)為基本培養基，其中加入不同質(zhì)量濃度的NAA(0.00、0.10、0.50、1.00mg/L)和IBA(O.00、0.10、O.50 mg/L)作為生根培養基；將繼代培養得到的株高在1.5~2.0 cm的嫩莖轉人生根培養基中。20 d后觀(guān)察生根狀況，并統計結果。
以上培養基均在12l℃條件下滅菌20 min。培養溫度為20±2℃，光照12 h/d,光強為2 000—3 000 lx。

1.4.4生根苗移栽。當生根培養的小苗根長(cháng)為1.5—2.5 cm時(shí)。開(kāi)瓶在溫室煉苗7 d，移栽前3d用50％可濕性多菌靈800倍液噴澆滅菌。試管苗移栽基質(zhì)為珍珠巖+泥炭土和蛭石+草炭土兩種，每種基質(zhì)中2種材料的體積比均為l：l。每種基質(zhì)移植小苗l 000株。

2結果與分析

2.1激素配比對紫葉稠李初代培養的影響

試驗發(fā)現。紫葉稠李頂芽和側芽的分化能力均較強，培養2周后逐漸分化出小植株。30 d后部分小植株的葉腋處又分化出新的小植株。
由表l可知，不同激素配比對外植體的分化有顯著(zhù)影響，在MS+6一BA 1.00 mg/L+NAA0.10mg/L培養基中，小植株分化數量最少；而在MS+6一BAO.60 mg/L+NAA 0.1mg/L培養基中。小植株分化數量最多，質(zhì)量最好，分化率達到100.00％�？梢�(jiàn)，適宜的激素配比是誘導外植體分化的關(guān)鍵因素。
2.2激素配比對紫葉稠李再生嫩莖增殖的影響

由表2可知，增殖培養結果因激素配比不同而異，嫩莖增殖倍數隨細胞分裂素質(zhì)量濃度的增加而降低，以MS+6一BA0.50 mg·L。1+NAA0.05 mg/L+GA₃0.50 mg/L增殖倍數最高，達到8.17倍，且苗芽生長(cháng)健壯。
2.3不同生長(cháng)素組合對紫葉稠李生根的影響

由表3可知，以l/2MS+IBA0.50 mg/L培養基的生根效果最好，每個(gè)試管苗生根3—5條，長(cháng)度約1.5—2.5cm。生根率達到100％。

2.4基質(zhì)對紫葉稠李生根苗移栽的影響

在生根植株培養階段，對生長(cháng)健壯的生根苗進(jìn)行煉苗移栽。移栽后澆一次定根水。以后保持基質(zhì)濕潤，溫度保持在20℃左右，初期適當遮蔭。移栽后約15 d的緩苗期過(guò)后，植株發(fā)出新根開(kāi)始正常生長(cháng)。

試驗所使用的2種混合基質(zhì)對移栽成活率的影響不顯著(zhù)，但對小苗后期生長(cháng)速率有影響。移栽30 d后統計珍珠巖+泥炭土和蛭石+草炭土的平均苗高分別為9.5 cm和12.3 cm。由此可見(jiàn).蛭石+草炭土做移栽基質(zhì)更適合試管苗的生長(cháng)。
3結論

在紫葉稠李組織培養過(guò)程中。6一BA與NAA的配比對外植體的誘導具有顯著(zhù)影響。在初代培養階段，MS+6-BAO.60mg/L+NAA0.05 mg/L培養基對外植體的脫分化效果最好，分化率達到100.00％。在繼代增殖培養階段。MS+6一BA0.50 mg/L+NAA0.05mg/L+GA₃0.50 mg/L培養基的增殖倍數最高，達到8.17倍，且苗芽生長(cháng)健壯。在生根培養時(shí)，l/2Ms+IBA0.50 mg/L培養基的生根效果最好，生根率達到100％，且苗形美觀(guān)，色澤深綠，移栽后生長(cháng)旺盛。在移栽階段，在蛭石+草炭土(體積比為1：1)基質(zhì)中，移栽30 d后平均苗高為12.3 cm，有利于試管苗移栽的成活與后期生長(cháng)。

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