1、繁殖瓶苗
將待繁脫毒苗在無(wú)菌條件下每葉節切一段,接種在僅含大量元素、微量元素和鐵鹽的無(wú)激素MS固體或液體(可用紙橋)培養基的組培瓶中,置培養室內培養。培養條件為:光照1000-3000lx,光周期13-16h/d,培養溫度(25±2)℃,空氣相對濕度50%-60%,自然通風(fēng)。葉節段接種30-50d后長(cháng)成3-5片葉的幼苗。記錄苗芽發(fā)生時(shí)間,生長(cháng)狀況,污染率。再按照上述方法重復進(jìn)行擴繁,直到達到要求繁殖數量為止。
2、繁殖微型薯
將上述具有3-5片葉幼苗,加入液體培養基(MS+BA2-10mg/L)或(MS+BA2-10mg/L+IAA1mg/L+CCC100-500mg/L+糖80-100g/L),放入培養室,遮光全黑暗或光照時(shí)數少于8h/d,溫度(20±2)℃,空氣相對濕度50%-60%,自然通風(fēng)。 經(jīng)40-70d后,在植株葉腋處長(cháng)出微型薯。記錄微型薯發(fā)生時(shí)間,生長(cháng)狀況,污染率。
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