1.2.2 接種與培養
外植體誘導：將上述單節莖段在超凈工作臺上用75 ％乙醇消毒1 面n , 0.1 ％升汞消毒5 min ，無(wú)菌水洗滌6 遍，分別接人（1 ）一（4 ）組培養基。每組15瓶，每瓶1 個(gè)莖段。
繼代增殖培養：將由（2 ）組培養基誘導獲得的無(wú)菌植株切除頂芽、葉片和基部，再分切成單節莖段，接人（5 ）組培養基。每批10~30 瓶，每瓶5 一7 個(gè)莖段。培養條件：溫度29 ℃ ／( 22 士2 ）℃ （晝／夜），光照1 500 lX , 11 h / d 。
1.2.3 觀(guān)察與記錄
腋芽萌發(fā)率二萌發(fā)莖段如接種莖段數x 100 % （不論污染與否，萌發(fā)即計數）。發(fā)根率同法計算，以肉眼可辨（根長(cháng)）1 mm ）為準。苗高只計算30d 后成苗株（高度）2.5 cm ，葉數>3 ）的平均數。根系發(fā)達程度以30d 后，10 株的平均株根數和根鮮重（g ）表示。
愈傷組織團塊的大小，依莖段橫切面以外愈傷組織的平均厚度（mm ）表示。初期僅在個(gè)別皮孔露白，愈傷組織尚未連成一片，記錄為“< 1 mm " ，隨后以目測厚度記錄。
2 結果與討論
2.1 外植體誘導
由表1 可見(jiàn)，在所用誘導外植體的4 種培養基中，只有添加LFS 的（2 ）組能成功地誘導莖段腋芽萌發(fā)和不定根發(fā)生，同時(shí)還能有效地延遲和控制愈傷組織形成，從而直接獲得根、苗齊全的無(wú)菌植株。這和該培養基對普通羅漢果外植體誘導的結果非常相似。但是，被大家廣泛用于普通羅漢果外植體腋芽誘導的（3 ）、（4 ）兩組培養基（可獲得無(wú)根苗）對翅子羅漢果卻截然無(wú)效，都不能使外植體腋芽萌發(fā)（見(jiàn)圖1 ) ，更不能生根。這說(shuō)明翅子羅漢果對外源CTK 的敏感性更為專(zhuān)一，而且這很可能就是我們前兩年工作（未用LFS）屢屢失敗的原因。研究中還試用過(guò)玉米素盯、油菜素內醋BR 及毗效隆CPPU 等，均未成功（未發(fā)表）。然而，( 3 ）、（4 ）兩組培養基使翅子羅漢果莖段形成大量愈傷組織的作用效果與其在普通羅漢果莖段上的效果卻幾乎沒(méi)有差別。這一現象提示我們，在羅漢果屬中，不同種和品種（筆者做過(guò)青皮果、紅毛果等，未發(fā)表）植株的離體莖段在含有BA 或KT （還有zT , cPPu 等）的培養基上培養時(shí)，愈傷組織的大量形成具有普遍性，這可能是由該屬植物自身的生物學(xué)特性所決定的。
2.2 繼代擴繁與移栽
將上述（2 ）組獲得的無(wú)菌苗之單節莖段轉接到( 5 ）組培養基繼代培養，結果25 一30d , 95 ％以上可獲得根、苗齊全的再生植株（圖2 ) ，平均增殖倍數3.7 。按常規移栽，成活率達90 ％以上。
3 小結
翅子羅漢果比普通羅漢果對外源CTK 的敏感性更專(zhuān)一，組培難度也更大。在本研究中，曾試驗過(guò)BA , KT , ZT , BR , CPPU 和LFS 等多種能促進(jìn)植物細胞分裂和分化的CTK ，但是只有LFs 能誘導其單節莖段腋芽萌發(fā)成苗，并通過(guò)繼代培養完成再生植株的快速繁殖。該成果對保護、研究和開(kāi)發(fā)利用這一瀕危珍稀植物種質(zhì)資源具有積極意義。
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