非洲菊的組織培養技術(shù)

   非洲菊為多年生草本植物，傳統的繁殖方法為播種或分株繁殖。但非洲菊種子壽命短、發(fā)芽率低，而且播種繁殖變異率很高，難以得到性狀一致的種苗，因而不能用于規模生產(chǎn)；而分株繁殖則存在繁殖慢，易退化和傳播病害，也不適于現代的大規模生產(chǎn)，因而目前國外一般都采用組織培養的方法來(lái)生產(chǎn)種苗。非洲菊的組培研究在國內已有報道，但均局限于對個(gè)別或少數品種的不同外殖體、不定芽誘導率及生長(cháng)方面的研究，即局限于實(shí)驗室階段的研究。在本項目中，為配合非洲菊種質(zhì)資源庫的建立及在生產(chǎn)中迅速推廣非洲菊的優(yōu)良品種，盡快提高我國非洲菊切花的品質(zhì)，我們不僅對多達45個(gè)非洲菊品種進(jìn)行了組培快繁，做了研究、比較。同時(shí)，也對組培快繁過(guò)程中某些因素對以后大田生產(chǎn)、切花品質(zhì)及產(chǎn)量的影響進(jìn)行了探索。
一、材料與方法
1.材料：試驗材料為本所從國內外收集的所有非洲菊品種共計45個(gè)，取花梗長(cháng)為1-3cm的花蕾，切取花托部位作為外殖體。
2.方法：將花梗在0.1％氯化汞溶液中消毒12分鐘后取出， 用無(wú)菌水沖洗7-8次。切下花托部位并分切為3-5mm小塊，放于誘導培養基上培養。置于光照1000lux，溫度25±3℃下培養。
    待誘導出的不定芽長(cháng)至3-4片葉，葉長(cháng)約3-4cm大小時(shí)切下，置于增殖培養基上，于光照1500-2000lux，溫度25±3 ℃下進(jìn)行增殖培養，周期為20-25天。
    將叢芽切成單株芽苗，放于生根培養基上進(jìn)行誘導生根，溫度、光照條件與增殖階段相同。經(jīng)過(guò)一個(gè)月生根培養，將生根苗出瓶移栽到苗床并統計生根率。
三、試驗結果 
1、非洲菊不定芽的誘導：
   各品種之間產(chǎn)生不定芽的能力差異很大，對四種培養基的反應也不同。其中"皇后""紅粉佳人""胭脂""國王""金邊紅"在Ｃ培養基上不定芽誘導率最高；"紅太陽(yáng)""黑珍珠""蛋黃""紅寶石""燦爛""紫薇"則在Ｂ培養基上誘導率最高；而"龍吐珠"則只在Ｄ培養基上才可誘導出不定芽。 
2、非洲菊的增殖培養：
   各個(gè)品種之間在增殖的速度上存在顯著(zhù)差異。但在試驗范圍內，隨BA濃度的提高，增殖速度相應提高。但在較高的BA濃度條件下芽苗會(huì )變細、變弱，且隨BA濃度進(jìn)一步提高，芽苗變得更加叢生、細弱。根據這種情況，生產(chǎn)中在努力提高芽苗增殖率的同時(shí)，還應保證分生芽苗的健壯。根據品種不同, 一般把增殖率控制在2.5 -5.0之間。 
3、增殖培養中BA濃度對大田栽培的影響：
   本項試驗中，采用增殖速度中等的"紅寶石"品種進(jìn)行試驗。結果表明，在BA濃度為0.5ppm以下時(shí)，除增殖率隨BA 濃度增加而顯著(zhù)提高外，其余各項指標均無(wú)顯著(zhù)差異。而在BA濃度為1.0PPM及2.0PPM時(shí)，除增殖速度比BA濃度為0.25ppm時(shí)成倍增加外，試管苗還表現出細弱、矮化和脆化等現象，這些現象在BA2.0PPM時(shí)更加明顯。同時(shí)生根率及移栽成活率也隨BA濃度增加略有降低。這些在高濃度BA培養基上連續增殖15代以上的試管苗，移栽到大田后表現出旺盛的分孽力，葉短而多，同時(shí)切花產(chǎn)量明顯降低，且花莖細而矮，花朵明顯小于正常種苗。其中在BA2.0ppm的培養基中增殖的試管苗尤為突出。說(shuō)明過(guò)高的BA濃度不僅會(huì )影響試管苗本身的質(zhì)量，還會(huì )嚴重影響大田生產(chǎn)的切花的產(chǎn)量和品質(zhì)。對生產(chǎn)中其它品種的觀(guān)察也可得出同樣結論。 
