禽類(lèi)流感病毒

雞流感首次報道于1878年(意大利)。1955年證明雞流感病毒含有甲型流感病毒的核蛋白。為區別于雞新城疫，又稱(chēng)真性雞流感或歐洲雞流感病毒，實(shí)際上它就是禽流感病毒�，F在常用甲型禽流感病毒作為統稱(chēng)。其所引起的疫病又稱(chēng)真性雞瘟或歐洲雞瘟。1956年發(fā)現甲型流感病毒也能引起鴨的疾病(英國和捷克斯洛伐克)，接著(zhù)證明加拿大1952年從鴨分離的一株病毒也是甲型流感病毒。目前在世界各地分離的禽類(lèi)流感病毒已達近千種以上，且在至少50種禽類(lèi)中發(fā)現了流感病毒或其抗體。迄今所有的甲型流感病毒的各種表面抗原，基本上都能在禽類(lèi)流感病毒中找到。郭元吉等在我國17種不同野鳥(niǎo)中發(fā)現流感病毒的分布也極為廣泛。��

〖HT5SS〗禽流感在歐、美、亞、非洲等不少?lài)�家中均有發(fā)生，曾是世界性流行病，近年來(lái)已較少發(fā)生，但在某些國家仍為地方流行性疾病。Alexander列舉了自1975年以來(lái)得到證實(shí)的5次暴發(fā)，即發(fā)生在澳大利亞(1975年和1985年)、英國(1979年)、美國(1983～1984年)和愛(ài)爾蘭(1983～1984年)的暴發(fā)。我國佛山農牧高等專(zhuān)科學(xué)校和哈爾濱獸醫研究所從發(fā)病雞群中分離到甲型禽流感病毒(H9)。徐為燕等從鴨群中分離到15株甲型流感病毒，分別屬于H4、H5和H6，但均未引起禽流感流行。

 

1.抵抗力�ァ糎T5SS〗禽流感病毒在低溫、干燥或甘油中可保持活力達數月或一年以上。在干燥塵土中的病毒能活存14天。在冷凍的禽肉和骨髓中可活存10個(gè)月。但在直射陽(yáng)光下，經(jīng)40～48小時(shí)即可被滅活，在65～70℃加熱數分鐘即滅活。常用消毒藥品很容易將該病毒滅活。

2.培養��〖HT5SS〗禽類(lèi)流感病毒能在9～11日齡雞胚中生長(cháng)，病毒可以在雞胚中達到較高滴度，并具有裂解的HA。有些毒株接種雞胚尿囊腔后可使雞胚死亡，并引起雞胚的皮膚和肌肉充血、出血。多數毒株能在雞腎細胞和雞胚成纖維細胞等細胞培養物上生長(cháng)，并常產(chǎn)生細胞病變。大多數毒株可在雞胚成纖維細胞單層上形成蝕斑。雞胚成纖維細胞是最常用的原代細胞培養物，而犬腎傳代細胞系(MDCK)是最常用的傳代細胞系。某些毒株，例如鴨流感病毒還能在人和牛胚的組織培養細胞內增殖，產(chǎn)生細胞病變。病毒在細胞培養物內增殖，可由血細胞吸附試驗檢出。也有在HeLa細胞內增殖的報道。

3.抗原性�ァ糎T5SS〗各種禽類(lèi)流感病毒都有甲型流感病毒的核蛋白抗原和內膜蛋白抗原。禽流感病毒的毒株分類(lèi)基于HA和NA亞型。據表面抗原的鑒定結果。從禽類(lèi)分離到的流感病毒有14種不同的血素凝和9種不同NA。這些抗原又以不同的組合，產(chǎn)生極其多樣的毒株。此種組合又似乎沒(méi)有一定的模式，而且抗原的性質(zhì)與病毒的生物學(xué)特性無(wú)關(guān)，特別是與其毒力無(wú)關(guān)。在抗原特性相同的病毒中，有毒力強的毒株，也有毒力弱的毒株。為了鑒定病毒的HA和NA，要應用一組對不同亞型特異的抗血清或單克隆抗體，對分離物進(jìn)行血凝抑制(HI)和NA抑制(NI)試驗。屬于同一亞型抗原性相關(guān)水平的比較，以單克隆抗體，用HI、ELISA，中和試驗等方法進(jìn)行。某些禽類(lèi)流感病毒還有相似于人流感以及馬流感病毒的表面抗原。Zhezmer等還由雞分離到一株在表面抗原上與人流感A/香港/1/68(H3N2)完全一樣的病毒。�タ笻A抗體在抗感染的保護作用中起到主要作用，而抗NA抗體的保護作用較低。各種動(dòng)物在感染后均可在其血清中找到抗核蛋白抗體、血凝抑制抗體和NA抑制抗體。

