理化學(xué)特性 口蹄疫病毒的結 構和成分都較簡(jiǎn)單。成熟病毒粒子約含30%的RNA,其余70%為蛋白質(zhì)?谔阋卟《镜腞NA呈 單股線(xiàn)狀,為約由8 500個(gè)核苷酸組成的正鏈RNA,具有感染性,分子量約26~28×10 6 D a,其堿基組成為A/G/U/C=26/24/22/28。口蹄疫病毒的完整粒子(146S)的衣殼由1A(VP4 )、1B(VP2)、1C(VP3)和1D(VP1)四種結構蛋白各60個(gè)分子組成。裝配過(guò)程中的前衣 殼(75S)和14S顆粒均由1AB(VP0)、1C和1D三種蛋白構成。但前衣殼各蛋白均為60個(gè)分子, 而14S顆粒中只各含5個(gè)分子?谔阋卟《玖W恿呀鈺r(shí)產(chǎn)生的12S蛋白亞單位由1A、1C和1D三 種蛋白各5個(gè)分子組成。1個(gè)蛋白亞單位構成病毒粒子二十面體的一個(gè)面。用酸處理口蹄疫病 毒,可使每個(gè)病毒粒子釋出20個(gè)蛋白亞單位。VP4與RNA緊密結合,是病毒粒子的 內部成分。在以超速離心技術(shù)制備的病毒制品中,可以見(jiàn)到不同大小的幾種粒子。最大的 顆粒為完整病毒,直徑25nm,沉淀系數為146S,在氯化銫中的浮密度為143g/ml,分子量 為 808×106 Da。稍小的一種顆粒為空衣殼?找職さ闹睆綖21nm,沉淀系數為75S,分子 量 為47×106 Da。在氯化銫中的浮密度為131g/ml?找職げ缓琑NA,所以沒(méi)有感染性。 最 小的一種顆粒為衣殼蛋白亞單位,其直徑是7nm,沉淀系數為12~14S,在氯化銫中的浮密 度為15g/ml,分子量為38×106 Da。應用尿素和十二烷基硫酸鈉(SDS)于高溫下使病 毒 粒子裂解,即可獲得大量的12S衣殼蛋白亞單位。如上述,酸處理也可使口蹄疫病毒釋出12S 蛋白亞單位(由VP1、VP2和VP3構成)、RNA和VP4。以福爾馬林或乙酰乙烯亞胺滅 活的完整病毒粒子或者空衣殼,在給動(dòng)物接種后,可以使其產(chǎn)生補體結合、沉淀和中和抗體 ,但12S衣殼亞單位僅能產(chǎn)生補體結合和沉淀性抗體,幾乎不能使動(dòng)物形成中和抗體。給已 注射完整病毒、空衣殼或12S衣殼亞單位的動(dòng)物分別攻擊強毒力的口蹄疫病毒,也呈同樣結 果:完整病毒和空衣殼引起較好的免疫保護力,而12S衣殼亞單位注射組動(dòng)物幾乎沒(méi)有任何 免疫保護力。
應用聚丙烯酰胺凝膠電泳分離VP 1、VP2和VP3,加入福氏不完全佐劑后注射豚鼠,僅VP1產(chǎn)生對病毒粒 子的沉淀反應抗體,并能引起部分的免疫保護力。在VP1、VP2、VP3和VP4等4種蛋白 質(zhì)中,與中和抗體以及抗感染有關(guān)的主要是VP1,但只完整病毒粒子和空衣殼有良好免疫原 性,因此VP1可能必須有VP4共存或存在佐劑時(shí)才能發(fā)揮免疫原性,而且與VP1本身的立 體構型有關(guān)。此外,在病毒增殖的動(dòng)物機體內和感染細胞培養液中還可發(fā)現一種非結構性 的病毒特異蛋白質(zhì),稱(chēng)為“病毒感染相關(guān)成分”或VIA抗原。因為在注射滅活疫苗的動(dòng)物體內 不能檢 出VIA抗原及其抗體,因此VIA抗原的出現是動(dòng)物感染口蹄疫,亦即已在體內發(fā)生病毒增殖的證 據。VIA抗原其實(shí)就是依賴(lài)RNA的RNA聚合酶。VIA抗原在瓊脂擴散試驗中對各型口蹄疫病毒的 抗體都呈現反應。口蹄疫病毒的血凝特性尚未充分證實(shí)。
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