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    豬瘟病毒免疫和免疫接種 



    錄入時(shí)間:2009-7-8 13:45:40 來(lái)源:青島海博

     
      豬瘟的免疫接種,包括被動(dòng)免疫和主動(dòng)免疫,是當前防制豬瘟的主要手段。被動(dòng)免 疫應用高免血清,主動(dòng)免疫則有高免血清血毒同時(shí)接接法、 滅活結晶紫疫苗和弱毒活疫 苗。  高免血清血清同時(shí)注射法可以產(chǎn)生堅強持久的保護力,但因使用高免血清價(jià)高,  且因應用強毒,有造成散毒的危險,現已禁止使用。  弱毒疫苗,產(chǎn)生免疫力快,且堅強而持久。關(guān)鍵是要選擇和培育出一株安全性穩定、 免疫性強的弱毒株。許多弱毒株仍保留一定程度的殘余致病力,必須同時(shí)注射一定量的免 疫血清以減輕其反應。就全世界來(lái)說(shuō),豬瘟弱毒疫苗已經(jīng)廣泛應用。經(jīng)過(guò)多年實(shí)踐應用, 公認安全有效,沒(méi)有殘余致病力的弱毒疫苗株有三:① 中國“54Ⅲ系”,又稱(chēng)“C株” 兔化弱毒疫苗;② 日本GPE細胞弱毒疫苗以及③ 法國培育的“Thiveosal”  冷變異弱毒 株。 
     (1) 中國株豬瘟兔化弱毒: 中國獸藥監察所周泰沖等從1954后開(kāi)始相繼用4株豬瘟病毒 誘使家兔發(fā)病,經(jīng)過(guò)長(cháng)期試驗,終于選育出一株能夠適應家兔的豬瘟病毒,并減弱其 對豬的致病力,但仍保持堅強的免疫原性。用作疫苗在全國推廣應用,對控制豬瘟的發(fā) 生起到?jīng)Q定性效果,且被國外廣泛應用,稱(chēng)為“C株”,即中國株豬瘟弱毒。
      這株兔化變異毒具有下列生物學(xué)遺傳特性:
    ① 已由一株感染豬的病毒變異為感染兔 的病毒。感染兔產(chǎn)生典型熱反應,并能被豬瘟免疫血清所中和。由感染兔采取含毒量最 高的脾臟、淋巴結為種毒制取疫苗。兔的感染率達100%。曾將兔化毒傳兔985代, 熱反 應率保持90%以上,充分證明“兔化”的遺傳性保持穩定;
    ② 兔化毒接種各品種豬都安 全,不保毒,不排毒,特別是對孕豬、胎豬、乳豬都無(wú)殘余毒力,且不通過(guò)胎盤(pán)屏障誘 發(fā)仔豬慢性豬瘟。連續回歸易感豬7代,毒力不返強。 二十余年來(lái)安全有效地用于控制 我國豬瘟,證明是一株已無(wú)殘余毒力的遺傳性穩定的毒株;
    ③ 免疫力堅強, 免疫豬可 以抵抗所有品系的豬瘟強毒株的攻擊,產(chǎn)生免疫力快而持久,并可用于疫區作緊急接種 之用。  C系疫苗的制備技術(shù)也在不斷改進(jìn)中。我國在1957年開(kāi)始推廣C系疫苗,最初提倡就 地制苗,就地應用。繼而研制真空冷凍干燥疫苗成功,集中生產(chǎn),統一供應,凍干苗便 于保存,成為消滅我國豬瘟的有利工具。1964年開(kāi)始應用乳兔制苗,并在山區利用牛制 備牛體反應苗。目前,各地生物制品廠(chǎng)一般均用犢牛睪丸細胞生產(chǎn)C系疫苗。  近十余年來(lái),歐洲各國、亞洲及少數拉丁美洲國家都廣泛應用C株弱毒, 并一致認 為該毒株免疫性堅強,特別是可以安全地免疫預防仔豬、乳豬以及種豬群! —ァ 1978年聯(lián)合國糧食及農業(yè)組織的一個(gè)專(zhuān)家會(huì )議一致認為中國株豬瘟弱毒疫苗在控制 和消滅歐洲國家的豬瘟中起到了重要作用。