4、增殖代數對繁殖速度及大田栽培的影響：
   該項試驗所用品種仍為"紅寶石"。從所示結果可以看出，增殖速度隨著(zhù)增殖代數的增加有明顯提高。增殖到第30代時(shí)繁殖速度分別比第20代和第10代時(shí)提高7％和20％。這種隨增殖代數增加而產(chǎn)生的培養材料對植物激素的依賴(lài)性減小的"馴化"現象在其它植物的組培中也有發(fā)現。試驗中，在增殖30代以?xún)入m然增殖速度有較顯著(zhù)提高，但對試管苗的質(zhì)量，如試管苗的健壯與否、生根率及以后的大田生產(chǎn)中切花的質(zhì)量和產(chǎn)量均無(wú)顯著(zhù)影響。
5、生根及移栽結果：
   非洲菊試管苗大部分品種均易誘導生根。經(jīng)25-30 天的生根培養，所有試驗品種只有"鴻運"生根率低于70-80％，尚有待提高，其余品種的生根率均可達到90％以上，且平均每苗生根都在2.5 條以上。
   將生根苗洗凈根部附著(zhù)物，移入苗床。一周內保持遮光80％和適當的濕度。一周后，適當增加光照，且每周淋一次無(wú)機液肥。在這種條件下，一般成活率均可達到85％以上。
6、討論：
（1）各品種間由花托誘導出不定芽的能力差異很大，品種間對激素種類(lèi)和激素濃度的需求也有很大差異。因此為了獲得較高的不定芽誘導率，需要對激素的種類(lèi)和水平作更廣泛的試驗。
（2）由花托直接誘導出芽，同時(shí)將增殖培養基中激素水平和增殖速度控制在適當的水平，在增殖30代以?xún)�，非洲菊試管苗的總變異率均未超過(guò)2％。此外， 在保持相對低濃度的細胞分裂素水平的情況下，增殖30代以?xún)鹊脑嚬苊�，移栽到大田后表現良好，沒(méi)有明顯的退化現象。表明該技術(shù)既可達到快速繁殖的目的，又可保證種苗的質(zhì)量，可滿(mǎn)足現代化大規模生產(chǎn)的需要。但更高代數的試管苗的相應表現還有待進(jìn)一步觀(guān)察。
（3）組培快繁過(guò)程中植物激素特別是細胞分裂素濃度對以后大田生產(chǎn)的影響很大，當激素濃度過(guò)高時(shí)，會(huì )導致分孽太多，降低切花的產(chǎn)量和質(zhì)量。因此，在組培快繁過(guò)程中，應（4）通過(guò)對非洲菊組織培養技術(shù)的研究，不但將我所所有45個(gè)品種都建立了組培快繁體系, 隨時(shí)為社會(huì )提供大批量的優(yōu)質(zhì)種苗，創(chuàng )造一定的經(jīng)濟效益；還可配合種質(zhì)資源庫的建立及良種繁育，把引進(jìn)及自育最新優(yōu)良品種及時(shí)、快速地推廣到生產(chǎn)中去有利于迅速提高我國非洲菊切花品質(zhì)。而組培快繁過(guò)程中的某些因素對以后大田生產(chǎn)的切花品質(zhì)及產(chǎn)量的影響的研究結果，對完善非洲菊的試管苗生產(chǎn)技術(shù)，保證試管苗質(zhì)量，促進(jìn)非洲菊的規�；�、產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)具有重要意義。
   
   

 

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