豬流行性腹瀉病毒

豬流行性腹瀉病毒��(Porcine epidemic diarrhae virus) 豬流行性腹瀉是1種豬腸道傳染性病毒病，本病以水樣腹瀉，嘔吐和脫水為特征。�ケ静∮�1976～1977年首先發(fā)現于比利時(shí)和英國的一些種豬場(chǎng)，在各種年齡的豬群中暴發(fā)了急 性腹瀉。經(jīng)查明其病原是1種不同于傳染性胃腸炎病毒的類(lèi)冠狀病毒(Coronavirus�瞝ike,C VL)，在形態(tài)上很難與其它冠狀病毒相區別。此后，本病在歐洲 很多國家均有報道(比利時(shí)、英國、德國、捷克、匈牙利等)。我國近年來(lái)發(fā)生的所謂豬傳染 性胃腸炎，經(jīng)上海畜牧獸醫研究所和長(cháng)春農牧大學(xué)等單位的研究證實(shí)，有很多即為本病。 ��

1.形態(tài)結構�ヘi流行性腹瀉病毒具有與冠狀病毒科冠狀病毒屬其它成員同樣的形態(tài)特征。在糞便病料中所 見(jiàn)的病毒粒子 是多形態(tài)的，大致呈球形。其平均直徑(包括纖突)約130nm，范圍為95～190nm。外有囊 膜，其上有花瓣狀纖突。以電鏡檢查被感染的腸上皮細胞，在內質(zhì)網(wǎng)池或胞漿空泡中可檢出 病毒粒子，但在形態(tài)上無(wú)法與豬傳染性胃腸炎病毒相區別。

��2.理化學(xué)特性�ズ�有RNA，蛋白質(zhì)。�ゲ《镜牡挚沽Σ粡�，對乙醚、氯仿等敏感，一般消毒藥都可將其殺滅。��

3.抗原性�ソ�(jīng)免疫熒光和免疫電鏡試驗證明，本病毒與IBV、豬血凝性腦脊髓炎病毒、新生犢牛腹瀉病 毒、犬冠狀病毒、貓傳染性腹膜炎病毒沒(méi)有抗原關(guān)系。與TGEV進(jìn)行交叉中和試驗，豬體 交叉保護試驗、ELISA試驗等，都證明二者在抗原性上不同，無(wú)共同抗原。��

 

4.培養�ツ壳百Y料表明，本病毒人工細胞培養很難獲得成功。如不作特殊處理，只能在豬 腸上皮細胞培養物內生長(cháng)。長(cháng) 春農牧大學(xué)1982年以吉林分離的毒株在胎豬腸組織原代單層細胞培養物中分離PEDV獲得成功 ，并可適應猴腎傳代細胞培養，在此基礎上又建立了抗PEDV單克隆抗體雜交瘤細胞株。這在 國內外尚屬首次。據報道，在無(wú)血清營(yíng)養液中加入10μg/ml胰蛋白酶，可使本病毒適應傳代 細胞如CV��1、Vero細胞等。��

5.病原性�ジ鞣N年齡的豬都能感染發(fā)病，哺乳仔豬、架子豬或育肥豬的發(fā)病率可達100%， 尤其哺乳仔豬受害最嚴重，母豬發(fā)病率為15%～90%。主要發(fā)生在冬季，夏季也可發(fā)生。我國 以12月～2月為本病高發(fā)季節。�ヘi流行性腹瀉病毒口服人工感染的潛伏期為1～2天，但自然發(fā)病的潛伏期可能較長(cháng)。主要經(jīng) 消化道傳播，亦有經(jīng)呼吸道傳播的報道。哺乳仔豬受害最 嚴重，出現嘔吐和水樣腹瀉。新生仔豬感染后常發(fā)生嚴重失水和死亡，病死率平均為50 %。斷奶豬和育肥豬出現持續4～6天的水樣腹瀉，大多數病豬康復，但生長(cháng)發(fā)育受影響 ，育肥后 期的體重出現減損。母豬發(fā)病以精神萎頓、厭食和持續約1周的下痢為特點(diǎn)。本病在4～5周 期間可傳遍整個(gè)農場(chǎng)，但其傳播常有自限性。�ゲ±碜兓瘍H限于小腸。腸管脹滿(mǎn)擴張，充滿(mǎn)黃色液體，腸壁變薄，腸系膜充血，腸 系膜淋巴結水腫。顯微鏡觀(guān)察可見(jiàn)小腸絨毛縮短，絨毛與腸腺的比率從正常的7：1下降到 約3：1。��

6.診斷�ケ静〉牧餍刑攸c(diǎn)、臨床癥狀和病理變化均與豬傳染性胃腸炎十分相似，只是病死 率比 豬傳染性胃腸炎稍低，在豬群中傳播速度相對較為緩慢，且不同年齡的豬均易感染發(fā)病。但 這些差別只是程度上有所不同，很難根據上述表現確定診斷。本病的確診主要依靠實(shí)驗室檢 查。��

(1)病原分離和鑒定：仔豬人工感染試驗是較常用的方法。最好選用2～3日齡 不喂初乳的仔豬，喂以消毒牛乳。將患病豬小腸組織及腸內容物做成懸液，加入青霉素 和鏈霉素各2 000U或mg/ml，在室溫放置1小時(shí)，經(jīng)口服接種仔豬。如試驗仔豬發(fā)病，取其小 腸組織作直接免疫熒光染色檢查。��

(2)免疫熒光染色檢查：試驗研究證明，用直接免疫熒光技術(shù)檢查病料中的豬流行性腹瀉抗 原 是可靠的特異性診斷方法，應用最為廣泛。取病豬小腸作冰凍切片或小腸粘膜抹片，風(fēng)干后 丙酮固定，加熒光抗體染色，充分水洗，封蓋鏡檢，1～2小時(shí)即可得出結果。根據對人工感 染 豬的試驗觀(guān)察，個(gè)別豬于感染后12小時(shí)即可由空腸檢出少數熒光細胞；至18小時(shí)在小腸各段 可發(fā)現大量的熒光細胞，有的豬達30%～50%；出現腹瀉后6小時(shí)，熒光細胞的數量達到 高峰， 空腸和回腸占90%～100%，十二指腸占70%～80%；至12～15小時(shí)，熒光細胞數顯著(zhù)減 少；但是到了后期(至96小時(shí))，熒光細胞數再次增多。為了與豬傳染性胃腸炎鑒別，最好同 時(shí)用豬傳染性胃腸炎熒光抗體染色檢查。��

(3)免疫電鏡檢查：可用已知的高免血清確定未知的病毒，也可用已知的豬流行性腹瀉病毒 診斷 豬恢復期的血清。取經(jīng)濾過(guò)的腸內容物，加等量經(jīng)過(guò)稀釋的高免血清，混合后在37℃感作 30分鐘，再移至4℃感作18小時(shí)，然后將標本在4℃以31 000g離心60分鐘，沉淀物以 少量蒸餾水懸浮后鋪在銅網(wǎng)上，用2%磷鎢酸負染后作電鏡觀(guān)察，如可疑病料中含有豬流行 性腹瀉病毒粒子，由于抗原和抗體的特異性結合，病毒粒子呈晶格狀排列，并可見(jiàn)到毒粒 間的抗體橋。