羅馬尼亞將中國株豬瘟弱毒列為參考疫苗毒 株,因其已無(wú)致病力,雖可穿越胎盤(pán)屏障感染胎兒,但對胎兒無(wú)害,不產(chǎn)生慢性豬瘟。 (2)低溫細胞培養豬瘟弱毒株:日本、 法國和捷克斯洛伐克先后應用低溫培養法育成 弱毒株。日本Sasahara于1959年培育成一株溫度敏感株——GPE-細胞苗。 是將病毒 先在豬睪丸細胞上傳142代,隨后用終點(diǎn)稀釋法選出純系毒株, 再通過(guò)牛睪丸細胞26代 減毒,如上挑選的純系毒株,再適應于豚鼠腎細胞傳41代,最后用新城疫病毒強化法 選出END陰性的純系毒株。此株能很好地在30℃溫度中增殖,并在30℃培養 的豚鼠腎細胞中制備GPE-疫苗。1966年開(kāi)始在日本應用,無(wú)殘余毒力, 成功地控制了 日本的豬瘟。  法國的Aynaud成功地從Alford強毒株中分離出Thiveosal冷變種。 先將 強毒株在仔豬腎原代細胞中傳代,隨后轉到牛肌肉細胞,在29~30℃培養170代。 通過(guò) 終點(diǎn)稀釋法選出一株純系弱毒。這個(gè)低溫變異株,已完全喪失其對豬的毒力,回歸豬體 后毒力不返強,無(wú)殘余毒力。對各種年齡的豬都安全有效,保持堅強的免疫原性,F已在法 國推廣應用!〗菘怂孤宸タ擞1976年也報告用終點(diǎn)稀釋法從在30℃培養傳代的細 胞毒中分離出一株無(wú)毒力的后代,證明其對不同日齡的豬都無(wú)毒力,免疫性也好,試用 后證明安全有效。  我國從50年代起就廣泛應用兔化弱毒疫苗預防注射,取得了控制或消滅(少數地區)豬瘟 的效果,但是注苗的單位或地區有時(shí)仍有豬瘟發(fā)生,尤其是非典型豬瘟發(fā)生較多, 并出現了豬瘟病毒的持續性感染和娠妊母豬的帶毒綜合癥(母豬帶毒,感染胎兒,引起死 胎、弱胎及先天性震顫)。持續性感染與胎盤(pán)感染密切相關(guān), 娠妊母豬的亞臨床感染可能 導致胎豬的胎盤(pán)感染,這些豬可長(cháng)期帶毒,排毒,并具有免疫耐受性。為什么注苗的豬還 發(fā)生豬瘟?其原因是多方面的:一是沒(méi)有按規定妥善保存和運輸疫苗,使其免 疫原性降低;二是注射時(shí)操作不正規,劑量不足;三是母源性中和抗體干擾。另外,還有人 推 測,免疫接種失敗的原因可能是豬瘟兔化弱毒疫苗由于多年不斷傳代而發(fā)生變異,導致免疫 豬不能抵抗野毒的攻擊。  關(guān)于母源抗體干擾乳豬免疫效果的問(wèn)題:由于科學(xué)養豬技術(shù)的進(jìn)步, 國外哺乳仔豬 的斷乳時(shí)間提早到4周齡。提早斷乳時(shí)間出售仔豬,影響疫苗注射的效力。在4周齡時(shí)注 射疫苗,母源抗體的干擾作用很強,以致免疫無(wú)效。   仔豬的母源抗體到底持續多久?何時(shí)注苗最為合適?如何避免母源抗體的干擾作用?  這是目前豬瘟免疫中的重要問(wèn)題。門(mén)常平等選取北京市某農場(chǎng)免疫母豬的后代 仔豬,分成三組,其中二組的母豬在產(chǎn)前又接種兔化弱毒疫苗1次,第三組不注射。
      關(guān)于仔豬哺乳前注射疫苗的問(wèn)題,是在無(wú)法解決母源抗體的干擾現象而提出來(lái)的。 法國Coitheier等指出,在仔豬沒(méi)有吮吸初乳以前注射兔化弱毒苗, 可以使 其產(chǎn)生主動(dòng)免疫力,這是因為:
    ① 70日齡豬胎兒的免疫系統已經(jīng)可對抗原刺激產(chǎn)生 應答,形成抗體,故在仔豬出生時(shí)估計其免疫系統已經(jīng)相當成熟;
