細葉石斛原球莖組培褐化抑制與試管苗生根二

從上述的實(shí)驗結果可以看出，除了④ 編號培養基中的原球莖死亡之外，其他編號培養基中的原球莖都有一定的褐化現象，其中加活性炭的原球莖褐化程度最低，褐化率只有11.25 % ，與對照組的褐化率37.52 ％相比有一定的抑制作用。而附加聚乙烯毗咯烷酮的原球莖褐化程度最大，褐化率達到80.02 % , 加速了原球莖的褐化。附加維生素C 的原球莖的褐化率為33.41 % ，介于附加活性炭和對照組之間，說(shuō)明附加維生素C 有一定的抑制作用，但效果沒(méi)有附加活性炭的好。調pH 為5.3 的培養基的原球莖在培養了17d 后已經(jīng)完全死亡，可能是由于培養基不凝，水分過(guò)多，抑制了原球莖呼吸從而導致死亡。從上述結果看，附加活性炭的原球莖生長(cháng)最好，褐化率最低（見(jiàn)圖1 ) ；加維生素C 的效果次之，加聚乙烯毗咯烷酮反而加速原球莖的褐化。
2.2 適宜的生根基本培養基篩選
接種完成后，每隔1 天進(jìn)行一次實(shí)驗觀(guān)察，記錄不同的基本培養基開(kāi)始生根的時(shí)間及其他的現象。從表2 中可以看出，WPM 、大量元素減半的MS 、MS 、B5 基本培養基中的植株開(kāi)始生根所需的時(shí)間相差不大，其中WPM 培養基的植株生根所需時(shí)間為19d ，是所需時(shí)間最少的，同時(shí)植株較壯，葉色濃綠，平均根數5.8 根／株，較粗壯（見(jiàn)圖2 ) ；其次為大量元素減半的MS 培養基中的植株，所需時(shí)間為20d ，植株較壯，葉色綠，平均根數5.6 根／株；再次為MS 培養基中的植株，所需時(shí)間為22d ；表現較差的是B5 、N6 培養基。

2.3 生長(cháng)調節劑的篩選
接種4Od 后，進(jìn)行數據統計，本次試驗以生根率為主要分析結果。進(jìn)行直觀(guān)分析和方差分析，結果見(jiàn)表3 。從表3 可直觀(guān)看出，A 因素的2 水平、B 因素的2 水平和C 因素的l 水平對生根率的影響較大。由此可知細葉石斛的生根培養基的優(yōu)良配方為MS + A2B2C1。因素的主次由極差的大小來(lái)衡量，極差大表明此因素對生根率的影響大，即此因素比較重要；極差小表明此因素對生根率影響小，即此因素是次要的。從表3 可知，主要因素為A ，其次為B ，再次為C 。方差分析結果表明，A 因素達到極顯著(zhù)水平（P=0.0001 < 0.01 ) ; B 因素達到顯著(zhù)水平（P=0.03 < 0.05 ) ; C 因素差異不顯著(zhù)（P＝0.195 > 0.05 ）。這說(shuō)明方差分析的結果與直觀(guān)分析的結果一致。
在這一系列的培養基中的植株開(kāi)始生根的時(shí)間大致相同，都在接種20 一23d 左右，但是一旦開(kāi)始生根，根伸長(cháng)的速度很快。生根10d 后（即接種后30 - 33d ）根長(cháng)就達到3 cm 左右，到接種35d 后，根伸長(cháng)的速度開(kāi)始下降，接種后40d 時(shí)基本停止伸長(cháng)。這時(shí)候苗的質(zhì)量最好：苗粗壯、葉色濃綠、根吸收營(yíng)養的能力強。培養時(shí)間超過(guò)50d ，培養基的營(yíng)養幾乎都耗盡，植株開(kāi)始變黃，表現出營(yíng)養不良的狀況，培養基也開(kāi)始變?yōu)楹稚�。所以如果要煉苗移栽，建議在接種后40d左右開(kāi)始煉苗，效果會(huì )相對比較好。

3 結論
在培養基中添加活性炭對細葉石斛的原球莖褐化抑制的效果比較好，但是仍然不能完全抑制原球莖的褐化，怎么才能完全抑制細葉石斛原球莖增殖過(guò)程中的褐化現象，仍需要進(jìn)一步的研究。實(shí)驗結果表明WPM 培養基作為基本培養基比較適合細葉石斛的生根，所需時(shí)間最少，生根數量較多，植株粗壯，其次為大量元素減半的MS 培養基。正交實(shí)驗初步表明生長(cháng)調節劑中IBA 對細葉石斛試管苗生根的影響達到極顯著(zhù)水平，NAA 達到顯著(zhù)水平，而6 -BA 對細葉石斛的生根沒(méi)有顯著(zhù)影響。該實(shí)驗篩選出較好的生長(cháng)調節劑組合及濃度水平，為細葉石斛的生產(chǎn)推廣打下基礎。

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