4.病原性�ァ糎T5SS〗禽類(lèi)流感病毒的易感動(dòng)物包括雞、火雞、珠雞、野雞、鵪鶉、鷓鴣、燕鷗、鴿、鴨和鵝等。禽類(lèi)流感病毒的致病力差異很大，有些毒株的發(fā)病率雖高，但死亡率較低。從禽類(lèi)中分離到的大量流感病毒，證明為高致病力毒株者只是極少數。有些毒株的致病力很強，如雞流感病毒的某些毒株，皮下、肌肉、腹腔或靜脈注射極少量的含毒血液，即可使雞感染發(fā)病。在自然條件下，雞群的發(fā)病率和死亡率都可高達100%。還有許多病毒為低到中等毒力毒株。禽流感的傳染源主要是病禽，病毒主要通過(guò)病禽的各種排泄物、分泌物和尸體等污染飲水和飼料，經(jīng)消化道或傷口傳染。病毒也存在于病禽的所有組織和血液中。急性病雞的血液具有極高的感染性，即使稀釋幾萬(wàn)萬(wàn)倍，仍可使易感的成年雞發(fā)病死亡。病禽各組織中大多含有高滴度的病毒，病毒隨眼、鼻等分泌物以及糞便排出體外。呼吸道和消化道是主要的感染途徑。但是有關(guān)禽流感的詳細感染方式和發(fā)病機理，迄今尚未充分闡明。�ス�元吉等從鴨飲過(guò)的186份水標本中分離到58株甲型流感病毒，并指出甲型流感病毒在鴨類(lèi)中除糞便—水—口途徑外，口—水—口也是主要的傳播途徑之一。�ビ袕牟∏萋阎蟹蛛x出禽流感病毒的報道。據此有人認為本病可以通過(guò)禽卵傳播。有人認為野鳥(niǎo)也可以傳播本病，腹腔注射和口服少量病毒材料，都能引起感染發(fā)病。人工感染可使小鼠、雪貂等哺乳動(dòng)物發(fā)病。�ビ汕萘鞲胁《疽�起的疾病，因家禽品種、年齡、性別、有無(wú)并發(fā)癥以及毒株毒力和其它條件而不同，癥狀差異很大。病禽通常精神萎頓，不活動(dòng)，食欲減退，消瘦，母雞產(chǎn)蛋減少，并有輕重不等的呼吸道癥狀，例如咳嗽、噴嚏和呼吸時(shí)出現羅音等。病禽流淚，羽毛松亂，身體卷縮，頭和面部發(fā)生水腫，竇炎，皮膚發(fā)紺，并有神經(jīng)紊亂癥狀，經(jīng)常伴有下痢。這些癥狀可單獨出現或幾種同時(shí)出現。某些禽類(lèi)發(fā)病迅速，往往突然死亡，生前看不到任何癥狀。�ケ静〕Ｍ蝗槐┌l(fā)。潛伏期一般為2～5天。流行初期的患雞，常不表現任何癥狀而突然死亡。急性病例呈半昏迷狀態(tài)，高度衰弱，冠及肉垂發(fā)黑；頭部浮腫，眼周?chē)�、肉垂和頸喉部均出現腫脹，眼閉合，常引起氣喘和窒息，鼻孔內含有帶血的分泌物。病雞常發(fā)生水樣下痢，多于2天內死亡。死亡率為40%～100%。亞急性病雞有的出現神經(jīng)癥狀，共濟失調，驚厥，癱瘓和失明。�デ萘鞲械奶赜胁∽兪窍傥负透共恐�肪出血，有時(shí)在胸骨內面，甚至全身組織發(fā)生出血性病變。頭、眼瞼、肉垂、頸和胸等部位的腫脹組織呈淡黃色。肝、脾、肺等臟器常有灰黃色小壞死灶。腹腔和心包有充血和積液。鴨流感的主要癥狀以眶下竇的腫脹為主，竇中含有膿性粘液或干酪樣滲出物，病鴨表現疲乏，呼吸加快和喙部發(fā)紺。�セ痣u流感的癥狀和剖檢變化，與雞相似，但較緩和。

