二、正痘病毒屬(Orthopoxvirus)
〖HT5SS〗正痘病毒包括痘苗病毒、天花病毒、牛痘病毒、兔痘病毒、小鼠脫腳病病毒(鼠 痘病毒)、水牛痘病毒、駱駝痘病毒、馬痘病毒和猴痘病毒等。痘苗病毒是代表種。正痘病 毒呈磚形，大小為200nm×200nm×250nm,各成員之具有共同抗原，且基因組之間可發(fā)生重組 ，血清 學(xué)上具有明顯的交叉反應。感染正痘病毒的細胞和病毒粒子的外膜上均有血凝素蛋白，大多 能凝集火雞和雞的紅細胞，但一些痘苗、兔痘HA-自然變異病毒株，不能凝集上述動(dòng)物的 紅細胞。正痘病毒 能感染源于哺乳動(dòng)物的大多數培養細胞，但在自然界中有種屬感染特異性。DNA長(cháng)度為170 ～250bp, G+C含量為36%左右。
(一) 牛痘病毒(Cowpox virus)
牛痘是牛的一種良性疾病，發(fā)生于乳牛，主要侵害乳房和乳頭的皮膚。一般通過(guò) 擠乳工人的 手或擠乳機而傳染。干奶的母牛、處女牛、公牛、役用牛和肉用牛等很少發(fā)生牛痘。擠乳工 人可將新近接種的痘苗病毒傳染給牛，癥狀與牛痘相同。
1.形態(tài)和理化學(xué)特性 牛痘病毒具有痘病毒的典型形態(tài)和理化學(xué)特性�；蚪M大小為222bp。在以水皰液制作的涂 片，經(jīng)姬姆薩染色，鏡檢可以見(jiàn)到成熟的病毒粒子(原生小體)，應用鍍銀法染色，效果更好 。 牛痘病毒具有血凝素，可以凝集火雞和雞的紅細胞，但其效價(jià)較低。
2.抗原性 〖HT5SS〗牛痘病毒在抗原性上與痘苗病毒和天花病毒極為相似。它們之間的微小抗原差 異(有人認為 僅是量上的差別)，可用交叉補體結合試驗、瓊脂擴散試驗和抗體吸收試驗檢出。中和試驗 的特異性更高。
〖BT4〗3.培養 牛痘病毒可在雞胚絨毛尿囊膜上良好生長(cháng)，并產(chǎn)生出血性痘斑，這是病毒易于侵害中胚層 組織，損傷毛細血管的內皮細胞的結果。大量感染時(shí)，雞胚可能死亡。但在40℃以上的溫度 中不能產(chǎn)生出血性痘斑。近年來(lái)多次發(fā)現引起白色痘斑的突變株。 牛痘病毒可在許多種類(lèi)的組織培養細胞中生長(cháng)，于雞胚細胞以及人胚腎和牛胚腎等細胞培 養物內形成蝕斑、合胞體和細胞膨脹等細胞病變。
〖BT4〗4.病原性 病毒在自然條件下只侵害母牛乳頭和乳房的皮膚。潛伏期為3～8天。病初體溫可能略高，食 欲降低。擠乳時(shí)乳頭和乳房比較敏感，局部溫度稍有增高。此后不久，在乳頭和鄰近的乳房 皮膚上出現幾個(gè)至10多個(gè)紅色丘疹，1～2天后變?yōu)橥愣勾蟮乃�，內含棕黃色或紅色的淋 巴 液。此后幾天，水皰中心塌陷，邊緣隆起而呈現臍狀，并迅速化膿，最后結痂，整個(gè)病程約 3周。痂皮脫落后，形成白色凹陷的疤痕。水皰可能融合，并常在擠乳時(shí)破裂，殘留鮮紅色 的創(chuàng )面。在無(wú)細菌 繼發(fā)感染時(shí)，病牛常無(wú)全身癥狀。 〖HT5SS〗本病一旦傳入牛群，即迅速傳播，直到所有母牛均被感染為止。 并常傳染給擠乳工人，在其手、臂甚至臉部出現痘疹，比初次接種痘苗時(shí)的病變 還要強烈，病灶常常壞死。 實(shí)驗感染時(shí)，牛痘病毒易于感染家兔、豚鼠、小鼠和猴。Marennikova等(1975)報道， 在莫斯科動(dòng)物園的獅子和穿山甲曾暴發(fā)過(guò)牛痘。牛痘病毒亦可感染象和虎。除皮膚病變外 ，某些動(dòng)物還發(fā)生致死性肺炎。
