放線(xiàn)菌及霉菌形態(tài)觀(guān)察

一、實(shí)驗原理 　　

放線(xiàn)菌是指能形成分枝絲狀體或菌絲體的一類(lèi)革蘭氏陽(yáng)性細菌。常見(jiàn)放線(xiàn)菌大多能形成菌絲體，緊貼培養基表面或深入培養基內生長(cháng)的叫基內菌絲(簡(jiǎn)稱(chēng)“基絲”)，基絲生長(cháng)到一定階段還能向空氣中生長(cháng)出氣生菌絲(簡(jiǎn)稱(chēng)“氣絲”)，并進(jìn)一步分化產(chǎn)生孢子絲及孢子。有的放線(xiàn)菌只產(chǎn)生基絲而無(wú)氣絲。在顯微鏡下直接觀(guān)察時(shí)，氣絲在上層、基絲在下層，氣絲色暗，基絲較透明。孢子絲依種類(lèi)的不同，有直、波曲、各種螺旋形或輪生。 　　

霉菌可產(chǎn)生復合分枝的菌絲體，分基內菌絲和氣生菌絲，氣生菌絲生長(cháng)到一定階段分化產(chǎn)生繁殖菌絲，由繁殖菌絲產(chǎn)生孢子。霉菌菌絲體(尤其是繁殖菌絲)及孢子的形態(tài)特征是識別不同種類(lèi)霉菌的重要依據。霉菌菌絲和孢子的寬度通常比細菌和放線(xiàn)菌粗得多，常是細菌菌體寬度的幾倍至幾十倍，因此，用低倍顯微鏡即可觀(guān)察。人們設計了各種培養和觀(guān)察方法，這些方法的主要目的是為了盡可能保持放線(xiàn)菌自然生長(cháng)狀態(tài)下的形態(tài)特征。本實(shí)驗采用插片法。 　　

插片法：將放線(xiàn)菌接種在瓊脂平板上，插上滅菌蓋玻片后培養，使放線(xiàn)菌菌絲沿著(zhù)培養基表面與蓋玻片的交接處生長(cháng)而附著(zhù)在蓋玻上。觀(guān)察時(shí)，輕輕取出蓋玻片，置于載玻片上直接鏡檢。這種方法可觀(guān)察到放線(xiàn)菌自然生長(cháng)狀態(tài)下的特征，而且便于觀(guān)察不同生長(cháng)期的形態(tài)。

二、試劑與器材 　　

1、材料 黑曲霉、青霉和根霉，細黃鏈霉菌或青色鏈霉菌，滅菌的高氏I號瓊脂和滅菌的查氏培養基。 　　

2、實(shí)驗器材 經(jīng)滅菌的：平皿、玻璃紙、無(wú)菌吸管、蓋玻片、玻璃涂棒，以及載玻片、接種環(huán)、接種鏟、鑷子、顯微鏡等。

三、實(shí)驗內容 　　

倒平板→接種→插片→培養→鏡檢

四、關(guān)鍵步驟及注意事項 　　

1、倒平板要厚一些，接種時(shí)劃線(xiàn)要密。 　　

2、插片時(shí)要有一定角度并與劃線(xiàn)垂直。 　　

3、觀(guān)察時(shí)，宜用略暗光線(xiàn)；先用低倍鏡找到適當視野，更換高倍鏡觀(guān)察。 　　

4、如果用0、1%美藍對培養后的蓋玻片進(jìn)行染色后觀(guān)察，效果會(huì )更好。

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