病毒缺乏完整的酶系統, 而且又無(wú)核糖體等細胞器,因此不能在任何無(wú)生命的培養液內生長(cháng)。因此,實(shí)驗動(dòng)物、雞胚以及體 外培養的器官和細胞就成為人工增殖病毒的基本工具。而大量病毒的培養,又是病毒學(xué)實(shí)驗 研究以及制備疫苗和特異性診斷制劑的先決條件。培養病毒最早應用的方法是實(shí)驗動(dòng)物和 雞胚,但從50年代簡(jiǎn)便適用的細胞培養廣泛應用于病毒培養以來(lái),前兩種方法已降到次要地位 ,但至今仍有部分病毒的分離鑒定還離不開(kāi)實(shí)驗動(dòng)物或雞胚,特別是在免疫血清制備以及病毒 致病性、免疫性、發(fā)病機理和藥物效檢等方面。在禽類(lèi)病毒病和流感、副流感類(lèi)等病毒病的 研究方面,雞胚(含其它禽胚)仍具有重要的應用價(jià)值。
一、實(shí)驗動(dòng)物
實(shí)驗動(dòng)物是長(cháng)期以來(lái)分離和增殖病毒、制造病毒抗原和病毒疫苗以及病毒病實(shí)驗 研究的常用材料和工具。但是后來(lái)發(fā)現,實(shí)驗動(dòng)物經(jīng)常自身帶有病毒,常;煜囼灲Y果,并 給病毒疫苗的生產(chǎn)帶來(lái)嚴重的潛在危險,例如被某些致瘤病毒所污染等等。為了克服這個(gè)缺 陷,目前已通過(guò)微生物控制手段,培育出無(wú)菌動(dòng)物(Germ Free Animal, 簡(jiǎn)稱(chēng)GF)、已知菌動(dòng)物 或稱(chēng) 悉生動(dòng)物(Gnotobiotics, 簡(jiǎn)稱(chēng)GN)和無(wú)特定病原動(dòng)物(Specific Pathogen Free Animal,簡(jiǎn) 稱(chēng)SPF)。GF動(dòng)物體內和體外均檢不出任何微生物、寄生蟲(chóng)或其它生命體。GN是確知所帶微生 物的動(dòng)物。只帶一種菌的叫單菌動(dòng)物,其次為雙菌和三菌動(dòng)物,四菌以上則稱(chēng)多菌動(dòng)物。SPF 是指體內無(wú)特定微生物和寄生蟲(chóng)感染的動(dòng)物。從微生物控制的程度講,SPF動(dòng)物雖是這三類(lèi)中 最低的,但它無(wú)人畜共患病,無(wú)主要傳染病,無(wú)對實(shí)驗研究產(chǎn)生干擾的微生物,所以能滿(mǎn)足病毒 學(xué)一般實(shí)驗的需要,比應用普通實(shí)驗動(dòng)物取得的結果更為科學(xué)與可靠。限于條件,某些實(shí)驗室 當前仍常應用普通實(shí)驗動(dòng)物,但也必須健康,并使用純系品種。一次實(shí)驗使用的動(dòng)物,在年齡 、體重和營(yíng)養狀態(tài)等方面要盡量一致。
國外實(shí)驗動(dòng)物科學(xué)發(fā)展迅速,我國已在部分大城市 建立實(shí)驗動(dòng)物中心,專(zhuān)供應各種經(jīng)過(guò)人工遺傳控制和微生物控制而育成的純系高品位實(shí)驗動(dòng) 物 。為了滿(mǎn)足生物學(xué)、醫學(xué)和獸醫學(xué)研究的需要,國外按遺傳控制標準已育成各類(lèi)實(shí)驗動(dòng)物260 0余種,其中小鼠就有1700余個(gè)品系,而且已經(jīng)規范化、標準化,從而保證了研究工作的科學(xué)性 和嚴密性。雖然病毒學(xué)實(shí)驗中應用實(shí)驗動(dòng)物的比重正在逐步降低,但是乳鼠至今仍是分離 某些蟲(chóng)媒披膜病毒、柯薩奇病毒和呼腸孤病毒的主要工具。獸醫學(xué)上除常應用家兔、小白鼠 、大白鼠、豚鼠、倉鼠和雞胚等進(jìn)行病毒分離、馴化以及疫苗生產(chǎn)以外,還常直接應用自然 易感動(dòng)物,例如羊、豬、狗、雞甚至馬和牛等大動(dòng)物作各該病毒的實(shí)驗研究。但如上述,普 通實(shí)驗動(dòng)物經(jīng)常自身帶毒,甚至發(fā)生病毒病的流行。例如家兔常有乳頭狀瘤、多型瘤、皰疹 、兔痘、腦脊髓炎和傳染性口腔炎等病毒感染,小白鼠常有鼠痘(脫腳病)、淋巴細胞性脈絡(luò ) 叢腦膜炎、病毒性肺炎、腦脊髓炎、白血病、乳腺瘤、鼠肝炎等病毒感染,倉鼠有唾腺炎等 病毒感染,豚鼠有腦膜炎、唾腺炎等病毒感染,實(shí)驗研究時(shí)必須注意。
實(shí)驗動(dòng)物主要用于:
( 1)分離病毒,并借助感染范圍試驗鑒定病毒;
(2)培養病毒,制造抗原和疫苗;
(3)測定各毒株之 間的抗原關(guān)系,例如應用實(shí)驗動(dòng)物作中和試驗和交叉保護試驗;
(4)制備免疫血清和單克隆抗 體;
(5)作病毒感染的實(shí)驗研究,包括病毒毒力測定,建立病毒病動(dòng)物模型等。進(jìn)行動(dòng)物實(shí) 驗時(shí),首先考慮的是選擇對目的病毒最敏感的實(shí)驗動(dòng)物品種和品系,以及適宜的接種途徑和劑 量。至于實(shí)驗動(dòng)物的飼養管理、接種和采血、剖檢等具體方法,請參閱微生物學(xué)實(shí)驗指導或 有關(guān)專(zhuān)著(zhù)。
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