犬冠狀病毒(Canine coronavirus) 犬冠狀病毒引起犬的胃腸炎,1971年首次在美國發(fā)生腹瀉軍犬的糞便中電鏡檢出病毒 。犬冠狀病毒性腹瀉原為比較緩和的疾病,病犬大多能夠康復,但因經(jīng)常與犬細小病毒等發(fā) 生混合感染,而引起嚴重乃至致死性轉歸的疾病。近年來(lái)世界上許多國家和地區都有本病流行的報告,我國亦已多次發(fā)現本病暴發(fā)。
1.形態(tài)特征犬冠狀病毒具有冠狀病毒的一般形態(tài)特征。呈圓形或橢園形,長(cháng)徑80~120nm,寬 徑為75~80nm。有囊膜,囊膜表面有花瓣狀纖突,長(cháng)約20nm。核衣殼呈螺旋狀。
2.理化學(xué)特性病毒內含單鏈RNA,在氯化銫中的浮密度為115~116g/cm3。對乙醚和氯仿 敏感。對酸有較大抵抗力,且常隨毒株而不同。
3.抗原性犬冠狀病毒在血清學(xué)上與豬傳染性胃腸炎病毒具有比較密切的關(guān)系,雖然犬冠 狀病毒不感染豬,但豬傳染性胃腸炎病毒卻可使犬發(fā)生亞臨床感染。犬冠狀病毒與貓傳染 性腹膜炎病毒和人冠狀病毒229E株亦具有相關(guān)抗原,它們共同構成1個(gè)抗原群,但犬冠狀病 毒本身似乎只有1個(gè)血清型。此外,近年來(lái)在水貂及飼養貉和狐中常有冠狀病毒性腹瀉發(fā)生 ,癥狀與犬冠狀病毒性腸炎相似,但它們之間在抗原性上是否相關(guān),尚不清楚。
4.培養犬冠狀病毒可在犬的多種原代和傳代細胞上增殖并產(chǎn)生細胞病變,包括原代腎和 胸腺細胞以及A72、CRFK和FCWF等傳代細胞,據介紹,FCWF細胞對犬冠狀病毒非常敏感。 但由病料初代分離病毒相當困難。病毒分離用材料必 須新鮮,最好是先將病料實(shí)驗感染健康幼犬,待其典型發(fā)病時(shí)采取腹瀉糞便標本,經(jīng)抗菌等 處理后,立即接種細胞。反復凍融的病料常常不能產(chǎn)生陽(yáng)性病毒分離結果。當細胞培養物出 現細胞病變時(shí),即可應用以特異高免血清制備的熒光抗體進(jìn)行鑒定,也可直接將細胞培養物 作電鏡和免疫電鏡檢查。也可試用瀕死期幼犬腎臟直接進(jìn)行細胞培養以分離病毒,據云可獲 較高的陽(yáng)性分離率。但用犬源原代或繼代細胞分離病毒時(shí),應注意其自身帶毒問(wèn)題。病毒在 細胞漿內復制,由內質(zhì)網(wǎng)和胞漿空泡膜上出芽成熟。
5.病原性各種品種和年齡的犬都易感,但幼犬癥狀較重。潛伏期1~3天,常迅速蔓延全群 。病犬精神萎頓,厭食,嘔吐,隨后排稀軟帶粘液的糊狀糞便,灰白色或黃白色,常有惡臭 , 有時(shí)呈水樣,橙色至綠色,含有血液。病犬迅速脫水,消瘦,但體溫常不明顯升高。多數病 例在7~10天內康復,但某些幼犬可能呈嚴重癥狀,并因發(fā)熱、脫水和衰竭而死。人工感染 未吃初乳的新生幼犬易于引起疾病,幼犬常在喂飼含病毒材料后1~3天死于出血性胃腸炎。 最近發(fā)現自然分娩的新生仔犬在出生后1~2天突然死亡,死后剖檢見(jiàn)胃腸炎,電鏡檢查糞 便和腸內容物見(jiàn)有大量典型的冠狀病毒。甚至在產(chǎn)出的死胎的胎糞中亦發(fā)現有冠狀病毒 ,從而證明犬冠狀病毒垂直感染的可能性。發(fā)病初期白細胞數減少。水和電解質(zhì)代謝紊亂。病變?yōu)檩p重不同的胃腸炎。尸體嚴重脫水,腸壁菲薄,腸管擴張,內含黃白色至黃綠色液體 ,有時(shí)還有氣體和血液。腸粘膜充血和出血,腸系膜淋巴結腫大。病理組織學(xué)檢查可見(jiàn)小腸 絨毛萎縮變短,隱窩深陷,粘膜固有層的細胞成分增多,上皮細胞變平以至呈短柱形。混合感染,特別是與犬細小病毒發(fā)生混合感染時(shí),癥狀與病變嚴重,死亡率顯著(zhù)增高。
6.診斷實(shí)驗室診斷方法中以電鏡和免疫電鏡檢查最為快速和準確,由于 犬糞便中的病毒粒子極多,且具特征性的形態(tài)結構,?稍1小時(shí)內確定結果。應用ELISA雙抗體夾心法可成功地檢出糞便樣品中的冠狀病毒抗原。酶標抗體的 制備方法是:用PEG沉淀和蔗糖密度梯度超速離心法由腹瀉糞便中提取冠狀病毒。將此病毒 制品注射豚鼠,制備抗血清,提取IgG并以過(guò)氧化物酶標記。本法具有較好的特異性 和敏感性,檢測結果堪與電鏡相比。對于幼犬,血清學(xué)檢查抗體的價(jià)值不大,因其可能是母源抗體,也可能是其它相關(guān)病毒引起 的 非特異性抗體,但是急性期和恢復期的雙份血清抗體檢測,則具有一定的回顧性診斷意義。 犬 冠狀病毒引起的中和抗體效價(jià)較低,檢測時(shí)可用低劑量病毒(30~50TCID50)在A(yíng)72細 胞上進(jìn)行微量實(shí)驗。應當注意,國內外均發(fā)現健康犬帶毒和排毒現象,外表健康犬糞便中的病毒電鏡陽(yáng)性檢出率 高達20%以上,血清學(xué)檢測亦有類(lèi)似的陽(yáng)性檢出率。因此,犬冠狀病毒可能普遍存在于犬體 ,只在機體因疲勞、營(yíng)養缺乏或因寄生蟲(chóng)病和其它疾病衰弱時(shí),才致病而呈現臨床癥狀 ,同時(shí)大量散毒而引起嚴重流行
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