正交試驗優(yōu)化菊花組織培養條件一
錄入時(shí)間:2009-6-30 14:20:44
來(lái)源：青島海博
摘要：通過(guò)菊花無(wú)菌苗體系建立、愈傷組織誘導、不定芽分化、不定根誘導試驗，發(fā)現用0.2 % HgCl2對葉片、莖尖消毒3 - 4 min 建立無(wú)菌苗體系較好；2 , 4 一D 0.5mg/L 、6 一BA 0.5mg/L 對愈傷組織的誘導較好；生長(cháng)素NAA 0.lmg/L 、IBA 0.1 mg/L 、2 , 4 一D 0.lmg/L 和細胞分裂素6 一BA 1.0mg/L 、ZET 1.0mg/L、2 一ip 1.Omg/L 對不定芽分化形成均有較好效果。
關(guān)鍵詞：菊花；組織培養；正交試驗；激素
菊花為菊科多年生草本植物，具有觀(guān)賞及藥用價(jià)值。菊花喜涼爽、較耐寒，生長(cháng)適溫18 一21 ℃，在微酸性至微堿性土壤中皆能生長(cháng)，以pH 值6.2 一6.7 最好川。菊花味甘、苦，微寒。歸肺、肝經(jīng)川�；ê腿莺瑩]發(fā)油，成分有菊油環(huán)酮、蠟狀物、單龍腦酞酸酷、菊醇利黃酮類(lèi)成分、木褲草素一7 一葡萄糖昔二水合物等［51 。具有散風(fēng)清熱、平肝明目之功效，可用于風(fēng)熱感冒、頭痛眩暈、目赤腫痛、眼目昏花的治療。本試驗的目的旨在通過(guò)正交試驗優(yōu)化菊花組織培養的條件。
材料與方法
1.1 材料
菊花采自楚雄師范學(xué)院校園，4 個(gè)品種代號分別為品種l 、品種2 、品種3 、品種4 。
1.2 方法
采用正交試驗設計，結果用SPss 11.5 軟件進(jìn)行統計分析。
1.2.1 不同外植體部位、不同消毒時(shí)間對菊花無(wú)菌苗體系建立的影響試驗采用1/2MS 。為基本培養基，選取菊花莖尖、葉片、根，用0.2 % Hgcl2 分別處理3 min 、4 min 、5 min, 進(jìn)行單因素多水平對照試驗。每組試驗接5 瓶，每瓶接種4 個(gè)材料，暗處理7d 后觀(guān)察。
1.2.2 不同外植體部位、基本培養基類(lèi)型及激素組合對菊花愈傷組織誘導的影響試驗采用5 因素4 水平正交試驗，每組試驗接5 瓶，每瓶接種4 個(gè)材料。因素水平見(jiàn)表1 。
1.2.3 不同來(lái)源的愈傷組織、基本培養基類(lèi)型及激素組合、蔗糖濃度對誘導菊花愈傷組織分化形成不定芽的影響試驗采用5 因素4 水平正交試驗，每組試驗接5 瓶，每瓶接種4 個(gè)材料。因素水平見(jiàn)表2 。
2 結果與分析
2.1 不同外植體部位、不同消毒時(shí)間對菊花無(wú)菌苗體系建立的影響
方差分析結果表明，消毒時(shí)間、外植體部位對成活率的影響分別為極顯著(zhù)（P=0.001 < 0.01 ）和顯著(zhù)（P=0.028 < 0.05 ）。多重比較結果（表3 ）表明，消毒3 min 或4 min 的成活率極顯著(zhù)優(yōu)于5 min ；消毒3 min 或4 min 對成活率的影響不顯著(zhù)，均具有較好的消毒效果。外植體水平l （葉片）、3 （根）對成活率的影響差異不顯著(zhù)，且均極顯著(zhù)優(yōu)于水平2 （莖尖），因此葉片、根在菊花無(wú)菌苗體系建立中均可以使用。
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