出口食品中霍亂弧菌檢驗方法

一、培養基明細：
   名稱(chēng)                         規格                  價(jià)格（元）
堿性蛋白胨水（APW）           250g                     70
TCBS瓊脂                      250g                     95
三糖鐵瓊脂（TSI）             250g                     85
雙糖鐵瓊脂（KIA）             250g                     85
T1N1瓊脂                      250g                     85
精氨酸葡萄糖斜面瓊脂（AGS）   100g                     385
Hugh-Leifson葡萄糖肉湯（HLGB）  *                       *
MR-VP肉湯                     20支                     15
ONPG胨水                      20支                     35
Andrade氏糖類(lèi)肉湯             250g                     80
Andrade氏指示劑               100ml                    50
氧化酶試劑                     1g                      50  
粘絲試驗溶液                    *                       *
革蘭氏染色液                   5ml*8                    40
5%紅細胞生理鹽水                *                       *
50萬(wàn)單位多黏菌素B紙片           *                       *
10ug和150ugO/129紙片            *                       *
霍亂弧菌診斷血清（O1群）       1ml*12                   480
霍亂弧菌診斷血清（O139群）      1ml                     50
二、備注：
1、依據SN/T 1022—2001出口食品中霍亂弧菌檢驗方法 適用于出口水產(chǎn)品及其它食品的檢驗。
2、術(shù)語(yǔ)：
   霍亂弧菌：為革蘭氏陰性菌，菌體彎曲呈弧狀或逗點(diǎn)狀，菌體一端有單根鞭毛和菌毛，無(wú)莢膜與芽胞。經(jīng)人工培養后，易失去弧形而呈桿狀。細菌運動(dòng)極為活潑，呈流星穿梭運動(dòng)。營(yíng)養要求不高，在PH8.8～9.0的堿性蛋白胨水或平板中生長(cháng)良好。因其他細菌在這一PH不易生長(cháng)，故堿性蛋白胨水可作為選擇性增殖霍亂弧菌的培養基。在堿性平板上菌落直徑為2mm,圓形，光滑，透明�！�
 　霍亂弧菌能還原硝酸鹽為亞硝酸鹽，靛基質(zhì)反應陽(yáng)性，當培養在含硝酸鹽及色氨酸的培養基中，產(chǎn)生靛基質(zhì)與亞硝酸鹽，在濃硫酸存在時(shí)，生成紅色，稱(chēng)為霍亂紅反應，但其他非致病性弧菌亦有此反應，故不能憑此鑒定霍亂弧菌。EL Tor型霍亂弧菌與古典型霍亂弧菌生化反應有所不同。前者Vp陽(yáng)性而后者為陰性。前者能產(chǎn)生強烈的溶血素，溶解羊紅細胞，在血平板上生長(cháng)的菌落周?chē)�出現明顯的透明溶血環(huán)，古典型霍亂弧菌則不溶解羊紅細胞。個(gè)別EL Tor型霍亂弧菌株亦不溶血。根據弧菌O抗原不同，分成Ⅵ個(gè)血清群，第Ⅰ群包括霍亂弧菌的兩個(gè)生物型。第Ⅰ群A、B、C三種抗原成份可將霍亂弧菌分為三個(gè)血清型：含AC者為原型（又稱(chēng)稻葉型），含AB者為異型（又稱(chēng)小川型），A、B、C均有者稱(chēng)中間型（彥島型）�；魜y弧菌對熱，干燥，日光，化學(xué)消毒劑和酸均很敏感，耐低溫，耐堿。濕熱55℃，15分鐘，100℃，1～2分鐘，水中加0.5ppm氯15分鐘可被殺死。0.1%高錳酸鉀浸泡蔬菜、水果可達到消毒目的。在正常胃酸中僅生存4分鐘。
3、粘絲試驗溶液：溶解0.5g去氧膽酸鈉于100ml水中，擰緊瓶蓋保存于冰箱中，無(wú)需高壓滅菌�；魜y弧菌在鈣溶液中被乳化后，1min內形成粘液狀團塊。當粘塊從玻片上被拉出2cm—3cm時(shí)呈粘絲。
4、Hugh-Leifson葡萄糖肉湯（HLGB）：
配方：
蛋白胨                 2.0g
酵母浸粉               0.5g
氯化鈉                 30.0g
葡萄糖                 10.0g
溴甲酚紫               0.015g
瓊脂                    3.0g
蒸餾水                 1000ml
制法：將各成分（溴甲酚紫除外）加入蒸餾水中，充分混勻，攪拌加熱溶解調節pH7.4，加入溴甲酚紫，混勻，分裝于15mm*150mm試管的1/3容量，121℃高壓滅菌15min。接種后覆蓋約1ml滅菌礦物油以檢查葡萄糖發(fā)酵。   
   

 

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