南姜組培快繁技術(shù)研究二

2.4 不同外植體的分生芽的誘導效果將南姜幼株的幼芽、嫩葉、幼根等不同部位作為外植體分別接種到MS + 3mg / L6-BA ＋0.5mg / L NAA 誘導分生芽培養基上，經(jīng)過(guò)30d 的培養，結果見(jiàn)表3 �？梢钥闯隼�用葉芽切片誘導分生芽具有很好的效果，每個(gè)葉芽片均能長(cháng)出2 一3 個(gè)幼芽。而利用嫩葉和幼根作為外植體時(shí)，難以誘導出分生芽。應當選擇幼芽作為誘導分生芽外植體。
2.5 不同激素配比對南姜誘導芽分化效果分生芽的誘導同外源激素的添加有著(zhù)很重要的關(guān)系明。將南姜莖尖幼芽切片接種于含有不同激素組合的MS 培養基中，經(jīng)過(guò)25d 的培養，觀(guān)察結果見(jiàn)表4 。表4 試驗結果顯示，采用的幾組激素配比的培養基均能誘導幼芽切片長(cháng)出幼芽，并且幼芽的長(cháng)勢良好，活力較強。其中0.5mg/L NAA + 3 mg / L6-BA誘導分生芽萌發(fā)的效果最好，其誘導率高達83.3 %，有助于南姜組培快繁。
2.6 不同激素誘導生根效果
將已長(cháng)出分生芽的組織接種到含有不同激素的1 / 2 MS 培養基中，經(jīng)過(guò)30d 的培養，觀(guān)察到的生根效果見(jiàn)表5 。在試驗采用的幾組培養基中南姜幼芽均能生根。在無(wú)激素刺激的情況下，生根較慢，長(cháng)出的根短細，植株長(cháng)勢差，有褪綠、白化、干枯的趨勢。0.1mg／L NAA + 0.05 mg/L 6-BA 下，根系生長(cháng)快，根粗壯、發(fā)達，側生根生長(cháng)密集，植株葉色濃綠，長(cháng)勢良好0.5mg / L NAA + 1mg/L IBA處理下，根較細短，側生根相對稀疏，植株整體長(cháng)勢一般。從誘導的根數及植株的生長(cháng)情況看，選擇0.1 mg/L NAA + 0.05 mg/L6-BA 的1 / 2MS 培養基來(lái)作為生根培養基，具有較好的效果。

2.7 試管苗的移栽
移栽是組培快繁過(guò)程中最后一個(gè)環(huán)節，也是一個(gè)非常關(guān)鍵的環(huán)節。試管苗在試管中無(wú)論生長(cháng)多好，移栽若不成功的話(huà)，也會(huì )導致試驗前功盡棄。當試管苗具4 一5 片葉子，7 一8 條根時(shí)，即可移栽。移栽前，先將培養瓶移出培養室，置于通風(fēng)明亮的常溫環(huán)境下練苗3 一4d ，期間每天打開(kāi)瓶蓋2 一3h 。接著(zhù)從瓶中取出試管苗，用清水洗凈粘附于根系上的瓊脂。移栽于滅菌的陶土基質(zhì)中，淋足定根水，再用已打孔透氣的薄膜覆蓋其上，每日淋水，以保證基質(zhì)的潮濕。1 星期后可打開(kāi)薄膜，繼續養護2 一3 星期后便可成活。
3 結論與討論
采用南姜的根狀塊莖作為外植體，由于該材料生長(cháng)于地下，帶菌量多，并且在其組織內部可能含有某些內生菌，在消毒過(guò)程中消毒劑較難穿透到組織內部困，使消毒效果不明顯，材料污染率高。從試驗消毒效果看，南姜的外植體宜選用75 ％乙醇處理30s十0.1 % HgCl2處理10 一15 min ，這樣的不同消毒劑的搭配使用既可以最大幅度地降低污染率（可降低至12 % ) ，同時(shí)又能減少消毒劑對外植體的毒害作用（成活率可達64 % ）口外植體的選擇應選用南姜塊莖的幼芽作為接種的外植體較為理想，每個(gè)幼芽片均能長(cháng)出2 一3 個(gè)幼芽。而利用嫩葉和幼根作為外植體時(shí)，難以誘導出分生芽和愈傷組織。這可能與剛萌動(dòng)的幼芽組織中的芽原基活力較強，細胞分化程度較低，細胞分裂旺盛有著(zhù)一定的關(guān)系川。已有的姜科植物組織培養研究報道中也多采用黃姜或者生姜的莖段、莖尖或者芽尖作為接種外植體直接誘導芽增殖途徑進(jìn)行繁殖。此外研究發(fā)現莖段、葉片作為外植體消毒效果不理想，存在著(zhù)易污染的問(wèn)題。南姜的芽誘導培養試驗中，在0.5mg/L NAA 條件下，添加不同濃度的6-BA ，芽的萌發(fā)率有一定的差別。當添加6-BA 濃度為3 mg/L 時(shí)，新芽的誘導率達83.3 % ，幼芽增殖2 ~3 倍。幼芽較多，且粗壯。該激素配比有利于新芽的分化和幼芽增殖。
另外研究發(fā)現南姜組培苗生根比較容易，即使在無(wú)激素環(huán)境下也能夠長(cháng)出根，但效果較差。NAA 和IBA 搭配使用時(shí)根較細短，側根生長(cháng)稀疏。NAA 與6-BA 搭配使用時(shí)，生根率達100 % ，平均生根數12 ~15 條，根粗壯、發(fā)達，側根生長(cháng)密集，植株葉色濃綠，長(cháng)勢良好。

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