鮮乳中抗生素殘留檢驗——2008GB

一、培養基明細：
    名稱(chēng)                         規格       價(jià)格（元）
營(yíng)養瓊脂（NA）                    250g        80
2，3，5-氯化三苯四氮唑(TTC)       10g         135
溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨培養基        250g        75
脫脂乳                             *           *
青霉素G參照溶液                    *           *
磷酸鹽緩沖液(PH7.2)  PBS          250g         80
二、備注
1、濕熱鏈球菌抑制法：
   樣品經(jīng)過(guò)80℃殺菌后，添加嗜熱鏈球菌菌液。培養一段時(shí)間后，嗜熱鏈球菌開(kāi)始增殖。這時(shí)候加人代謝底物2,3,5一氯化三苯四氮哇（TTC)，若該樣品中不含有抗生素或抗生素的濃度低于檢測限，嗜熱鏈球菌將繼續增殖，還原TTC成為紅色物質(zhì)。相反，如果樣品中含有高于檢測限的抑菌劑，則嗜熱鏈球菌受到抑制，因此指示劑TTC不還原，保持原色。
2、嗜熱脂肪芽胞桿菌抑制法
    培養基預先棍合嗜熱脂肪芽胞桿菌芽胞，并含有pH指示劑（澳甲酚紫）。加人樣品并孵育后，若該樣品中不含有抗生素或抗生素的濃度低于檢測限，細菌芽胞將在培養基中生長(cháng)并利用糖產(chǎn)酸，pH指示劑的紫色變?yōu)辄S色。相反，如果樣品中含有高于檢測限的抗生素，則細菌芽胞不會(huì )生長(cháng)，pH指示劑的顏色保持不變，仍為紫色。
3、濕熱鏈球菌抑制法判斷方法
   在白色背景前觀(guān)察，試管中樣品呈乳的原色時(shí)，指示乳中有抗生素存在，為陽(yáng)性結果。試管中樣品呈紅色為陰性結果。如最終觀(guān)察現象仍為可疑，建議重新檢測。
4、嗜熱脂肪芽胞桿菌抑制法判斷方法
   在白色背景前從側面和底部觀(guān)察小試管內培養基顏色。保持培養基原有的紫色為陽(yáng)性結果，培養基變成黃色或黃綠色為陰性結果，顏色處于二者之間，為可疑結果。對于可疑結果應繼續培養30min再進(jìn)行最終觀(guān)察。如果培養基顏色仍然處于黃色一紫色之間，表示抗生素濃度接近方法的最低檢出限，此時(shí)建議重新檢測一次。
5、4%2,3,5一氯化三苯四氮哇（TTC）水溶液
  成分   
      2,3,5一氯化三苯四氮哩（TTC)   1g
      滅菌蒸餾水                    5mL
  制法  
    稱(chēng)取TTC，溶于滅菌蒸餾水中，裝褐色瓶?jì)扔?℃一5℃保存。如果溶液變?yōu)榘胪该鞯陌咨�或淡褐色，則不能再用。臨用時(shí)用滅菌蒸餾水5倍稀釋?zhuān)�成�?％水溶液。
6、青霉素G參照溶液
 成分 
    青霉素G鉀鹽      30.0mg
    無(wú)菌磷酸鹽緩沖液  適量
    無(wú)抗生素的脫脂乳  適量
 制法    精密稱(chēng)取青霉素G鉀鹽標準品，溶于無(wú)菌磷酸鹽緩沖液中，使其濃度為100IU/mL—1000IU/ml。再將該溶液用滅菌的無(wú)抗生素的脫脂乳稀釋至0.006IU/mL，分裝于無(wú)菌小試管中，密封備用。-20℃保存不超過(guò)6個(gè)月。   
   

 

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