細葉石斛原球莖組培褐化抑制與試管苗生根一
錄入時(shí)間:2009-6-30 11:26:04
來(lái)源：青島海博
摘要：研究細葉石斛原球莖的褐化抑制和試管苗的生根，實(shí)驗結果表明活性炭對抑制原球莖的褐化效果比較好，WPM 和大量元素減半的MS 培養基比較適合細葉石斛的生根，生長(cháng)調節物質(zhì)IBA 、NAA 對細葉石料生根的影響達到顯著(zhù)水平。
關(guān)鍵詞：細葉石料；原球莖；褐化；生根
細葉石斛（Dendrobium hancockii Rolfe ）又名黃草，加工成楓斗后叫“節節草”楓斗。常附生于濕度大并有充足散射光的密林樹(shù)干，并常與苔葬植物伴生，或生長(cháng)于林中的山巖石縫或石槽間，巖石質(zhì)地以粗糙、松泡、易吸潮、表面附著(zhù)腐殖質(zhì)土和植物苔蘚者為佳。細葉石斛為陰性濕生植物中耐寒冷和稍耐干旱的品種。
目前對細葉石斛的研究不多，華允芬等對3 種藥用石斛：細葉石斛、細莖石斛和鐵皮石斛的多糖成分比較，發(fā)現這3 種石斛都含有較高的總多糖。陳云龍等對細葉石斛莖上部、莖中部、莖下部和根中的多糖、生物堿和礦物質(zhì)含量進(jìn)行了分析，并研究了其水溶性提取物對SD 大鼠胸主動(dòng)脈的舒張效應。陳云龍等研究表明細葉石斛中總多糖含量較高，并含有較多的鉀、鈣、鎂、鐵、錳、鋸、欽和銅等元素，生物堿含量在不同的部位存在差異，其中莖的上部最高，莖的中部和下部以及根部含量差異不大。細葉石斛水溶性提取物強烈拮抗苯腎上腺素所致的大鼠胸主動(dòng)脈血管收縮作用，對內皮完整和無(wú)內皮功能的2 種樣本均引起類(lèi)似的濃度依賴(lài)性舒張效應。石斛是我國著(zhù)名的傳統藥材及出口商品，主要來(lái)源于野生資源。由于受到環(huán)境因素制約和人們的過(guò)度采伐，野生資源逐年減少，而其用藥需求量卻日益增大，因此，加強石斛的資源保護及擴大種植面積具有重要意義。而利用植物組織培養進(jìn)行栽培，不但可以提高成活率，還可以縮短栽培的時(shí)間。目前有關(guān)石斛組織培養的文獻有很多，特別是金釵石斛、鐵皮石斛等。但是有關(guān)細葉石斛的組織培養未見(jiàn)報道，筆者曾對其原球莖及叢生芽的增殖做過(guò)研究，發(fā)現在對細葉石斛的原球莖的增殖過(guò)程中經(jīng)常有褐化現象出現，因此本文在此基礎上著(zhù)重研究了細葉石斛原球莖的褐化抑制及無(wú)菌苗的生根。
1 材料與方法
1.1 不同的培養條件對原球莖褐化抑制影響的實(shí)驗設計
在篩選出較適宜原球莖增殖的培養基配方1 / 2 MS + 6 一BA 1.Omg/L + IBA 0.3 mg / L ＋蔗糖30 g / L ＋瓊脂7.2g/L 的基礎上，采用不同的培養條件進(jìn)行培養：① 添加活性炭粉濃度是1g/L ；② 添加聚乙烯毗咯烷酮（PVP ) 1g/L ；③ 添加維生素C 濃度是1g/L ；④ 培養基的pH 值調節到5.3 ；⑤ 對照組。每個(gè)編號接10 瓶。選取發(fā)育相同生長(cháng)良好的原球莖進(jìn)行接種，每瓶接3 小塊原球莖，每塊約0.5 cm 大小。接完種后直接放到光照培養室中培養，光照強度為1 500 - 2 ooolx ，光照時(shí)間為12 h/d ，培養室溫度為25 土2 ℃ 。
1.2 篩選適宜的生根基本培養基的實(shí)驗設計以MS 、大量元素減半的MS 培養基、B5 、WPM 、N6 為基本培養基，分別附加IBAO.5mg/L 、NAA2.0 mg/L 、6 一BA1.0mg/L 、蔗糖30 g/L 、瓊脂7.2 g / L ，挑選在叢生芽增殖中長(cháng)勢良好、比較均勻的無(wú)菌苗作生根培養，每一種培養基接10 瓶，每1 瓶接種3 一5 株叢生芽，接種后光照培養條件與上同。以開(kāi)始生根時(shí)間的先后為統計結果。
1.3 生長(cháng)調節劑的篩選試驗設計
試驗采用正交實(shí)驗設計，選取3 因素2 水平的L4（2 )3正交表。在大量元素減半的Ms 培養基附加影響細葉石斛生根的3 種試驗因素：IBA 、NAA 、6 一BA 等生長(cháng)調節劑，分別編號為A 、B 、C ，每一因素各取2 個(gè)水平。用L4 ( 2 )3正交表安排試驗，即按設計的試驗方案配制培養基：大量元素減半的MS 培養基＋ABC ＋蔗糖30 g/L ＋瓊脂7.2 g/L , pH 值調至5.5 （④ 號培養基除外），每個(gè)試驗號5 瓶（5 個(gè)重復），每一瓶接種3 一5 株叢生芽。接種后光照培養條件與上同。
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