耐鹽蘆筍的組培快繁技術(shù)研究一
錄入時(shí)間:2009-7-2 10:47:15
來(lái)源：青島海博
摘要：東營(yíng)市農業(yè)科學(xué)研究所立足于黃河三角洲實(shí)情，以新萌發(fā)的蘆筍嫩莖為試材，研究不同激素組合對誘導蘆筍莖段愈傷組織的影響、對細胞胚的影響試驗及對細胞胚的優(yōu)化誘導試驗，培育出2 個(gè)耐鹽能力強、產(chǎn)量高、品質(zhì)優(yōu)，適合廣大鹽堿地區種植的耐鹽蘆筍系號，開(kāi)發(fā)前景極好。
關(guān)鍵詞：蘆筍；組織培養；快速繁殖；鹽堿地
蘆筍又名石刁柏，是百合科天門(mén)冬屬植物，其嫩莖是人們喜食的蔬菜，營(yíng)養價(jià)值高，并具防癌、抗癌作用，國際市場(chǎng)暢銷(xiāo)不衰，是高效創(chuàng )匯作物。東營(yíng)市農業(yè)科學(xué)研究所立足于黃河三角洲實(shí)際，培育出2 個(gè)耐鹽能力強、產(chǎn)量高、品質(zhì)優(yōu)，適合廣大鹽堿地區種植的系號，開(kāi)發(fā)前景極好，為了加速其推廣繁殖，并為進(jìn)一步深化育種進(jìn)行技術(shù)儲備，對耐鹽蘆筍的組培快繁技術(shù)進(jìn)行了研究，試驗取得了成功。
1 材料與方法
1.1 試驗材料
3 一5 月份取新萌發(fā)的耐鹽蘆筍嫩莖。
1.2 外植體處理
嫩莖剪回后，先用自來(lái)水沖洗2~3 遍，再取1 一1.5 cm 長(cháng)的莖尖，4 min 之后，用無(wú)菌水漂洗4 一5 次，最后用無(wú)菌濾紙吸干水分。
在超凈工作臺上用75 ％的酒精浸20s，再于0.1 % 的HgCl2 溶液中消毒，消毒后的蘆筍外植體在接種前還須用無(wú)菌剪刀剪去舊切口，創(chuàng )造一個(gè)新切口，以利于脫分化過(guò)程中養分的吸收。
2 脫分化試驗
2.1 培養條件
溫度（27 士2 ）℃ ，光照強度1 800lx ，光照時(shí)間每天12h ，MS培養基十蔗糖（30g/L) ＋活性炭（0.5 mg/L ) + 激素，培養基的滅菌：121℃，0.1 一0.14kP 下17 min 高壓滅菌。
2.2 試驗設計
如表1 ，將處理好的蘆筍外植體接種于表l 所列培養基中，觀(guān)察愈傷組織生長(cháng)情況，接種10d 后，莖段均能輕度膨大，15d 后除Ll 外均能產(chǎn)生少量愈傷組織，25d 后，除L1 外均能產(chǎn)生較多愈傷組織，但L7 、L8的愈傷組織有輕度的水漬狀，也略顯松散，L3 、L4形成的愈傷組織質(zhì)量較好。
3 體細胞胚的誘導及增殖
3.1 體細胞胚的誘導
由于在愈傷組織分化成叢生芽的過(guò)程中，叢生芽的形成不僅取決于激素的濃度，還取決于2 種激素的相對比例，蘆筍愈傷組織體細胞的誘導，以MS 為基本培養基，蔗糖30 mg/L ，活性炭0.5g/L ，取細胞分裂素BA濃度為0.5 、1.0 、1.5 、2.0 mg/L，生長(cháng)素NAA 濃度為0.0 、0．4 、0．8 、1.2mg / L ，安排試驗，選取培養好的愈傷組織移植于上述方案配置的培養基中，觀(guān)察叢生芽分化情況。
愈傷組織接種10d 后，開(kāi)始出現淺綠色瘤狀突起，20d 后逐漸伸長(cháng)產(chǎn)生叢生芽，但是不同的激素濃度及配比的分化率和叢生芽數不同。從表2 可以著(zhù)出，分化率和叢生芽數較高的試驗分別為10 號和14 號，由于分化率還不夠理想，又圍繞10 號和14 號對激素濃度進(jìn)行了調整（見(jiàn)表3 ）。結果表明，適宜蘆筍愈傷組織分化成芽的激素濃度分別為BA：1.8mg／L , NAA ：0.2mg / L ，因此可以認定MS + BA 1.8 mg / L 十NAA 0.2mg / L 十糖30g/L十瓊脂5.8g/L＋活性炭0.5g/L，是蘆筍最佳分化培養基。
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