豬流感病毒(Swineinfluenzavirus)
1918年,美國最先報道發(fā)生豬流感,發(fā)病豬達數百萬(wàn)頭,死亡數千頭,并被認為與1918~1919年的人類(lèi)流感大流行有關(guān)。值得注意的是,許多經(jīng)歷過(guò)1918~1919年流感大流行的老年人,體內抗豬流感HA的抗體和中和抗體維持相當長(cháng)的時(shí)間。Shope于1930年由豬分離獲得第一株流感病毒,即A/豬/衣阿華/30株。,三年后,Smith等才分離獲得人的流感病毒。人們原來(lái)認為豬流感是流感病毒和豬嗜血桿菌協(xié)同感染的結果。但是業(yè)已證實(shí),單用豬流感病毒也可使豬發(fā)生流感。因此,豬嗜血桿菌雖然是豬流感病毒的主要伴發(fā)或繼發(fā)性細菌,但并不一定是豬流感不可缺少的病原因子。此外,巴氏桿菌、雙球菌、鏈球菌等也常參與豬流感的繼發(fā)感染。
〖BT4〗1.抵抗力〖HT5SS〗豬流感病毒對干燥和冰凍的抵抗力強。病料中的病毒在50%甘油中活存40天。60℃加熱20分鐘滅活。一般消毒劑對其均有滅活作用。
〖BT4〗2.培養〖HT5SS〗豬流感病毒能在雞胚中培養增殖,并能在猴腎細胞、胎豬器官培養內生長(cháng)。當今最常應用10日齡雞胚的羊膜腔或羊膜腔—尿囊腔同時(shí)接種法分離豬流感病毒。感染雞胚大多不死亡,但雞胚液中出現HA。
〖BT4〗3.抗原性〖HT5SS〗致使豬發(fā)生流感的甲型流感病毒包括兩個(gè)病毒亞型,甲1型(H1N1)和甲3型(H3N2)。據國內外少數研究資料報道,在豬血清中有甲2型病毒抗體存在。我國郭元吉等也已從北京地區豬群中分離到甲3型和甲1型病毒。法國學(xué)者從豬中分離出流感病毒H1N2亞型,由抗體的檢測調查研究和病毒分離研究都表明,豬源的甲1型和甲3型病毒都與禽源分離株和人的相應亞型相關(guān)。隨著(zhù)人類(lèi)新亞型暴發(fā)流行,在豬群中也出現了相應亞型的流感病毒和血清抗體,說(shuō)明豬群中流感的流行與人類(lèi)流感的流行有著(zhù)十分密切的關(guān)系。關(guān)于豬流感病毒的來(lái)源問(wèn)題,有人認為1918年引起人流行時(shí)的病毒,以某種方式從人傳給了豬,并作為豬的地方性流行病而被存留下來(lái)。業(yè)已證明,人的流感病毒可以自然感染其它動(dòng)物,例如人的甲3型病毒可以自然感染豬,從豬中分離的A/豬/臺灣/69(H3N2)株,其表面抗原和人流感的A/香港/1/68(H3N2)株病毒完全一樣,并且可以在豬體內增殖。
〖BT4〗4.病原性〖HT5SS〗各種不同年齡、性別和品種的豬對豬流感病毒均有易感性。豬流感的傳染源是病豬和帶毒豬(痊愈后帶毒6~8周)。病毒存在于病豬或帶毒豬的鼻液或氣管、支氣管滲出液以及肺和肺淋巴結內。傳染途徑主要是呼吸道。有人認為,寄生在病豬肺內的豬肺絲蟲(chóng)及其排出的蟲(chóng)卵,也含有豬流感病毒,并可隨著(zhù)蟲(chóng)卵(通過(guò)蚯蚓)發(fā)育成侵襲性幼蟲(chóng),再傳給健豬。病毒隱伏在肺絲蟲(chóng)體內,只有豬受到某些外因刺激而降低抵抗力時(shí),病毒才能脫離肺絲蟲(chóng)而引起發(fā)病。但由于缺乏病毒在肺絲蟲(chóng)體內存活和增殖的直接證據,所以有人不同意上述說(shuō)法。豬流感的流行有較明顯的季節性,大多發(fā)生在天氣驟變的深秋和早春以及寒冷的冬季,特別是在并發(fā)豬嗜血桿菌感染時(shí),疾病傳播迅速,往往在2~3天內全群發(fā)病,常呈地方性流行或大流行。