病毒粒子表面攜帶特定的電荷群，因此病毒對離子交換樹(shù)脂及類(lèi)似的其它吸附劑具有親和性。利用吸附劑的層析法分為兩種，一種是正吸附法，即依據病毒粒子表面所攜帶的電荷進(jìn)行特異性吸附，然后用適當濃度的離子溶液將病毒粒子解離回收；另一種是負吸附法，即只吸附組織或宿主細胞成份等非病毒蛋白，而讓病毒粒子通過(guò)。收集濾液后經(jīng)差速離心沉淀法回收病毒。由于各種病毒的大小和表面結構等理化性質(zhì)不同，因此對吸附劑的親和性也有顯著(zhù)的差異。
1.萄聚糖柱層析法將初步濃縮的材料，通過(guò)葡聚糖G150或G200柱層析，然后用002～015mol/L磷酸]鹽緩沖液(pH76)洗脫，分部收集，測定280nm波長(cháng)處的OD值，將含病毒的各部分相混合，]再濃縮，透析之后，即可得到比較純凈的病毒，Nagano(1989年)用Sephacryls1000柱層析]純化了雞傳染性支氣管炎病毒。
[BT4]2.凝膠層析法
① 磷酸鈣凝膠：這是病毒吸附層析法中較為常用的凝膠，由0.5mol/L]CaCl2和05mol/L]Na2HPO4溶液混合制備凝膠狀沉淀物。在中性條件下生成的凝膠稱(chēng)為“brushite”，在]堿性條件下生成的凝膠稱(chēng)為羥基磷灰石(hydroxypatite)。兩者均用0001mol/L磷酸鹽緩沖]液懸浮，置于4℃4～5天，使它充分沉淀后應用。
②氫氧化鋅凝膠：是由7mol/L氨水與01mol/L醋酸鋅溶液滴加混合(pH85)而制備的，在制備后數小時(shí)內較穩定，可作為吸附劑。Newton和Beris等將水泡性口炎病毒懸液與氫氧化鋅凝膠混合，使其形成復合體后沉淀，然后用008mol/L]EDTA(pH85)解離病毒，獲得較好的回收量。
② 焦磷酸鎂凝膠：是由01mol/L焦磷酸鈉和01mol/L]MgCl2，以2：10(體積)比]例在室溫中緩慢滴加混合而獲得的較穩定的焦磷酸鎂凝膠。西村等將牛痘病毒懸液同此凝膠混合，使病毒吸附于凝膠，然后用01mol/L鹽水洗2次，最后用03mol/L枸櫞酸鈉溶液解離病毒，將病毒較好地回收于水相中。
3.離子交換纖維素柱層析法 離子交換層析適于分離幾乎所有帶電荷的分子。通常有陰離子交換劑和陽(yáng)離子交換劑兩種，其主要特性見(jiàn)表13-1。[JZ][HT5”H]表13-1〓常用的離子交換纖維素的特性[HT6SS][]BG(!][BHDFG2，WK14ZQ，WK15ZQ，WK8ZQ，WK14W]種類(lèi)[]活性基團[]性質(zhì)[]作用[BHD][]二乙基氨基乙基[]強堿[][BHDWG1*3/4]陰離子交換纖維素[]氨基乙基[]中強堿[]吸附帶負電荷的物質(zhì)[BH][]對氨基芐基[]弱堿[][BHD][]磺甲基[]強酸[][BHDW]陽(yáng)離子交換纖維素[]磷酸[]中強酸[]吸附帶正電荷的物質(zhì)[BH][]羧甲基[]弱酸[][BG)F][HT5SS] 某些病毒可以被離子交換劑經(jīng)離子鍵作用而吸附，通過(guò)改變平衡液的離子強度，使其再]洗脫下來(lái)而達到純化目的。腺病毒和口蹄疫病毒被DEAE纖維素吸附，可分別再用05mol/L]和015mol/L]NaCl溶液洗脫下來(lái)，從而得以純化。
4.親和層析法 親和層析是一種特殊的吸附層析，基質(zhì)與待分離物具有特異的生物親和力。通常是將特]異的抗體經(jīng)共價(jià)偶聯(lián)作用結合在配基上組成一種不溶性配基。當相應的抗原物質(zhì)通過(guò)固定配]基裝成的層析柱時(shí)，即被吸附。隨后再改變實(shí)驗條件，將其洗脫下來(lái)，達到純化的目的。該法是于80年代初期開(kāi)始用于病毒的分離提純，不僅純度好，敏感，而且回收率高。Njayou(1991年)應用此法成功地提純了麻疹病毒。他們應用猴抗麻疹病毒的IgG進(jìn)行共價(jià)偶聯(lián)，獲得了高純度而有活性的病毒，回收率可達總回收成份的30％。Rimmelzwaan(1987年)應用犬細小病毒的中和性單克隆抗體親和層析，純化了細小病毒，經(jīng)SDSPAGE]和ELISA鑒定，99％以上的雜蛋白被洗除，收獲了70％～90％的病毒抗原成份。
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