5.免疫�ァ糎T5SS〗禽類(lèi)流感病毒可使機體產(chǎn)生免疫性。少數病后存活的雞，都有堅強的免疫力，血清中和抗體效價(jià)較高，給易感禽類(lèi)注射后，可使其獲得2～3周的被動(dòng)免疫。用福爾馬林滅活的病毒作兩次免疫接種，而后分別以多株致死性禽類(lèi)流感病毒進(jìn)行交叉攻毒，結果證明，以同種或同一亞型病毒免疫的雞，能獲得完全保護，并發(fā)現HA相同的病毒之間能夠交叉保護，但NA相同的病毒，只有部分的保護，說(shuō)明免疫保護性主要是由抗HA抗體提供的。�テ�今已有多種不同類(lèi)型疫苗研制和試用的報道，包括以福爾馬林或石炭酸滅活的滅活疫苗以及應用雞胚、鴿或人類(lèi)組織培養細胞傳代減毒的弱毒疫苗，據云都有較好的免疫原性。但因禽類(lèi)流感病毒至少有14種HA抗原，彼此間缺乏明顯的交叉保護作用，實(shí)踐上又很難制備包括各亞型，且對各亞型都有良好免疫原性的疫苗。這就給疫苗的應用，帶來(lái)了困難。��Beard等報道了由火雞分離出來(lái)的一株自然弱毒。此株(A/火雞/俄勒崗/71)具有H��7和N��3的表面抗原，給雞作鼻內、靜脈內或氣溶膠等途徑接種，均無(wú)毒力。以其免疫的雞能抵抗強毒株(A/FPV/荷蘭/27)的攻擊�，F已用基因工程技術(shù)分離禽流感病毒的HA基因和NA基因，插入到病毒載體，如痘苗病毒、禽痘病毒、桿狀病毒和反轉錄病毒，并在實(shí)驗室水平成功地用于家禽的免疫，是有前途的基因工程疫苗。需要解決的問(wèn)題是它們在控制不同家禽群體中的不同致病力的流感病毒的保護作用。��

6.診斷�ァ糎T5SS〗根據流行病學(xué)、臨床癥狀和病理變化的綜合分析，可做出初步診斷，確診須靠病毒的分離、鑒定或血清學(xué)試驗。�シ蛛x病毒用的病料，是以棉拭子從死雞(或撲殺的病雞)呼吸道和竇部采集的滲出物，或采取脾、肺等臟器。急性病例可直接采取病雞的血液作為接種材料。一般應用9～11日齡雞胚，采用尿囊腔和羊膜腔同時(shí)接種的方法分離病毒。接種后的雞胚，置35℃培養48～72小時(shí)。必須注意，某些毒株增殖速度很快，可使雞胚在48小時(shí)以?xún)人劳�，某些毒株則增殖很慢，接種雞胚甚至長(cháng)期不死。因此必須每日進(jìn)行兩次檢卵，如發(fā)現死胚，應即采集尿囊液和羊水，進(jìn)行血凝試驗。如在接種后72小時(shí)雞胚仍健活，則應將其移置于4℃冰箱，經(jīng)8～12小時(shí)使血管收縮，然后采集尿囊液和羊水，進(jìn)行血凝試驗。經(jīng)盲傳3～5代后仍未發(fā)現紅細胞凝集時(shí)，即判為陰性。血凝試驗陽(yáng)性時(shí)，即可應用各種標準免疫血清進(jìn)行病毒鑒定。�ヒ栽\斷為目的時(shí)，可用血凝抑制試驗和ELISA作血清檢查。采集急性期和恢復期雙份血清，當出現4倍以上抗體升高，即可診斷為流感。�ッ庖邤U散試驗可用于檢測禽類(lèi)血清中的抗核蛋白抗體，效果較好，但不能分辨病毒的亞型或株。�オ