愈傷組織和試管苗的培養

                                             愈傷組織和試管苗的培養
 
   愈傷組織的培養 一般來(lái)說(shuō)，從接種外植體到出現愈傷組織，需要經(jīng)過(guò)2周時(shí)間。2周之內就可以看到外植體上逐漸長(cháng)出乳白色或黃白色的瘤狀愈傷組織。首次培養愈傷組織時(shí)，恒溫箱的門(mén)應該關(guān)閉，不必見(jiàn)光，因為在無(wú)光條件下愈傷組織長(cháng)得更快。2周以后，由于培養基中的營(yíng)養成分已接近耗盡，必須更換培養基，進(jìn)行繼代培養。

    愈傷組織的繼代培養 進(jìn)行繼代培養所用的培養基，和培養愈傷組織所用的培養基相同。在嚴格的無(wú)菌條件下(接種箱內)將愈傷組織連同原來(lái)的外植體，一起移到新的培養基上。愈傷組織的繼代培養，一代為20 d。如果延長(cháng)培養時(shí)間，培養基中的營(yíng)養物質(zhì)會(huì )減少，外植體也會(huì )分泌一些有毒物質(zhì)，造成自身中毒。20 d以后，可以根據愈傷組織的大小，決定是繼續進(jìn)行繼代培養，還是進(jìn)行試管苗培養。如果愈傷組織長(cháng)到直徑為1～1��5 cm時(shí)，就可以進(jìn)行試管苗培養，否則還需要進(jìn)行第二次繼代培養。   

    在愈傷組織進(jìn)行繼代培養期間，可以將恒溫箱的門(mén)打開(kāi)，讓愈傷組織見(jiàn)光。愈傷組織見(jiàn)光后，顏色可以轉為綠色。   

    試管苗的培養 當愈傷組織長(cháng)到一定大小后，可以更換培養基，進(jìn)行試管苗的培養。試管苗的培養分為生芽培養和生根培養。要想培育出一株完整的試管幼苗，必須先進(jìn)行生芽培養，然后進(jìn)行生根培養。如果順序顛倒，先誘導生根，就不好誘導生芽了。生芽大約需要4～6周的時(shí)間，而生根培養時(shí)，1周以后就可以見(jiàn)到幼根了。注意，試管苗應該進(jìn)行見(jiàn)光培養。

    下面列出繼代培養和試管苗培養的培養基配方。①繼代培養和生芽培養的培養基配方是：MS培養基+6BA(質(zhì)量濃度為0.5～1.0 mg/L)+NAA(質(zhì)量濃度為0.1～0.15 mg/L)。即在1 L MS培養基中加入5～10 mL6BA和1～1.5 mL的NAA母液。NAA配合6BA，可以促進(jìn)不定芽的生長(cháng)。②生根培養的培養基配方是：MS培養基+NAA(質(zhì)量濃度為0.1～0.5 mg/L)。即在1 L MS培養基中加入1～5 mL的NAA母液。NAA起促進(jìn)生根的作用。

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