青錢(qián)柳愈傷組織培養條件研究的優(yōu)化三
錄入時(shí)間:2009-7-7 8:58:16
來(lái)源:青島海博
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0.1 %的升汞溶液是目前我國常用的滅菌消毒劑,不同的外植體用升汞溶液消毒的時(shí)間不同,消毒時(shí)間過(guò)長(cháng)會(huì )損傷外植體細胞,使材料出現褐色壞死,消毒時(shí)間過(guò)短又不能消毒徹底。從試驗結果看,用青錢(qián)柳葉片做外植體,0.1 %升汞溶液的消毒時(shí)間應掌握在3 一4 min 內,用莖段做外植體,消毒時(shí)間應掌握在14 min 左右,此時(shí)的污染率較低,愈傷組織誘導率較高。
以不同時(shí)期的外植體做試驗材料,發(fā)現以5 月份采集的當年生的莖段做青錢(qián)柳組織培養的外植體最適合,愈傷組織誘導率高,且褐化現象較輕。而以葉片做外植體,愈傷組織誘導率很低,可能此時(shí)的葉片已經(jīng)不再幼嫩,或葉片中次生代謝含量產(chǎn)物最高,褐化現象普遍發(fā)生,以致于抑制了愈傷組織的形成。
通過(guò)向MS 培養基和改良MS 培養基中添加不同濃度的6-BA 和NAA ,以尋找青錢(qián)柳最適宜的基本培養基,發(fā)現MS 和改良MS 均可誘導出青錢(qián)柳莖段的愈傷組織,但改良MS 培養基愈傷組織誘導率更高,且褐化現象較輕,更適合青錢(qián)柳莖段愈傷組織的培養。
本試驗雖然成功的找到了適合青錢(qián)柳愈傷組織培養的培養條件,但在培養過(guò)程中褐化現象發(fā)生仍舊普遍。因此,進(jìn)一步探索褐化現象發(fā)生的原因、采取相應的措施減少褐化現象、提高愈傷組織的誘導率是今后一個(gè)主要的工作方向。
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