高粱組織培養研究進(jìn)展一

高粱組織進(jìn)行培養及再生，其目的在于讓外植體能夠高頻率地誘導出愈傷組織，建立高效的體細胞再生體系，為高粱遺傳轉化和細胞工程研究創(chuàng )造有利條件。最早進(jìn)行高粱組織培養研究的是Strogonol B PIll,1968年，他利用高粱根和分蘗節在培養基上附上1mg／L 2，4一D、1 mg／L KT、5 mg／L泛酸鈣和l mg／L抗壞血酸誘導出愈傷組織，并與海蓬子、草木犀、甘藍的愈傷組織進(jìn)行了抗鹽比較，但是，他并沒(méi)有得到再生植株。Masteller等以芽原基為外植體，在附加2，4一D l～5 mg／L的MS培養基上誘導出愈傷組織，并獲得了再生植株，這是通過(guò)組織培養獲得高粱再生植株的最早報道。此后，高粱組織培養工作不斷進(jìn)行。

1胚培養

1．1 未成熟胚的培養

高粱外植體的培養多以未成熟胚為材料進(jìn)行。國外，Gamborg等、Thomas等、Dunstan等、Brettel等、Ma等、Lusardi和Lupotto、Rao等相繼進(jìn)行了以未成熟胚為外植體誘導出愈傷組織，并分化獲得再生植株的報道。Gamborg等選用一個(gè)雜交種，在含有IAA的培養基上誘導出愈傷組織并獲得了再生植株。Ma等采用20個(gè)高粱品種，研究了各品種在形成愈傷及產(chǎn)生再生植株上的差異，并分化出再生植株。Lusardi和Lupotto研究了不同品種在形成愈傷組織方面的差異。Rao等研究了不同濃度的天門(mén)冬酰氨(L--Asn)和脯氨酸(L—Pro)對胚性愈傷組織誘導、繼代的影響。他們認為在MS培養基中(添加了2，4一D)同時(shí)添加高濃度的L—Asn和L—Pro能促進(jìn)愈傷組織的誘導和分化。Elkonin等l101以未成熟胚為外植體，在附加l～5 mg／L 2，4一D的MS培養基上誘導出了胚性愈傷組織：在附力NIAA 1 mg／L和KT 0．1mg／L或NAA 0．1 mg／L和6一BAP O．5 mg／L的培養基上分化、獲得了再生植株；并在N6培養基上附加高濃度的天門(mén)冬氨酸和脯氨酸，也誘導形成了胚性愈傷組織。國內，馬鴻圖等對來(lái)自美國和中國的20 個(gè)基因型不同的高粱幼胚進(jìn)行誘導培養，結果用401 一1 品種的5 個(gè)未成熟胚的小盾片愈傷組織分化獲得了158 株再生植株。郭建華等以10 個(gè)高粱品系和10 個(gè)雜交種的未成熟胚小盾片為外植體進(jìn)行愈傷組織的誘導、分化和再生，并對其同工酶和品質(zhì)進(jìn)行了分析研究，結果表明：高粱未成熟胚的最適胚齡為授粉后的12~ 13d ，長(cháng)約1.0mm：再生植株后代中的蛋白質(zhì)含量高于對照親本，單寧含量顯著(zhù)低于對照親本．韓福光等113 那用25 個(gè)品系和雜交種作為試材進(jìn)行研究，結果發(fā)現：未成熟胚的誘愈率在無(wú)鹽MS 培養基中可達70.2 % ，最適胚齡為授粉后的12~13d ；同時(shí)認為2 , 4 一D 的濃度是誘導愈傷組織的關(guān)鍵因素之一。白志良等也對10 個(gè)高粱品種不同外植體的愈傷組織進(jìn)行了誘導培養和分化再生等方面的研究，結果未成熟胚的出愈率為8 % ~74 % ，分化率為26 %~ 66 ％。實(shí)驗結果還表明，幼胚的出愈率主要受胚齡的影響，一般胚齡小于1 周的很難誘導成功，胚齡大的則較易成功。
1.2 成熟胚培養
國內，先后有韓福光等、白志良等、石太淵等做過(guò)相關(guān)的研究。韓福光等報道了以高粱不同外植體在添加有不同濃度2 , 4 一D 的MS 培養基上所進(jìn)行的愈傷組織的誘導培養，并對8 個(gè)不同基因型的高粱品種成熟胚的幼愈率進(jìn)行了分析。白志良等也報道了對高粱不同外植體所進(jìn)行的愈傷組織誘導和分化的研究，結果表明，成熟胚的誘愈率為59 %~100 % ，分化再生率最高為25 ％。相對于幼胚培養，成熟胚取材比較方便，但如消毒時(shí)間掌握不好，污染會(huì )很?chē)乐�。國外對成熟胚培養的報道相對多一些。Bhaskaran首次報道了高粱成熟胚愈傷組織的誘導培養。此外，他還進(jìn)行了耐鹽和耐鋁篩選培養的研究，獲得了再生植株，并在1987 年報道了再生植株的體細胞克隆變異研究。此后Hagin 等、Murty 等也利用成熟胚小盾片產(chǎn)生的愈傷組織分化出了再生植株。cai 等報道了以高粱成熟胚的芽端為外植體，在添加L 一Asn 150mg/L 、KT 5 mg /L和調整5 種無(wú)機鹽的MS 培養基上誘導出愈傷組織，并分化出再生植株的研究。Bhat 等報道了高粱不同外植體的誘導培養研究。其中，成熟胚培養的誘愈率為41.6 ％。

上一篇：冬青苦丁茶樹(shù)組織培養的研究二

下一篇：高粱組織培養研究進(jìn)展二