病程較短,如無(wú)并發(fā)癥,病豬可在7~10天康復。如有繼發(fā)感染,可使病勢加重,致發(fā)出血性支氣管肺炎或腸炎而死亡。本病發(fā)生突然,全群體溫突然升高(40~42℃),食欲減退或廢絕,精神極度萎頓,常臥地不愿起立。呼吸急促,呈腹式并常夾雜陣發(fā)性咳嗽。從眼和鼻流出粘性分泌物,鼻分泌物有時(shí)帶血。病變主要在呼吸器官。鼻、喉、氣管和支氣管粘膜充血,表面有大量泡沫狀粘液,有時(shí)混有血液。肺部病變輕重不一,有的只在邊緣部分有輕度炎癥;嚴重時(shí),病變部呈紫紅色。病理組織學(xué)檢查,可見(jiàn)卡他性支氣管肺炎變化,細菌學(xué)檢查,?砂l(fā)現嗜血桿菌。實(shí)驗條件下可使小鼠、雪貂感染發(fā)病,主要表現肺炎癥狀。1976年春,美國新澤西州新兵中曾發(fā)生豬流感病毒感染的局部暴發(fā)。
〖BT4〗5.診斷〖HT5SS〗根據流行病學(xué)、臨床癥狀和剖檢變化,?勺鞒龀醪皆\斷。為了進(jìn)一步確診,可采取發(fā)病2~3天急性病豬的鼻分泌物或氣管、支氣管滲出物作為病料,進(jìn)行病毒分離。也可撲殺急性病豬,采取脾、肝、肺和肺淋巴結等作為病毒分離材料。分離病毒,常用9~11日齡的雞胚。將接種材料用滅菌緩沖生理鹽水適當稀釋后,經(jīng)3000r/min離心沉淀10分鐘,吸取上清液,加入青、鏈霉素,使每毫升接種液中的青、鏈霉素最終含量為1000u,4℃感作1小時(shí),按羊膜腔和尿囊腔及尿囊腔各02ml的量,做同時(shí)接種。將接種后的雞胚置33~35℃孵育3天,隨后按常規方法采集羊水和尿囊液,并分成三份:一份保存于低溫冰箱中備用;一份作紅細胞凝集試驗,檢查有無(wú)HA;另一份則用于傳代。如果盲傳3代仍無(wú)HA出現,則為陰性結果。如果出現HA,即可進(jìn)行病毒鑒定,以新分離病毒作為HA抗原,應用已知的各亞型毒株的免疫血清進(jìn)行血凝抑制試驗。以診斷為目的,也可采取病豬急性期和恢復期(相距2~3周)的雙份血清,進(jìn)行血凝抑制試驗。如果恢復期血清的抗體效價(jià)比急性期血清升高4倍以上,即可診斷為流感。因豬血清中含有非特異性紅細胞凝集物質(zhì)和非特異性血凝抑制物質(zhì),故在進(jìn)行血凝抑制試驗時(shí),必須將其去除。一般用下述方法:取血清1份,加入霍亂濾液〖ZW(*〗關(guān)于“霍亂濾液”的制備方法,請見(jiàn)本書(shū)第一版665~666頁(yè)!糧W)〗3份,37℃水浴過(guò)夜。隨后再以56℃水浴處理30分鐘,破壞殘存濾液的酶活性。取上述處理的血清1份,加入1/90mol/L的過(guò)碘酸鉀(KIO3)2份,室溫作用30分鐘后,再加1份2%的甘油鹽水。最后加入血清原量1/2的已經(jīng)洗滌的沉淀雞紅細胞,充分混合,置室溫中處理1小時(shí),其間振蕩2~3次,再以1500r/min離心10分鐘,吸取上清液進(jìn)行試驗。經(jīng)此法處理的血清,其稀釋度已為1∶5。
〖BT4〗6.免疫〖HT5SS〗豬在流感痊愈后,產(chǎn)生比較堅強持久的免疫力,極少發(fā)生第二次感染。但康復豬卻可能成為較長(cháng)期的帶毒和排毒者。因此,病后康復的種豬,可能成為傳播本病的慢性帶毒者。有關(guān)豬流感疫苗,特別是福爾馬林滅活疫苗的研究報告較多,據云可以提高豬的免疫力,但尚未見(jiàn)推廣應用。
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