國內外牡丹組織培養技術(shù)研究現狀三
錄入時(shí)間:2009-7-2 15:41:13
來(lái)源：青島海博
2.25 牡丹組培過(guò)程中產(chǎn)生玻璃化現象的研究
1992 年河南師范大學(xué)的儲成才、李大衛首次報道了組培中產(chǎn)生玻璃化現象，并對其產(chǎn)生原因做了初步觀(guān)察。實(shí)驗中發(fā)現：NAA 、6 一BA 等單獨或相互作用均不會(huì )誘導牡丹玻璃苗的產(chǎn)生；溫度的高低與牡丹玻璃苗的產(chǎn)生有很大的相關(guān)性，在26 ℃ 以下沒(méi)有玻璃苗的產(chǎn)生，在26 一30 ℃ 卻有63 ％的牡丹苗發(fā)生玻璃化現象，隨溫度的升高，玻璃化產(chǎn)生的頻率也升高。
2.2.6 牡丹組培過(guò)程中防止褐化的研究
褐化問(wèn)題是牡丹組培過(guò)程中的重要瓶頸之一。北京林業(yè)大學(xué)李萍等人研究了活性炭、硝酸銀、PVPP 和VC4 種防揭劑對牡丹品種‘烏龍捧盛’組培中褐化控制的作用及對組培苗生長(cháng)和增殖的影響。結果表明：褐化集中發(fā)生在轉接后4d 內�；钚蕴磕苡行Э刂坪只�，但長(cháng)時(shí)間處理會(huì )抑制組培苗的生長(cháng)和增殖；繼代培養初期在含活性炭2.0g/L的培養基中進(jìn)行4d 短期處理，不僅能有效控制褐化，還在一定程度上促進(jìn)了組培苗的生長(cháng)和增殖。硝酸銀1.0 一8.0mg/L能明顯減輕褐化，其中10mg/L的效果最好并能顯著(zhù)促進(jìn)增殖；8.0mg/L時(shí)組培苗生長(cháng)量最大。PvPP能部分控制褐化，1.0g/L效果較好；低濃度的PVPP 促進(jìn)組培苗生長(cháng)，高濃度時(shí)促進(jìn)增殖。VC 控制褐化的效果不佳，且易導致組培苗玻璃化。綜合分析認為：牡丹品種‘烏龍捧盛’繼代轉接時(shí)，先在添加活性炭2.0g/L的培養基中培養4d ，然后轉人不含活性炭的培養基中，能有效控制褐化和避免活性炭對生長(cháng)和增殖的負面影響；在培養基中加人硝酸銀2.0 mg/L,能在有效控制褐化的同時(shí)，促進(jìn)組培苗生長(cháng)與增殖，推薦在牡丹組培中應用。
3 國外組培技術(shù)研究進(jìn)展
3.1 禽傷組織培養
在國外最早的有關(guān)牡丹組培方面的報道partanen及Demoise 和Partanen ( 1969 ）關(guān)于愈傷組織的培養，他們通過(guò)從牡丹種子剝離的合子胚誘導出愈傷組織。cildow 和MiteheU 用牡丹白化莖為外植體進(jìn)行組織培養，比較了2SH 和SH 一M 兩種培養基的效果，發(fā)現含有還原態(tài)氮和氧化態(tài)氮的SH 一M 培養基更利于愈傷組織的快速生長(cháng)。
3.2 有關(guān)胚培養的研究
為了改變牡丹種子休眠的習性．國外學(xué)者進(jìn)行了胚培養的研究。據Gildow 和Mitchell 用牡丹白化莖為外植體進(jìn)行組織培養，比較了ZSH 和SH 一M 兩種培養基的效果，發(fā)現含有還原態(tài)氮和氧化態(tài)氮的SH 一M 培養基更利于愈傷組織的快速生長(cháng)。Wang and van Staden 報道，2 , 4 - D 能促進(jìn)‘鳳丹白’種胚的子葉兩端形成愈傷組織。陳怡平等以紫斑牡丹土芽、葉柄、葉片、心皮和雄蕊為材料進(jìn)行愈傷組織培養，發(fā)現愈傷組織誘導中，NAA 的作用大于BA 的作用洲AA 濃度稍高于BA 濃度比較理想；土芽和頂芽的誘導率最高，適合作外植體。牡丹組培中，誘導產(chǎn)生愈傷組織比較容易，而由愈傷組織分化不定芽卻比較困難，不定芽分化率一般比較低和Mey報道，胚的離體培養可以將萌發(fā)時(shí)間縮至84 一98d 。Brukbin 和Batygina ( l994 ）用處于不同生長(cháng)時(shí)期的P.anomala 種胚為外植體進(jìn)行胚培養，發(fā)現只有選球狀胚階段之后的胚狀體培養才能增殖，取自成熟種子的胚在無(wú)激素的MS 和112MS 培養基上均能形成正常的小植株。Julie , Buchheim 等（1994 ）研究GA 3 , ABA , BA對上胚軸的影響，結果表明：GA3 促進(jìn)上胚軸的生長(cháng)，ABA 和各種濃度的GA3 配合使用均抑制上胚軸的生長(cháng)；GA3 和BA 交互作用利于芽的生長(cháng)；高濃度的GA3 和BA 能生成大量正常的葉片。此外，GA3 能打破上胚軸的休眠，在不含細胞分裂素的培養基上發(fā)生的根細長(cháng)，且有側根。
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