流行性乙型腦炎病毒

  　流行性乙型腦炎是一種中樞神經(jīng)系統的急性傳染病。由蚊為媒介而 傳播，以高 熱和狂暴或沉郁等神經(jīng)癥狀為特征。具有明顯的季節性和一定的地理分布區，多發(fā)于夏秋蚊 類(lèi)大量孳生的季節。1924年首先證實(shí)于日本，由一個(gè)病人尸體腦組織中分離到病毒。19 34～1936年，日本馬腦炎大流行，用小鼠由病馬腦組織中分離到病毒，進(jìn)而證明這種 病毒的性狀與從人腦中分離的病毒完全一致，隨后又曾從豬、牛、山羊等動(dòng)物體內分離 到同樣的病毒，故稱(chēng)日本乙型腦炎病毒或日本腦炎病毒(JEV)。�ァ　∥覈�流行性乙型腦炎病例(人)的最早報道，是在1921年。1934年用中和試驗加以證 實(shí)。1940年由尸體腦組織中分離到病毒，并證明與日本乙型腦炎病毒相同。全國解放后 統一命名為流行性乙型腦炎病毒，簡(jiǎn)稱(chēng)乙腦病毒。�ァ　∥覈�有關(guān)馬的乙型腦炎病例及其發(fā)病流行情況，開(kāi)始報道于1942年。

�ァ　�1.形態(tài)特征�ァ　∫夷X病毒是黃病毒科中最小的病毒之一。病毒粒子的直徑為30nm左 右,但 病毒結構與其它黃病毒相似。電子顯微鏡觀(guān)察可見(jiàn)核心、囊膜和囊膜突起等構造(見(jiàn)圖22��1 )。在CsCl中的浮密度為1��24～1��25g/cm��。�オおおぬ峒兊哪夷ね黄鹁哂醒�凝活性，而且只含糖 蛋白。在用蛋白酶 處理后，囊膜突起喪失，血凝活性也消失。最近還發(fā)現乙腦病毒的血凝素也有輕重兩種。

�ァ　�2.抗原性�ァ　∫夷X病毒在抗原性上與墨累山谷腦炎病毒(Murray Valley encephaliti s viru s)、西尼羅病毒(West Nile virus)和圣路易腦炎病毒(St. Louis encephalitis virus)比 較接近。在血凝抑制試驗中　，這4種病毒似乎在黃病毒中構成一個(gè)亞群。乙腦病毒引起 的免疫力，也對西尼羅病毒等呈現一定程度的中和作用以及保護作用�！—ァ　∫夷X病毒的各個(gè)毒株，雖然常在毒力和血凝特性上具有比較明顯的差別，但是看來(lái) 并沒(méi)有明顯的抗原性差異。人們一直關(guān)心乙腦病毒是否存在毒型的問(wèn)題，這是理所當然的， 因為這是乙腦流行病學(xué)及其防制工作上的一個(gè)重要依據。疫苗生產(chǎn)中多年來(lái)采用的 一個(gè)病毒株即“中山株”，這是1935年由日本三田村等人自患者腦組織分離獲得的。但 在1958年，又從蚊體內分離到1株與中山株不盡相同的新毒株。 應用中和抗體吸收試驗 或交叉保護試驗都可看出兩者的區別，命名為JaGArol株。 在用中山株疫苗接種的兒童 血清內，其對中山株病毒的抗體效價(jià)明顯高于其對JaGArol株病毒的抗體效價(jià)， 但在應 用這兩個(gè)病毒株制備的抗原分別測定自然發(fā)病者的血清時(shí)，卻呈現同樣的抗體效價(jià)。這 表明，中山株與JaGArol株病毒的抗原性及其與抗體的結合力沒(méi)有差異， 但在抗原成 分的組成或構造上有所不同。�ァ　�Kobaynshi等利用單克隆抗體， 采用血凝抑制試驗分析了11個(gè)日本乙型腦 炎的病毒株的抗原關(guān)系。�ァ　∫呀�(jīng)證明，乙腦病毒的血凝素的主要成分是多肽，而其補體結合抗原成分則是一種 核蛋白，由一個(gè)長(cháng)鏈和一個(gè)短鏈構成。�ァ　�應用蔗糖密度梯度離心法將病毒材料高度精制以后，再用吐溫��80和乙醚處理， 并 用刀豆素A吸附沉淀，沉淀物再用α�布谆�甘露糖甙析出，即可獲得比較純凈的血凝素抗 原，上清液則為補體結合抗原。分別再經(jīng)氯化銫密度梯度離心法進(jìn)一步精制后，給小鼠 作免疫注射試驗。發(fā)現血凝素抗原引起中和抗體和血凝抑制抗體，對小鼠呈現預防 感染作用；補體結合抗原則只引起補體結合性抗體，沒(méi)有預防感染的作用。�ァ　≈旒银櫟劝l(fā)現乙腦病毒具有溶解鴿和家兔紅細胞的性能，這種性能可被特 異性免疫血清抑制。使紅細胞在pH6.4的溶液中吸附病毒，然后在偏酸或偏堿條件下于3 7℃放置4～6小時(shí)，即可出現明顯的溶血現象。7株對小白鼠具有較高致死力的乙腦病毒 都有較高的血凝效價(jià)，對其中5株進(jìn)行了溶血性測定，也都有明顯的溶血特性。 強毒株 在連續通過(guò)倉鼠腎細胞后毒力下降，血凝效價(jià)和溶血性能也同時(shí)降低，因此該氏等認為 溶血性和血凝性可能都是強毒株的共性。�ァ　∫夷X病毒的抗原性較強，自然或人工感染的動(dòng)物一般都能產(chǎn)生較高效價(jià)的中和抗體、 血凝抑制抗體、沉淀抗體和補體結合抗體。��

