耐鹽蘆筍的組培快繁技術(shù)研究二
錄入時(shí)間:2009-7-2 10:47:58
來(lái)源：青島海博
3.2 繼代培養
由于愈傷組織分化的蘆筍不定芽生長(cháng)迅速，5 周左右平均高可達6.0 cm ，需要進(jìn)行繼代培養，繼代培養時(shí)將蘆筍莖剪成1 一2 cm 長(cháng)的莖段，水平放置到培養基的表面，最初的繼代培養以MS + BA 1.8mg / L + NAA0.2 mg / L 十糖30g/L十瓊脂5.8 mg/L ＋活性炭0.5g/L，既可實(shí)現高增殖率，又能保證分化出的芽粗壯，生長(cháng)較好。培養室溫度保持在25 一30 ℃ ，空氣相對濕度60 % ，光照強度1 800lx ，光照時(shí)間每天12h , 40d 左右便可以繼代一次，每次繼代增殖倍數達6.8 倍。因此從理論上來(lái)講，由一個(gè)蘆筍莖段開(kāi)始培養，培養周期為40d ，年增殖次數為9 次，每周期增殖倍數為6.8 ，那么la 后可獲得蘆筍莖段3.1 x 107個(gè)，這個(gè)繁殖速度大大超過(guò)了蘆筍的有性繁殖速度。
實(shí)踐中發(fā)現，蘆筍經(jīng)過(guò)長(cháng)期的繼代培養，容易產(chǎn)生玻璃化的現象，一般通過(guò)降低培養溫度，延長(cháng)光照時(shí)間，降低激素濃度等方法，可使玻璃化程度緩解，特別是把BA 濃度降為1.6 mg／L , NAA 濃度降為0.lmg / L 時(shí)，既能緩解玻璃化程度，又能保證增殖倍數，課題組曾嘗試通過(guò)變換激素的辦法來(lái)消除玻璃化，如把NAA 換成IBA 及2 , 4 一D ，但未能成功，IBA 與2 , 4 一D 甚至有加重玻璃化的趨勢。根據試驗，在蘆筍的長(cháng)期繼代培養過(guò)程中，最好每隔一定時(shí)間，如2a ，重新構建一次再生體系，以保證蘆筍組培苗的健康增殖。
4 生根培養
4.1 根的誘導
將繼代培養成的小苗，剪切成2 一3 cm 的帶芽莖段，轉人生根培養基中進(jìn)行生根誘導，生根培養基選用1 / 2 入侶為基本培養基，附加不同濃度的激素，通過(guò)試驗評選出較優(yōu)的生根培養基（見(jiàn)表4 ）。
結果表明，經(jīng)過(guò)繼代培養的蘆筍幼苗莖段在1 / 2MS + BA 0.02 + NAA 0.1 的培養基中，培養40d ，生根率可達71.4 ％。另外，在耐鹽蘆筍多倍體誘導試驗中發(fā)現，添加秋水仙堿的培養基中，蘆筍試管苗生根率普遍高，這還有待于進(jìn)一步的試驗證實(shí)。
4.2 練苗及移栽
練苗：經(jīng)過(guò)生根培養的蘆筍，當根長(cháng)達到2 cm 以上，并有少許側根長(cháng)出時(shí)便可進(jìn)行移栽，但為了提高成活率，在移栽前要先進(jìn)行練苗，方法是揀取根系完整，植株健壯的蘆筍組培苗，打開(kāi)培養瓶，讓蘆筍苗暴露在空氣中，并置于全日照下，在上午9 : 00 至下午16 : 00 用50 ％的遮蔭網(wǎng)適當遮蔭，練苗3 一5d 后，將組培苗從瓶中取出，并用大量自來(lái)水沖洗干凈根部附著(zhù)的培養基，然后移植到配好的營(yíng)養土中。
營(yíng)養土的配置：選用腐殖土或草炭土為基質(zhì)，按體積比1: 1 混入細砂，移栽前用1 / 800 的多菌靈溶液消毒。
管護：試管苗移栽后，要進(jìn)行適當遮蔭、保濕。另外由于試管苗的根吸收養分的能力比較弱，因此為了提高試管苗的移栽成活率并促進(jìn)其健壯生長(cháng)，在移栽后當天可結合澆水噴灑一遍1 / 4 的大量元素，以后每10d 噴灑一次，當試管苗根莖部抽生出1 一2 條新莖時(shí)，便可進(jìn)行大田定植。試管苗從開(kāi)瓶練苗到大田定植這一過(guò)程，約需30d ，成活率可達85 ％以上。
5 結論
由于試管苗在接近理想的條件下生長(cháng)分化，已不受季節限制，有人為提供的外源植物激素的促進(jìn)，增殖的速度很快，加之配套有效的育苗移栽技術(shù)，完全可以使蘆筍的年出苗率達到一個(gè)理想的水平，以滿(mǎn)足生產(chǎn)所需。因此，微體快繁技術(shù)的成功有利于迅速增加雜交組合中純合父母本的數量，縮短育種周期；對于耐鹽蘆筍新品系的前期快速繁殖推廣也極有意義。
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