    ② 初生仔豬在吮吸初 乳后獲得的抗體,在吮乳3小時(shí)后就可由其血流中檢出,至6~12時(shí),血流中的抗體含量 已達最高峰。如在仔豬血流抗體達最高峰以前接種兔化弱毒苗,可使弱毒株在體內有足 夠的增殖時(shí)間,不致被血流中的抗體所中和;
    ③ 豬瘟兔化弱毒株對乳豬無(wú)殘余毒力,  十分安全,可以大膽使用。  法國的實(shí)驗證明,在仔豬吮吸初乳前注射兔化弱毒疫苗,強毒攻擊時(shí),雖然可能呈 現輕度熱反應,但常耐過(guò)而不死亡。另一組仔豬在其吮吸初乳后3~6小時(shí)注射疫苗,則不能 抵抗強毒攻擊而死亡,證明由于母源抗體的干擾,不能產(chǎn)生主動(dòng)免疫力。  臺灣省賴(lài)秀穗報道,仔豬在哺乳前接種兔化弱毒疫苗,是已初步證明為行 之有效的免疫方法。先用4窩初生仔豬,每窩平均分為兩組,一組為注苗組, 在出生后 尚未吮吸初乳前注射一次兔化弱毒疫苗,另一組在出生后不注射疫苗,立即吮吸初乳。 在4周和8周后,分別從注苗組和對照組各取半數仔豬進(jìn)行強毒攻擊。兩次實(shí)驗結果相同: 注苗組仔豬沒(méi)有任何臨床反應,而對照組仔豬則全部發(fā)生豬瘟而死亡。由此證明初生仔 豬在吮吸初乳前注射兔化弱毒疫苗,可以不受母源抗體的干擾! 轵炞C其在田間試驗中的效果,曾選擇一個(gè)疫情嚴重的豬場(chǎng),小豬雖經(jīng)兔化弱毒疫 苗的加強注射,也未能根除疫情。于是在該場(chǎng)采取在吮吸初乳前免疫接種仔豬的預防方法, 竟在較短時(shí)間內使豬瘟絕跡。該場(chǎng)應用此法免疫接種的仔豬已經(jīng)超過(guò)1 000窩。  由于母豬大多在夜間分娩,對此法的實(shí)施有一定困難。  HCV基因工程疫苗研究近幾年也取得了一定進(jìn)展。Rumenapf等首先 在痘苗病毒中表達了HCV的結構蛋白。將痘苗病毒HCV重組子注入小鼠和豬體內,均 可誘導HCV中和抗體的產(chǎn)生。經(jīng)重組病毒接種的豬,可以抵抗致死劑量HCV的攻擊,即使不 能誘導中和抗體的重組子也可產(chǎn)生保護性的免疫力。鑒于痘苗病毒對人類(lèi)和環(huán)境可能造 成的潛在危害,限制了這一載體的發(fā)展,而豬痘病毒、皰疹病毒(如偽狂犬病毒)將是很 有希望的候選載體。Vanziji等用減毒偽狂犬病毒(PRV) 表達了HCV的囊膜糖蛋 白gp55。篩選獲得了三種重組病毒M203、M204和M205。M203編碼的gp55缺乏穿膜域(tra nsmerbrane domain),M204帶有一個(gè)穿膜域,M205帶有3個(gè)穿膜域。免疫原性和保護力 試驗獲得了很好的結果。無(wú)論是重組病毒或是對照病毒(不帶gp55基因)均可誘導產(chǎn)生高 滴度的PRV中和抗體。4只注射了M203的SPF豬,HCV中和抗體滴度較低,雖然抵抗住了HC V的攻擊,但出現了嚴重的疾病,而M204、M205試驗豬,均產(chǎn)生了高滴度HCV中和抗體, 并且全部獲得免疫保護,未呈現任何癥狀,也沒(méi)有向外界排毒的跡象。這些 結果證明gp55作為抗原足以激發(fā)機體對HCV的保護性免疫應答,也顯示了弱毒PRV株作為 載體制備抗豬瘟偽狂犬病疫苗的可能性,它具有很高的經(jīng)濟價(jià)值和良好的發(fā)展前景。Huls t等在昆蟲(chóng)細胞中表達的HCV糖蛋白gp55,能在豬體內保護100個(gè)50%致死劑量HC V的攻擊。

     

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