南姜組培快繁技術(shù)研究一
錄入時(shí)間:2009-7-6 15:17:08
來(lái)源：青島海博
摘要：對具有藥用與調味價(jià)值的植物南姜進(jìn)行了組培快繁技術(shù)的研究。結果表明：南姜塊莖的幼芽是理想的外植體；消毒方式選用75 ％乙醇30s + 0.1 % HgCl2處理10~15 min ，污染率可降低至12 % ，成活率可達64 % ; MS + 3 mg/L 6-BA 十0.5 mg/L NAA 激素配比有利于誘導芽分化及腋芽的萌發(fā)，其誘導率可達83.3 % ；生根培養基采用1 / 2 MS ＋0.1mg／L NAA + 0.05mg / L 6-BA ，其生根率達100 % ，平均生根數12 一15 條。
關(guān)鍵詞：南姜；組織培養；快繁
南姜也稱(chēng)紅豆蔻、大高良姜，為姜科多年生草本植物。在亞洲熱帶地區廣布，廣東、臺灣、廣西、湖南和云南等省區也有分布。其果實(shí)與根莖可供藥用，自中世紀以來(lái)，南姜就用作藥材與辛香調料使用，如今，中國依然是食用南姜的主要國家之一以。近年研究發(fā)現其根莖中含有多種芳香油、類(lèi)黃酮、礦物質(zhì)、酪類(lèi)等物質(zhì)川，對肌膚具有振奮、活化與抗自由基等多重特性，因此南姜也具有美容效果的巨大商業(yè)價(jià)值。
目前，南姜只是作為一些中藥配伍以及地方風(fēng)味小吃的調味品，我國對它的研究與開(kāi)發(fā)相對滯后，它的價(jià)值還未得到開(kāi)發(fā)與應用。南姜種植范圍小，品種質(zhì)量良落不齊，這嚴重制約著(zhù)南姜的生產(chǎn)與推廣。為了提高南姜的利用價(jià)值，就必須加強南姜優(yōu)良種質(zhì)的培育研究，同時(shí)也能順應綠色食品工程和中藥事業(yè)的發(fā)展。組培快繁技術(shù)是培育優(yōu)良種質(zhì)資源和提供大量?jì)?yōu)質(zhì)種苗的有利手段，因此，南姜組培快繁技術(shù)的研究勢在必行。
1 材料與方法
1.1 材料
將供試南姜根狀塊莖沖洗干凈后，覆蓋于洗凈的河沙中，置于（25 士3 )℃ 通風(fēng)處催芽培養。生長(cháng)成幼株后，分別取其幼芽、嫩葉、莖、根等作為組織培養的外植體。將獲取的材料置于低濃度的肥皂水中浸飽約30 min ，清水沖洗干凈，晾干。放人已滅菌的三角瓶中，分別采用不同濃度的次氯酸鈉、HgCl2、乙醇單獨或相配合的消毒方法處理。
1.2 培養基
選用MS 基本培養基，在培養的不同階段分別添加不同種類(lèi)的植物激素，在蔗糖30g/L 、7 g/L 的瓊脂中固化，pH 5.8 ，經(jīng)配制分裝后于121 ℃ （1.1 kg /CM2）條件下滅菌20 min ，備用。
1.3 方法
1.3.1 不同部位外植體的誘導效果分別取南姜幼株上的剛萌動(dòng)的幼芽、嫩葉、莖、幼根等作為組織培養的外植體，分別接種在愈傷組織誘導培養基和芽增殖培養基上，觀(guān)察不同部位外植體的誘導效果。1.3.2 愈傷組織的誘導將經(jīng)過(guò)消毒后的外植體接種在已滅菌好的誘導愈傷組織培養基上。培養基中的激素成分配比為：0.05 mg / L6-BA + 1 、3 、5 、8 mg/L 2 , 4 一D , 0.1 mg/L6-BA + 1 、8 Mg/L 2.4 一D , 0.05 mg/L6-BA 十5 mg/L NAA 。
1.3.3 芽增殖的誘導在0.5 mg/L NAA 的培養基上，設定了、l 、3 、5 、8 、10mg / L 5 個(gè)不同6-BA 濃度作為試驗處理，研究了南姜芽增殖的誘導。
1.3.4 對已發(fā)芽的外植體生根誘導外植體誘導出芽后，將其接種到加人不同配比激素的1 / 2 MS 培養基上，觀(guān)察其對根誘導的結果。
2 結果與分析
2.1 南姜無(wú)菌系建立的選擇
南姜生長(cháng)于地下，根狀塊莖作為外植體攜帶有大量微生物，建立組織培養的無(wú)菌體系有一定的難度。如何成功的對生長(cháng)地下的植物外植體進(jìn)行消毒處理，是建立無(wú)菌培養的前提田。該試驗從外植體的消毒處理人手，研究了不同消毒方式對外植體生長(cháng)情況的影響。表1 的研究結果顯示，單獨使用過(guò)高濃度的HgCl2及長(cháng)時(shí)間的HgCl2處理雖然殺菌效果好，但是對植物體的損傷也較大，從而降低了外植體的成活率。使用NaClO 作為消毒劑則容易使外植體產(chǎn)生褐變，且殺菌效果也較差。所以，對于南姜的外植體的消毒處理，應選擇75 ％乙醇短時(shí)間處理，再使用較低濃度的HgCl2 ( 0.1 % ）處理10 一15min ，這樣的處理方式可以最大限度的降低污染率，減少對外植體的損傷，提高其成活率。此外，消毒過(guò)程中滴加適量的吐溫作為表面活性劑，并不斷的振蕩搖晃，可增加消毒效果。
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