出口食品中沙門(mén)氏菌（辛酯酶熒光）檢驗方法 SN 0332-94

出口食品中沙門(mén)氏菌（辛酯酶熒光）檢驗方法 SN 0332-94
1 主題內容與適用范圍
本標準規定了用 4-甲基傘形酮辛酯試劑快速檢驗出口食品中沙門(mén)氏菌的方法。
本標準適用于出口肉品、蛋品沙門(mén)氏菌的檢驗，其他食品可參照使用。
2 引用標準
SN 0170 出口食品中沙門(mén)氏菌（包括亞利桑那菌）檢驗方法
3 符號
MUCAP:4-methylumbelliferyl-caprylate（4-甲基傘形酮辛酯）的縮寫(xiě)。
MUCAP:試劑：用 4-甲基傘形酮辛酯配成的試劑的縮寫(xiě)。
SS瓊脂：沙門(mén)氏菌和志賀氏菌瓊脂培養基。
HE瓊脂：Hektoen Enteric 瓊脂培養基。
4 設備與材料
4.1 紫外光燈：波長(cháng) 366 nm，功率≥6W。
4.2 放大鏡：3～4X。
4.3 毛細滴管。
5 培養基與試劑
培養基與試劑按 SN 0170 第5章，另補充以下部分：
5.1 SS瓊脂培養基（含1％蔗糖）：見(jiàn)附錄 A1。
5.2 HE瓊脂培養基：見(jiàn)附錄 A2。
5.3 MUCAP試劑：見(jiàn)附錄 A3。
5.4 氧化酶試紙：見(jiàn)附錄 A4。
6 樣品制備及增菌培養
參照SN 0170進(jìn)行。
7 分離培養
7.1 將增菌培養液搖勻,挑取一接種環(huán)，劃線(xiàn)接種于 SS和 HE瓊脂培養基各一個(gè)，于 36
±1℃培養 24±2h。
7.2 觀(guān)察各瓊脂平板上有無(wú)可疑沙門(mén)氏菌菌落。如無(wú)可疑菌落，應再繼續培養24±2h。
沙門(mén)氏菌的菌落特征見(jiàn)表 1。
表 1 沙門(mén)氏菌屬菌落特征
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菌 落 特 征
──────────────────┬───────────────────
SS平板 │ HE平板
──────────────────┼───────────────────
圓形,邊緣整齊；淡黃色,半透明，有或無(wú)│圓形，邊緣整齊；藍綠色至藍色，有或無(wú)黑
黑色中心；周?chē)�培養基透明淡黃色 │色中心；周?chē)�培養基透明墨綠色
──────────────────┴───────────────────
8 測定
8.1 從培養的分離培養基上選可疑沙門(mén)氏菌菌落（盡量選較大、分離較好的單個(gè)菌落），
用玻璃筆做好標記并編號。
8.2 用毛細滴管吸取 MUCAP試劑，加一滴于編號的菌落上。待一個(gè)平板的被檢菌落全部
滴加試劑后，將平板拿至366nm紫外光燈下檢視。發(fā)藍色熒光的為 MUCAP試驗陽(yáng)性，將陽(yáng)
性菌落號記錄下來(lái)。
8.3 用接種環(huán)挑取熒光反應陽(yáng)性菌落，涂于氧化酶試紙上，觀(guān)察涂菌點(diǎn)是否變藍色。于
10min內變藍色為氧化酶試驗陽(yáng)性；不變色為陰性。
9 結果的報告
9.1 MUCAP試驗陰性的樣品，報告為“未檢出沙門(mén)氏菌”
9.2 MUCAP試驗陽(yáng)性氧化酶試驗陰性的樣品，按SN 0170第四章繼續進(jìn)行生化和血清學(xué)試
驗，并根據試驗結果報告。
附 錄 A 
培養基和試劑
（補充件）
A1 SS瓊脂培養基（含1％蔗糖）
牛肉浸膏 5.0g
蛋白胨 5.0g
乳糖 10.0g
蔗糖 10.0g
膽鹽No.3 8.5g
檸檬酸鈉 8.5g
硫代硫酸鈉 1.0g
檸檬酸亞鐵 1.0g
煌綠 1.0g
中性紅 0.025g
瓊脂 13.5g
蒸餾水 1 000ml
將各成分溶于水，煮沸4～5min。最終pH7.0±0.2。冷至55～66°C，傾注平板。
A2 HE瓊脂培養基
(月示)蛋白胨 12.0g
酵母浸出物 3.0g
乳糖 12.0g
蔗糖 12.0g
水楊素 2.0g
混合膽鹽 9.0g
氯化鈉 5.0g
硫代硫酸鈉 5.0g
檸檬酸鐵銨 1.5g
溴麝香草酚藍 0.065g
酸性復紅 0.1g
瓊脂 14.0g
蒸餾水 1000mL
將各成分溶于水，煮沸4～5min。最終pH7.5±0.2。冷至55～60°C，傾注平板。
A3 MUCAP試劑
按生產(chǎn)者提供的使用說(shuō)明制備工作稀釋液，貯于4°C冰箱備用。
A4 氧化酶試紙
氧化酶試液：
甲液：1％α-萘酚乙醇液；
乙液：1％二甲基對苯二胺草酸鹽水溶液。
氧化酶試紙：
將甲液與乙液等量混合。取定性濾紙，浸透混合液后，于70～80°C烘箱烘干。剪成
適當大小的紙條，密封于塑料袋或瓶中，貯于4°C冰箱備用。
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附加說(shuō)明：
本標準由中華人民共和國國家進(jìn)出口商品檢驗局提出。
本標準由中華人民共和國內蒙古進(jìn)出口商品檢驗局起草。
本標準主要起草人甄宏太、楊素賢、劉中學(xué)、蘇慶、周云霞。
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中華人民共和國國家進(jìn)出口商品檢驗局1994-12-26批準 1995-05-01實(shí)施��

 

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