　　3、培養�ァ　∫夷X病毒易在7～9日齡的雞胚內適應和增殖。病毒效價(jià)在接種后48小時(shí) 左右達 最高峰，以胚體內的病毒含量最高，可達　10��6～10��7個(gè)小白鼠MLD。雞胚 大都死亡。�ァ　∫夷X病毒可在多種組織培養細胞內增殖，例如雞胚成纖維細胞、鼠胚的肌和腎細胞、 牛胚腎細胞、人胚的肺和腎細胞、人羊膜細胞、豬腎細胞、倉鼠腎細胞以及BHK��21、PK ��15、HeLa、Vero等繼代細胞和傳代細胞。但通常只在倉鼠腎原代細胞、 豬腎和羊胎腎 細胞上恒定地引起明顯的病變，并可在瓊脂覆蓋下的雞胚成纖維單層內產(chǎn)生清晰的蝕斑。乙 腦病毒也可在蚊的組織培養細胞內增殖，并產(chǎn)生較高效價(jià)的病毒，但是一般不引起細 胞病變，雖在瓊脂覆蓋下經(jīng)�？膳_產(chǎn)生蝕斑�！　”仨氈赋�，乙腦病毒在細胞培養物中 的致細胞病變不僅決定于細胞的種類(lèi)，而且也決定于毒株和具體的培養條件，例如郭輝 玉用11株乙腦強毒進(jìn)行細胞培養研究，發(fā)現其在雞胚肌皮組織成纖維細胞、腿 肌及心肌成纖維細胞內引起明顯的細胞破壞，但卻不能使雞胚肺、肝、脾或腎的上皮細 胞發(fā)生可見(jiàn)病變。乙腦病毒還可引起鴨胚肌皮成纖維細胞和豬腎上皮細胞的明顯破壞， 但人胚肌皮成纖維細胞、人胚腎細胞及猴腎上皮細胞只被個(gè)別毒株引起輕微的細胞病 變。鼠胚細胞、山羊膜細胞、HeLa細胞、Detroit��6細胞、F�睱細胞等則即使接種大量病 毒也不出現細胞病變。乳鼠極易感，腦內接種經(jīng)約72小時(shí)即發(fā)生腦炎而死亡，其它途徑也 易感，但潛伏期延長(cháng)。