〖BT4〗5.免疫 牛痘痊愈后，可以獲得長(cháng)達幾年的免疫力。應用痘苗接種，也能預防牛痘的感染。但因牛 痘并非為嚴重性疾病，且不普遍發(fā)生，故只在特定情況下才考慮應用痘苗接種。 〖BT4〗6.診斷 根據乳頭和乳房皮膚上的特異病變及在牛群中迅速傳播的流行病學(xué)特點(diǎn)，可作出診斷。確 診時(shí)最好采取水庖液，以磷鎢酸負染后作電鏡檢查，不僅可以看到典型的痘病毒粒子，并可 直接與假牛痘病毒(副痘病毒)、口蹄疫病毒、牛潰瘍性乳頭炎病毒(皰疹病毒)和牛乳頭狀瘤 病毒相鑒別。 基層實(shí)驗室可用外科小刀刮取丘疹部皮膚的上皮細胞，或者吸取痘皰內容物，同時(shí)刮取痘 基部細胞，涂片后用銀染法染色，于光學(xué)顯微鏡的油鏡頭下檢查，可見(jiàn)暗褐色呈現橢圓形或 長(cháng)方形的 病毒粒子，與標本中污染的葡萄球菌相比，直徑僅為葡萄球菌的1/3左右。病毒粒 子呈短鏈鎖狀或成對排列。 也可將水皰液接種雞胚、單層細胞或皮膚劃痕接種于家兔的皮膚或眼角膜。牛痘病毒經(jīng)常于 雞 胚絨毛尿囊上形成紅色的出血性痘斑。家兔角膜在劃痕接種后，第二天在劃痕處發(fā)生小的 透明增生，滴上可卡因，切下角膜制備標本，HE染色，可以發(fā)現胞漿內的包涵體。如將角 膜 用升汞和酒精固定，可見(jiàn)明顯的圓形混濁斑點(diǎn)。皮膚接種的家兔，出現痘皰，并伴有 寬大的炎 性紅暈。接種病毒的單層細胞，例如雞胚細胞和牛胚腎細胞等，在感染后1～2天產(chǎn)生蝕斑和 細胞病變，并因胞漿突起伸長(cháng)而呈網(wǎng)狀。感染細胞內出現嗜酸性大型A型包涵體。 如果用化膿的痘皰液或痘皰皮、痂皮作為接種材料，則應充分磨碎，并用青、鏈霉素處理后 應用。 取痘皰材料制成涂片，應用熒光抗體染色，可以檢出病毒抗原，但因非特異性熒光較強，判 定必須慎重，并應設置多種對照。如果先將病料接種組織培養細胞，孵育1～2天后再用熒光 抗 體染色，結果比較可靠。應用痘皰液作抗原，與高價(jià)免疫血清進(jìn)行瓊脂擴散試驗，通�？� 在 4～5小時(shí)出現特異沉淀線(xiàn)。但如沒(méi)有各種特異性抗原作為對照，則難于與痘苗病毒和天花病 毒鑒別。 補體結合反應的敏感性較高。通常采取痘皰液，用生理鹽水作1：5稀釋?zhuān)? 500r/min離心 沉 淀15分鐘，取上清，58℃加溫30分鐘，作為待檢抗原。如系痂皮，則取1g置干燥缸內干燥 4～5小時(shí)，用玻璃粉磨細，并加5ml乙醚，振蕩10分鐘，靜置頃刻，吸去乙醚，并置37℃ 加 速乙醚蒸發(fā)。用生理鹽水將磨細的痂皮作1：20～1：50稀釋?zhuān)覝亟䴘n2小時(shí)，經(jīng)常振 蕩，然 后以1 500r/min離心沉淀15分鐘，吸取上清液，58℃加溫30分鐘，作為待檢抗原。用高免血 清 按常規方法作補體結合試驗。高免血清一般用家兔制備，即以牛痘病毒對家兔脅腹部作劃痕 接種，待其形成痘皰并結痂，4周后采其血清即成。補體結合試驗也須設置多種標準抗原對 照，才有可能測出牛痘病毒與痘苗病毒和天花病毒之間的抗原差異。
上一篇：昆蟲(chóng)痘病毒亞科
下一篇：天花病毒和痘苗病毒
海博微信公眾號
海博天貓旗艦店
