用倍比稀釋法:取12只無(wú)菌試管,每管預先加入1.8ml支原體選擇性液體培養基,在第一管中加入0.2ml待測菌液,充分混勻后從第一管吸出0.2ml液體加入第二管,再混勻,吸出0.2ml加入第三管,依次類(lèi)推,到最后一管,放入30度培養,CCU的定值以最后一管出現顏色改變作為,即如果第五管發(fā)生顏色改變?yōu)樽詈笠还,此CCU為10的5次方/ml.如果第六管顏色改變?yōu)樽詈笠还,?0的6次方/ml。
由于支原體的液體生長(cháng)是以顏色改變作為生長(cháng)想象觀(guān)察,其生長(cháng)后的液體培養基仍然是澄清透亮的,只是顏色發(fā)生變化,不像大多數細菌液體是混濁的,因此用測OD值定量是行不通的.當然從理論上說(shuō)固體的cfu平板澆注發(fā)也是可以行得通的,但是支原體的菌落很小,一般觀(guān)察要在低倍鏡下觀(guān)察,照成研究人員的主觀(guān)觀(guān)察難度,易出現主觀(guān)誤差.因此支原體較好的定量方法還是倍比稀釋的CCU較為簡(jiǎn)單可行,也是常用的.。
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